子癇前期發病與Hif-1α和PLGF表達異常

周小燕，余娟娟

子癇前期是妊娠期特有的疾病，其發病率國內大約在9.4%[1]。近年來，隨著對子癇前期疾病的研究不斷深入，母嬰預后雖然具有明顯的改善，但是對于子癇前期疾病的發病機制仍然不十分明確。為了探討子癇前期發病與缺氧誘導因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，Hif-1α)和胎盤生長因子(placental growth factor，PLGF)表達的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料在我院2010年2月至2012年2月收治的子癇前期患者中選取60例為研究對象，年齡(27.5±3.2)歲，孕周(35.4±2.3)周。本組60例患者均符合《婦產科學》第6版診斷要求，同時根據分類標準將60例患者分為輕度子癇前期30例、重度子癇前期30例。同時選擇30例正常妊娠者作為對照組，年齡(27.4±3.5)歲，孕周(35.5±2.1)周。上述3組患者均無原發性心臟病、高血壓以及糖尿病等。3組年齡、孕周等一般資料比較P>0.05，差異無統計學意義。

1.2方法

1.2.1標本的采集3組孕婦均胎盤娩出后5 min內，立即選取母體面中央部位的胎盤組織，大小2.0 cm×1.5 cm×0.5 cm，采用生理鹽水沖洗后，放置在4%甲醛溶液中固定24 h以上進行檢查。

1.2.2檢測方法臨床對胎盤組織中Hif-1α和PLGF均采用免疫組化法檢測：將制作好的標本常規脫水，采用石蠟包埋并制作成3 μm厚度的連續切片，經過HE染色判斷其質量后，采用鏈霉素抗生物素蛋白—過氧化物酶連接法進行檢測。Hif-1α兔抗人多克隆抗體及PLGF鼠抗人單克隆抗體購自武漢博士德生物工程有限公司，免疫組化檢測試劑盒購自福州邁新生物工程技術有限公司。操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。陰性對照采用磷酸鹽緩沖溶液代替一抗。最后根據檢測的著色強度和面積進行評分：①著色強度：沒有著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②著色面積：5%以下為0分，5%～25%為1分、25%～50%為2分、50%～75%為3分，75%以上為4分。上述兩項結果相加得出最后總得分，其中0～1分為陰性(-)、2～3分(+)、4～5分為(++)，6～7分為(+++)。

2 結果

2.13組胎盤組織中Hif-1α的表達隨著患者病情加重，Hif-1α蛋白的表達呈現增加的趨勢。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度均比對照組高(均P<0.05)，而重度子癇前期組和輕度子癇前期組比較，表達也明顯升高(P<0.05)，見表1。

表1 3組孕產婦Hif-1α表達情況(n=30) 例(%)

注：①與對照組比較，P<0.05；②與輕度子癇前期組比較，P<0.05。

2.23組孕婦胎盤組織中PLGF的表達隨著患者病情加重，PLGF的表達呈現降低的趨勢。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中PLGF表達強度均比對照組低(P<0.05)，重度子癇前期組中PLGF表達強度高于輕度子癇前期組，兩組相比P>0.05，差異無統計學意義，見表2。

表2 3組孕產婦PLGF表達情況(n=30) 例(%)

注：①與對照組比較，P<0.05。

2.3Hif-1α和PLGF表達的相關性分析通過對Hif-1α和PLGF表達的相關性分析，胎盤Hif-1α與PLGF的表達呈負相關(rs=-0.46，P<0.05)。

3 討論

子癇前期屬于妊娠期高血壓疾病中一種類型，其病理改變主要是由于小動脈痙攣、血管內皮細胞損傷以及全身器官的血液灌流量下降等造成的。此種疾病對母嬰健康具有極大的危害，嚴重將會導致母嬰死亡[2]。研究表明，子癇前期發病主要是由于胎盤滋養細胞凋亡以及血管內皮細胞激活與損傷造成，而胎盤形成缺陷以及胎盤淺著床導致胎盤缺氧、缺血是造成子癇前期發病的主要原因。[3]Hif-1α蛋白主要是細胞缺氧應激所產生的轉錄激活因子，是缺氧調節通路上的關鍵環節之一，同時缺氧也是誘導Hif-1α蛋白表達的關鍵因素[4-7]。本研究結果，輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度均比對照組高(P<0.05)，而重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度強于輕度子癇前期組(P<0.05)。說明在缺氧的情況下，Hif-1α和Hif-1β形成的二聚體更加穩定，進而造成Hif-1α在子癇前期患者胎盤組織中降解減少，表達隨著疾病加重而增加[8-9]。

而PLGF是血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中的一員，其與VEGF有高度的同源性，PLGF經過轉錄后加工修飾，將會產生不同的蛋白亞型[10]。研究表明，PLGH在胎兒和成體發育的血管形成中具有重要的作用，妊娠期PLGH表達的增強將會促進滋養細胞增殖和分化，進而誘導內皮細胞增殖、抗內皮細胞凋亡，最終保證胎盤血管網充分形成[11]。但是，如果PLGF的合成和分泌出現減弱，則會導致滋養細胞增殖活性轉化浸潤活性受阻，最終導致胎盤淺著床、胎盤缺氧、缺血[12-13]。本研究結果，隨著患者子癇前期病情加重，PLGF的表達呈現降低的趨勢。輕度子癇前期和重度子癇前期中PLGF表達強度均比對照組低(均P<0.05)說明本研究中患者PLGF的表達異常，將會導致胎盤缺氧、缺血，進而造成子癇前期的發生。另外，通過對Hif-1α和PLGF表達的相關性分析可以得知，胎盤Hif-1α表達與PLGF的表達呈負相關(r=-0.46，P<0.05)，說明在子癇前期發生中，胎盤Hif-1α表達與PLGF的表達相互影響、相互作用，進而導致子癇前期疾病的發展。以上提示胎盤Hif-1α和PLGF可作為血清標志物，其在子癇前期臨床監測及診治中具有一定的應用價值。

參考文獻：

[1] 沈方,陳奇,肖建平.脫落滋養細胞在子癇前期發病機制中的作用[J].國際婦產科學雜志,2014,41(4):443-447.

[2] 張艷芳,田靜,劉娜.孕婦胎盤組織中缺氧誘導因子Hif-1α的表達與子癇前期發病關系的Meta分析[J].現代醫學,2014,42(3):261-264.

[3] 李新菊.子癇前期發病及其嚴重程度與NF-κB、TNF-α及PLGF相關性研究[J].中國婦幼保健,2014,29(12):1849-1851.

[4] Semmm GL,sam F,Booth G,et a1.Structural and functional analysis of hypoxia-inducible factor 1[J].Kidney Int,1997,51(2):553-555.

[5]Wright WS,Mceihatyen RM,Messina J E,et al.Hypoxia and the expression of HIF-1 alpha and HIF-2 alpha in the retina of streptozotoein injected mice and rat[J]. Exp Eye Res,2010,90(3):405-412.

[6]Oka H,Goto H,Koizumi K,et al.Effect of hachimijiogan against renal dysfunction and involvement of hypoxia inducible factor-1ɑ in the remnant kidney model[J].Diabetes Res Clin Pract,2001,82:25-29.

[7] Cameron C M,Harding F,Hu W S,et al.Activation of hypoxiac response in human embryonic stem cell-derived embryoid bodies[J].Exp BioMed(Maywood),2008,233(8):1044-1057.

[8] Adams JM,Difazio LT,Rolandelli RH,et al. HIF-1:a key mediator in hypoxia[J]. Acta Physiol Hung,2009,96(1):19-28.

[9] George EM.New approaches for managing preeclampsia:clues from clinnical and basic research[J].Clin Ther,2014,36(12):1873-1881.

[10]王明松,鄒良健.血管內皮細胞生長因子價值的研究現狀[J].醫學綜述,2006,12(9):534-536.

[11]魯春,張玉秋,甕占平.生長分化因子15在子癇前期胎盤滋養細胞中的表達及意義[J].中國優生與遺傳雜志,2013,21(12):96-98.

[12]Zeeman GG,Dekker GA,van Geijin HP,et al.Endothelial function in normal and pre-eclamptic pregnancy:a hypothesis[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,1992,43(2):113-122.

[13]李東志,林其德,林建華. 胎盤絨毛缺氧與血管內皮細胞損傷關系的實驗研究[J]. 中國病理生理雜志,2004,20(3):411-416.