7歲以下β地中海貧血患兒不同基因型和表型的關聯分析

陸燕珍 黃誠花 石祺淇

地中海貧血屬于常染色體隱性遺傳性疾病, 一般分為型地中海貧血和β型地中海貧血, 其中, β型地中海貧血又分為β0型和β+型［1,2］。臨床經過研究發現, β地中海貧血的發病機制為人類的β珠蛋白基因存在缺陷, 導致β珠蛋白合成發生缺失或者減少, 且流行病學資料中顯示, 地中海貧血患者的不同基因型與表型之間存在密切的關聯, 且突變頻率存在明顯的差異［3］。本次研究主要分析并探討了7歲以下β地中海貧血患兒中不同基因型以及表型之間存在的密切關聯性。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究選取了本院2016年10月～2017年10月收治的155例β地中海貧血患兒作為研究對象, 其中男89例, 女66例；年齡0～7歲, 平均年齡(3.21±1.27)歲；民族包括漢族83例、壯族51例、其他民族21例。所有患兒家長均已經直銷本次實驗局限性、風險性, 且已經簽署知情同意書。

1.2 方法 對本次研究所選取的155例患兒進行外周血細胞檢測和血清鐵蛋白測定。外周血細胞檢測主要采用日本SYSMES公司生產的SE2100型全自動血細胞分析儀進行常規血液學分析；血清鐵蛋白測定主要利用電化學發光免疫法, 操作過程完全遵照用于測試的試劑盒說明書。所有患兒經過外周血細胞檢測和血清鐵蛋白測定后, MCH＜27 pg、MCV＜80 fl、鐵蛋白＞12 μg/L的患兒采用Sebia或者高效液相色譜技術進行血紅蛋白組分析。所有分析過程均完全按照說明書操作, 若常規基因并不能夠對未知突變或者缺失進行檢測, 則采用多重連接探針擴增技術(MLPA)法或者直接測序進行檢測。

2 結果

本次研究中, 7歲以下的β地中海貧血患兒中, 基因型主要包括 CD17(A-T)、CD14-15、CD27-28、CD29、CD41-42(-TTCT)、CD43(G-T)、CD71-72(+A)、IVSII-654(C-T)、IVSI-I(G-T)、NT-28(A-G)、βE, 表型主要有β0和β+兩種。在不同基因型中最常見的突變類型為CD41-42(-TTCT), 其次為CD17(A-T), 突變率分別為47.10%和28.39%。見表1。

表1 7歲以下β地中海貧血患兒不同基因型和表型情況分析(n, %)

3 討論

地中海貧血即珠蛋白生成障礙性貧血, 又被稱為海洋性貧血, 屬于遺傳性溶血性貧血疾病。該疾病緣于多樣且復雜的基因缺陷, 導致機體內缺乏的珠蛋白鏈數量、類型、臨床癥狀均存在比較大的變異性。地中海貧血在我國分布最廣的地區為廣東、廣西和四川, 北方則比較少見。β地中海貧血(β珠蛋白生成障礙性貧血)具有相當復雜的分子病理, 目前已知的β基因突變已經有100種以上, 均主要由于基因的點突變, 其中少數由于基因的缺失［4］。

β地中海貧血患兒在接受檢查時需要按照病情輕重分為輕型、中間型和重型。曾祥興等［5］在其研究當中表示,輕型的β地中海貧血患兒會發生成熟的紅細胞輕度形態改變, 紅細胞的滲透脆性一般表現為正常或者降低, 血紅蛋白檢測中顯示血紅蛋白(Hb)A2的含量會增高, 但是HbF的含量正常；中間型的β地中海貧血患兒會發生外周血象和骨髓象的改變, 紅細胞的滲透脆性則會降低, 血紅蛋白檢測中顯示HbF的含量處于正常水平或者發生增高；重型的β地中海貧血患兒的外周血象會呈現出小細胞低色素性的貧血,紅細胞的大小并不一致, 甚至會出現靶型、異型、碎片、有核、點彩等, 網織紅細胞則處于正常水平或升高, 紅細胞的滲透脆性發生比較明顯的降低, 血紅蛋白檢測中發現HbF的含量發生了明顯的增高。李嵐等［6］的研究中發現, β地中海貧血患兒的不同基因型和不同地中海表型之間存在一定關聯性, 且該關聯性比較復雜, 必須要通過患兒的臨床疾病特點以及比較常規的實驗室血液學檢查進行判斷。本次研究中在簡單分析7歲以下β地中海貧血患兒不同基因型和表型的關聯時便采用了外周血細胞檢測和血清鐵蛋白測定, 最終發現7歲以下β地中海貧血患兒的β0和β+表型中CD41-42(-TTCT)和CD17(A-T)基因型的發病率比較高。除了上述相關研究以外, 地中海貧血患兒中亦存在少見類型以及多種類型相互重疊所導致的復雜復合體情況, 僅憑借常規的血液學并不能夠準確的診斷, 因此必須要做好進一步診斷與臨床遺傳咨詢。此時主要手段可以包括遺傳學檢查和分子生物學檢查等, 注意要將地中海貧血與傳感性肝炎、肝硬化、缺鐵性貧血等疾病進行準確且有效的鑒別, 以便進一步為地中海貧血患兒制定具體可行的治療方案。

［1］ 宋兆靜, 潘紅飛, 黃肯, 等.Hb Westmead復合輕型β地中海貧血的血液學表型和基因型分析.右江民族醫學院學報, 2017,39(1):40-42.

［2］ 顏綿生, 淦鑫, 劉敏, 等.廣州地區23例 Hb Westmead 異常血紅蛋白復合β-地中海貧血患者的血液學和基因型分析.中華醫學遺傳學雜志, 2016, 33(5):598-601.

［3］ 王春芳, 韋傳東, 雷茗, 等.Gγ+(Aγδβ)0地中海貧血復合β地中海貧血家系的表型與基因型分析的警示.中國兒童保健雜志, 2015, 23(11):1191-1193.

［4］ 李高馳, 李思慧, 曹憲振, 等.7歲以下地中海貧血患兒血液學表型的研究.廣東醫學, 2017, 38(18):2817-2818.

［5］ 曾祥興, 劉惠敏, 廖悅余, 等.廣東河源客家人群αβ復合型地中海貧血基因型和表現型分析.國際遺傳學雜志, 2017, 40(3):113-116.

［6］ 李嵐, 翁彬, 孟慶寶.重型β地中海貧血患者突變基因及同種血型抗體頻率調查.中國輸血雜志, 2016, 29(3):284-287.