妊娠期糖尿病孕婦血清miR-126、sVCAM-1水平與糖脂代謝的相關性

王 青 寇 莉 李小林

湖北省黃石市第二醫院(435002)

妊娠期糖尿病(GDM)血糖過高可導致妊娠期高血壓等并發癥[1]。病因尚不十分清楚，胰島素抵抗和胰島 β 細胞分泌降低被認為是GDM發病機制的重要環節[2]。2型糖尿病患者血漿miRNA表達異常升高，對糖尿病起到預警作用[3]，外周血miRNA表達穩定，對糖尿病診治意義重大。sVCAM-1屬免疫球蛋白家族,可調節細胞間相互作用[4]。高表達可促使單核細胞與血管內皮細胞黏附[5]，并與冠心病患者血脂異常存在一定關系[6]。推測miR-126、sVCAM-1 與GDM患者糖脂代謝可能有關。鑒于目前尚無GDM與miR-126、sVCAM-1關系的研究，本文研究了GDM患者外周血清miR-126、sVCAM -1的表達特點，及其與糖脂代謝關系，為臨床診治提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料

GDM診斷：參照美國糖尿病學會標準妊娠中期糖篩查(50g)≥7.8mmol/L,OGTT1h≥10.0mmol/L/OGTT2h≥8.6mmol/L/OGTT3h≥7.8mmol/L；或糖篩查(50g)FPG≥11.1mmol/L且FPG≥5.8mmol/L[7]。納入標準：妊娠≥16周；在本院規律產檢；資料完整；知情同意本研究。排除妊娠期高血壓、心臟病等妊娠合并癥、不配合本研究、終止妊娠等。依據以上標準，選擇2016年2月—2018年2月本院婦產科及中西醫結合科門診就醫的GDM患者為觀察組，并選擇同期正常妊娠產檢孕婦為對照組。

1.2 實驗室檢測

1.2.2生化指標兩組孕婦均采集空腹靜脈血離心取上清液，美國貝克曼DXI 800全自動化學發光免疫分析儀測定空腹血糖(FPG)和空腹胰島素(FINS)，并采用穩態模型法計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR)=(FPG×FINS)/22.5。全自動生化檢測儀(美國雅培C 8000)檢測TG、TC、apoA、apoB、HDL-C、LDL-C。酶聯免疫法測定血清sVCAM-1。

1.2.3 miR-126血液標本提取淋巴細胞，常規處理提取，RNA沉淀物至干燥，紫外分光光度法鑒定RNA純度和完整性。RT-PCR反應。2-ΔΔCt法計算miR-126相對表達量。引物設計軟件Primer Premier 5.0，引物合成為金斯瑞生物科技有限公司。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 一般臨床資料

兩組一般資料對比無差異(P>0.05)(表1)。

2.2 兩組血脂代謝指標比較

觀察組血清TG、LDL-C、apoA、apoB水平高于對照組，HDL-C低于對照組(均P<0.05)，TC水平兩組對比無差異(P>0.05)，見表2。

表1 兩組一般臨床資料比較

表2 兩組血脂代謝指標比較

2.3 兩組血糖代謝及相關指標比較

觀察組FPG、FINS、HOMA-IR、sVCAM-1均高于對照組，miR-126表達低于對照組(均P<0.05)，見表3。

表3 兩組血糖代謝及相關指標比較

2.4 miR-126、sVCAM-1與血脂代謝相關性分析

miR-126與TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈負相關(r=-0.328、-0.510、-0.324、-0.336、-0.616、-0.456、-0.315，P<0.05)，與HDL-C呈正相關(r=0.335，P<0.05)，與TC、apoB無關(r=-0.013、-0.015，P>0.05)。sVCAM-1與TG、FPG、HOMA-IR呈正相關(r=0.433、0.637、0.301，P<0.05)，與HDL-C呈負相關(r=-0.325，P<0.05)，與TC、LDL-C、FINS、apoA、apoB無關(r=0.040、0.158、0.012、0.008，P>0.05)。見表4。

2.5 影響miR-126、sVCAM-1的因素分析

分別以miR-126、sVCAM-1為因變量，以TG、TC、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB、FPG、FINS、HOMA-IR等為自標量，校正混雜因素影響，逐步排除無關項目，最終TG、HOMA-IR是影響miR-126的獨立因素，TG與sVCAM-1獨立相關，見表4。

3 討論

目前研究證明microRNA(MiRNA)直接或間接參與了糖尿病的發病機制，在胰島細胞發育、糖脂代謝等中均發揮主要作用[8-9]。miRNAs具有高度保守和內源性，通過與靶基因3’非翻譯區互補配對結合轉錄，調控蛋白編碼基因的表達。現有研究顯示，miRNA參與脂肪細胞分化、胰島素分泌、糖脂代謝的調控過程，同時可能參與胰島素抵抗的發生[10]。miR-126是內皮細胞特異性高表達miRNA[11]。在2型糖尿病不同階段呈下降趨勢[12]，但目前尚缺乏GDM患者miR-126變化特征的報道。

表4 影響miR-126、sVCAM-1的logistic回歸分析

本研究GDM患者血清miR-126表達明顯低于正常孕婦，說明miR-126可能參與GDM發病機制。分析與GDM糖脂代謝指標的相關性發現，miR-126與TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈負相關，與HDL-C呈正相關，TG、HOMA-IR是影響miR-126的獨立因素，說明miR-126可能參與了GDM患者糖脂代謝異常的進程，同時血脂、胰島素抵抗狀態影響了miR-126的表達。有研究發現[13-14]，在合并心血管病變的糖尿病患者中miR-126表達明顯降低，可能與miR-126表達下降抑制了內皮型一氧化氮合酶而降低一氧化氮生物活性，或降低p65蛋白巰基亞硝基化作用激活核因子κB表達介導內皮損傷有關。黃婷等[15]研究顯示糖尿病患者血漿miR-126表達明顯降低，并且與胰島及內皮功能有關，而TC水平是影響miR-126表達的獨立因素，說明miR-126與糖脂代謝有關。

sVCAM-1是廣泛分布于內皮細胞、單核細胞、中性粒細胞表面的免疫球蛋白,高度表達于內皮細胞，使細胞間產生黏附作用,并通過分泌各種活性物質,導致血管增生和動脈粥樣硬化斑塊的形成。長期高脂血癥狀態，尤其是低密度脂蛋白和膽固醇可損傷動脈內膜功能，刺激內皮細胞、單核細胞、淋巴細胞表面發生變化，刺激黏附因子表達上調，從而使內皮細胞與單核細胞的黏附作用增強，并介導一系列細胞內炎癥反應[16]。劉海寧等[17]研究顯示，不穩定型心絞痛患者血清sVCAM-1與血清內臟脂肪素呈正相關，說明血清sVCAM-1與不穩定型心絞痛患者血脂異常有關。但目前尚缺乏sVCAM-1在GDM中研究。本研究GDM患者血清sVCAM-1水平顯著升高，且與TG、FPG、HOMA-IR呈正相關，與HDL-C呈負相關，同時TG是影響sVCAM-1水平的獨立因素。提示sVCAM-1可能參與了GDM糖脂代謝異常的發生，而高血脂水平可能促進sVCAM-1水平升高。

綜上，GDM患者血清miR-126表達下調，sVCAM-1水平升高，血清miR-126、sVCAM-1與GDM患者糖脂代謝相關，miR-126、sVCAM-1可能參與GDM患者糖脂代謝過程，同時血脂水平，胰島素抵抗狀態也影響miR-126與sVCAM-1水平。miR-126、sVCAM-1與糖脂代謝在GDM發病過程中可能存在協同調控作用，但機制尚不清楚，仍待進一步研究證實。