黑米花青苷復(fù)方軟膠囊生產(chǎn)工藝研究

2018-06-05 08:38:44韓惠敏趙天煜王志男李新生沈正揚

現(xiàn)代食品 2018年7期

◎ 李雯，韓惠敏，趙天煜，王志男，李新生,2,3，沈正揚

（1.陜西理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中 723000；2.陜西省資源生物重點實驗室，陜西漢中 723000；3.陜南秦巴山區(qū)生物資源綜合開發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心，陜西漢中 723000）

黑米花青苷是一種天然的食用色素資源，具有極高的藥用價值。研究表明，黑米花青苷能調(diào)節(jié)血脂、保肝護(hù)肝、抗癌抗腫瘤等作用[1]。目前市場上有關(guān)黑米的保健產(chǎn)品較多，如黑米酒黑米醋、黑米保健茶、黑米粉條等，但黑米花青苷產(chǎn)品在國內(nèi)市場上還不多見。隨著黑米及其花青苷保健食品的開發(fā)與熱銷，黑米花青苷的市場前景將十分廣闊[2]。

黑米花青苷復(fù)方軟膠囊是陜西省資源生物重點實驗室依據(jù)口服黑米營養(yǎng)液專利（專利號CN92115313.9）配方為基礎(chǔ)研發(fā)的一種保健品，目前正在研發(fā)試生產(chǎn)階段。該復(fù)方軟膠囊內(nèi)容物是由黑米花青苷及西洋參、何首烏、靈芝3種中藥材中的有效成分構(gòu)成。本研究旨在通過優(yōu)化黑米花青苷復(fù)方軟膠囊生產(chǎn)工藝，從而為黑米花青苷復(fù)方軟膠囊的生產(chǎn)提供工藝參數(shù)。

1 材料

HSR-100 型軋囊機（北京東方慧神科技有限公司），JM50型膠體磨（上海環(huán)龍實業(yè)公司），高效液相色譜儀（安捷倫），紫外可見分光光度計UV-1750（島津公司），智能崩解儀（ZBS-6E 天津天大天發(fā)），黑米購自洋縣周大黑，西洋參、何首烏、靈芝均購自漢中市中藥藥材市場，大豆油（PEG400醫(yī)藥級，陜西樂博生化科技有限公司），矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標(biāo)品（陜西樂博生化科技有限公司，批號為7084-24-4，純度≥98%），2,3,5,4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品（上海源葉生物科技有限公司，批號為Z110844，純度≥98%）、人參皂苷Re（上海源葉生物科技有限公司，批號為B21055，純度≥98%）。

2 方法

2.1 黑米花青苷復(fù)方軟膠囊內(nèi)容物的制備

黑米花青苷用60%乙醇溶液，60 ℃水浴條件下提取3次，每次1 h，合并提取液，濃縮至適量，干燥得黑米花青苷浸膏；西洋參皂苷用70%的乙醇溶液，90 ℃水浴條件下提取2次，每次3 h，合并提取液濃縮至適量，干燥得西洋參皂苷浸膏[3]；二苯乙烯苷用60%乙醇提取，40 ℃水浴條件下提取2次，每次66 min，合并提取液濃縮至適量[4]，干燥得何首烏浸膏；靈芝多糖用水提取[5]，98 ℃水浴條件下提取2次，每次2.5 h，合并提取液濃縮至適量，干燥得靈芝多糖浸膏。

2.2 內(nèi)容物處方確定

2.2.1 內(nèi)容物基本處方的確定

依據(jù)口服黑米營養(yǎng)液專利（專利號CN92115313.9）配方，黑米∶西洋參∶靈芝∶何首烏=15∶8∶5∶4，在該配方基礎(chǔ)上，通過計算配方量中各藥材中有效成分含量進(jìn)行換算，得到黑米花青苷復(fù)方軟膠囊中4種浸膏的比例。

2.2.2 稀釋劑和助懸劑的選擇及用量確定

本實驗選擇大豆油和PEG400為分散劑，蜂蠟為助懸劑，通過檢測內(nèi)容物沉降系數(shù)，來確定這兩種助懸劑的最佳用量。

（1）流動性。取一定量的內(nèi)容物，加入不同量的稀釋劑，加熱攪拌使混合均勻，冷卻后通過觀察其流動性（以藥匙取適量混合液，藥匙與水平面成45°，觀察混合液從藥匙上滴下的情況）[6]。

（2）沉降系數(shù)。沉降體積比取供試品，充分振搖使混懸物分散均勻，迅速用具塞量筒量取50 mL至同一內(nèi)徑的50 mL具塞量筒中，密塞，用力振搖1 min，記下混懸液的初始高度H0，再將其放入25 ℃恒溫水浴鍋，3 d后觀察其沉降情況，并記下沉降面的高度H1，計算沉降體積比F（F=H1/H0）。F值越接近1，說明藥液越穩(wěn)定[7]。

2.3 有效成分含量測定

取出2粒制備出的膠囊，分別剝開取出內(nèi)容物，精密稱取0.5 g，分別置于具塞試管中，加入試劑50 mL稱重，回流提取30 min，稱重加相應(yīng)試劑補至初始重量。其中黑米花青苷采用60%乙醇、西洋參皂苷提取采用70%乙醇、靈芝多糖采用水、二苯乙烯苷采用56%乙醇。

黑米花青苷含量的測定以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為標(biāo)品，參照王艷龍[8]的紫外-可見分光光度計法測定；西洋參皂苷含量測定以人參皂苷Re為標(biāo)品，參照曲正義等[9]的紫外-可見分光光度法測定；多糖含量測定參照周吳萍[5]等的蒽酮硫酸法測定；何首烏中二苯乙烯苷含量以2,3,5,4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，參照2015版藥典的高效液相色譜法（附錄ⅥD）測定。

2.4 膠囊崩解時限測定

參照2015版藥典附錄Ⅻ A方法對膠囊崩解時限進(jìn)行測定。

3 結(jié)果與分析

3.1 內(nèi)容物處方確定

3.1.1 稀釋劑PEG400與大豆油用量確定

由于黑米花青苷不溶于油脂，并且黑米花青苷為極性物質(zhì)易與囊殼發(fā)生互溶現(xiàn)象，故本研究的稀釋劑選擇大豆油和PEG400。將浸膏依據(jù)配方混合后，以流動性為指標(biāo)初步確定浸膏與稀釋劑的比例為1∶5。在此比例下，以沉降系數(shù)為指標(biāo)確定大豆油與稀釋劑的用量，結(jié)果見表1。

表1 大豆油與PEG400不同比例內(nèi)容物穩(wěn)定性檢測表

由表1可知，PEG400的含量越高內(nèi)容物越穩(wěn)性越好，但是PEG400用量過大會影響膠皮的崩解，故選擇PEG400與大豆油的比例為3∶2。

3.1.2 助懸劑蜂蠟用量確定

由于內(nèi)容物穩(wěn)定性并未達(dá)到最佳，因而通過添加一定蜂蠟來提高內(nèi)容物穩(wěn)定性。以流動性和沉降系數(shù)為指標(biāo)確定蜂蠟的用量，結(jié)果見表2。

表2 蜂蠟不同用量內(nèi)容物穩(wěn)定性檢測表

由表2結(jié)果可知，蜂蠟用量為2%時，制備得到的混合液的流動性及穩(wěn)定性最佳，故蜂蠟用量選擇2%。通過對稀釋劑PEG400與大豆油及助懸劑蜂蠟用量的研究，最終確定內(nèi)容物配方為浸膏∶PEG400∶大豆油=1∶3∶2，蠟用量選擇2%。

3.2 囊殼配方中遮光劑及色素用量確定

黑米花青苷復(fù)方軟膠囊的前期囊殼配方為明膠∶甘油∶遮光劑∶水∶=1∶0.4∶0.03∶1，后期實驗過程中發(fā)現(xiàn)黑米花青苷極不穩(wěn)定，見光易分解，故需添加一定量色素，提高黑米花青苷的穩(wěn)定性。由于色素用量應(yīng)使囊殼色澤深于膠囊內(nèi)藥液，并且與內(nèi)容物及明膠之間無配伍問題，故綜合以上并參照食品添加劑標(biāo)準(zhǔn)，選擇色素為焦糖色素，遮蔽劑為二氧化鈦（TiO2）作為囊殼輔料，并對其用量進(jìn)行考察，結(jié)果見表3。

表3 色素及遮光劑用量篩選表

TiO2用量在0.3%～0.7%、焦糖色素在0.3%～0.5%時遮蔽效果較好，但色素及遮光劑用量太大，可能會影響崩解，綜合考慮，采用TiO20.5%、色素0.3%。

3.3 膠囊中四種成分含量測定

依據(jù)上述方法檢測，矢車菊素的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.172 6X-0.001 7（R2=0.999），人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.099 9X-0.053 7（R2=0.997 3），多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.140 6X-0.013（R2=0.998 8），二苯乙烯苷標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=1 176.2X-9.464 8（R2=0.995 5）。經(jīng)檢測，每粒膠囊中黑米花青苷含量為1.125 mg、西洋參皂苷含量為0.31 mg、靈芝多糖含量為0.58 mg、二苯乙烯苷含量為0.29 mg。