vWF及TSP-1在下肢深靜脈血栓形成急性期患者血中的表達(dá)及相關(guān)性研究

薛金枝，范東旭，徐桂超，孫 瑤，鄒仁亮，金 松

（佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院血管外科，黑龍江 佳木斯 154003）

靜脈血栓栓塞癥（V T E）包括深靜脈血栓形成（DVT）和肺動(dòng)脈栓塞（PE），居于心肌梗死和缺血性腦卒中后的第三大常見(jiàn)血管疾病1。據(jù)Mozaffarian D等統(tǒng)計(jì)，在美國(guó)，白種人平均年發(fā)病率為108人/10萬(wàn)人，黑種人為78人/10萬(wàn)人2，VTE后的5年生存率估計(jì)約為72%，患病30年后的死亡率：DVT增長(zhǎng)至3/5，PE則為6/113。在中國(guó)漢族人群的12421次尸檢中發(fā)現(xiàn)存在4.7%的人群死亡原因是肺動(dòng)脈栓塞，由此表明亞洲人可能低估或未完全檢測(cè)到VTE的真實(shí)發(fā)病率。

深靜脈血栓形成的形成機(jī)制尚未完全明確，人體內(nèi)血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）與凝血酶敏感蛋白-1（thrombospondin-1，TSP-1）在靜脈血栓形成中所起的作用以及相互之間的關(guān)系也尚不明確。本研究擬通過(guò)檢測(cè)下肢DVT急性期患者血中vWF與TSP-1的濃度，來(lái)探索vWF與TSP-1在DVT早期病程中的具體變化以及相關(guān)機(jī)制，為DVT急性期的早期治療提供新的理論支持。

1 資料與方法

1.1 一般資料

篩選佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院血管外科2016年11月至2017年09月收治的下肢DVT患者30例為實(shí)驗(yàn)組。篩選標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)多普勒彩色超聲檢查或下肢靜脈造影確診的初患；病程均在2周內(nèi)，入院前未行相關(guān)系統(tǒng)治療；患者自愿原則（均簽署知情同意書(shū)）。排除標(biāo)準(zhǔn)：病程＞2周；既往有深靜脈血栓形成病史者；有易栓癥（SLE、腎病綜合征、血栓性疾病遺傳史者、高同型半胱氨酸血癥）的患者。

對(duì)照人群由在同一期間在同一大學(xué)醫(yī)院的體檢中心接受常規(guī)檢查，進(jìn)行健康檢查的門(mén)診病人30例。

1.2 標(biāo)本與材料

下肢DVT急性期患者在住院后，未進(jìn)行系統(tǒng)治療前的2小時(shí)內(nèi)采血，對(duì)照組于清晨空腹采血，離心后取血漿置于-80℃冰箱保存，集中檢測(cè)。

1.3 采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）

將血漿標(biāo)本置于37℃恒溫鍋內(nèi)，水浴10分鐘，再在室內(nèi)放置15分鐘，嚴(yán)格按照ELISA法的操作流程來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得vWF及TSP-1的OD值，換算成血漿濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件分析：計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 基本信息

實(shí)驗(yàn)組女14例，男16例；年齡41～80歲，平均62.43歲；分別為左下肢DVT 19例，右下肢DVT 11例；對(duì)照組其中女18例，男12例；年齡16～63歲，平均38.17歲。

2.2 vWF、TSP-1濃度對(duì)比

DVT組和對(duì)照組患者血中vWF、TSP-1濃度呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為r=0.506（P＜0.01）。如表1。

表1 下肢DVT患者與健康體檢者的vWF及TSP-1血漿濃度比較（ ±s）

表1 下肢DVT患者與健康體檢者的vWF及TSP-1血漿濃度比較（ ±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05

分組 n vWF（U/L） TSP-1（ng/mL）實(shí)驗(yàn)組 30 991.59±80.23* 272.54±45.84對(duì)照組 30 609.90±74.85* 76.25±12.61

3 討 論

人類(lèi)壽命的延長(zhǎng)導(dǎo)致全球死亡和殘疾的主要原因從之前的傳染性疾病轉(zhuǎn)變?yōu)榉莻魅拘约膊?，VTE發(fā)病率隨著年齡的增加而增加，并且在老年人中尤其明顯，中國(guó)正步入老齡化社會(huì)，VTE對(duì)社會(huì)疾病負(fù)擔(dān)的影響不容忽視。

VTE包括PE和DVT，超過(guò)90%的急性PE是由于下肢DVT的血栓脫落造成的5。其中DVT的頻繁發(fā)生部位是容易血流瘀滯的靜脈瓣膜尖，隨著血栓發(fā)展，血細(xì)胞和纖維蛋白聚集，產(chǎn)生具有“尾巴”的更大的血栓，最終可能導(dǎo)致靜脈腔全部或部分性阻塞6。本實(shí)驗(yàn)主要篩選下肢DVT急性期患者用于研究深靜脈血栓形成早期發(fā)病機(jī)制中vWF及TSP-1的相互作用。

UL-vWF對(duì)血小板的受體，GPIb/IX/V膜復(fù)合物具有最高的親和力，以vWF為橋梁，血小板可與膠原鏈接，促進(jìn)血小板的黏聚。TSP-1與vWF相互作用，可活化血小板，促進(jìn)其黏聚，進(jìn)一步形成血栓。同時(shí)在以往的多個(gè)研究7中也得出：vWF及TSP-1介導(dǎo)的血小板黏附是血栓形成的起始，同時(shí)血小板活化可釋放更多的vWF及TSP-1，促進(jìn)和穩(wěn)定血栓，從而形成血小板血栓。血小板在動(dòng)脈血栓形成中的中心作用已得到很好的證實(shí)，該作用是預(yù)防動(dòng)脈血栓形成藥物治療的主要靶點(diǎn)8，多個(gè)研究報(bào)道9證明抗血小板治療在預(yù)防VTE的方面效果與抗凝治療相近。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究vWF及TSP-1在深靜脈血栓形成急性期的作用，間接證明血小板在下肢DVT急性期中的積極作用，為急性期應(yīng)用抗血小板治療提供新的依據(jù)。同時(shí)，是否可以從vWF及TSP-1的作用位點(diǎn)來(lái)研究新的抗血栓藥物，希望從今后的試驗(yàn)中找到答案。對(duì)于患者早期應(yīng)用抗血小板治療能否改善癥狀，改善預(yù)后，擬在后續(xù)試驗(yàn)中進(jìn)一步得到證實(shí)，以此探討血小板治療在DVT急性期治療中的意義。

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