細胞色素P 450 1A 1基因Ile 462Val 多態性與宮頸癌易感性的Meta分析

劉蘋蘋，申芳芳，白潔宇，何全中，孫 力，潘 瑩

宮頸癌為全世界范圍內女性第二常見的腫瘤，嚴重影響著女性的身心健康[1-2]。宮頸人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宮頸癌發生的必要因素，但只有一小部分HPV感染者最終會發生宮頸癌，提示宿主的易感性也將影響HPV感染的結局[3]。宮頸癌作為一種由遺傳因素和環境因素互相作用而導致的疾病，探索其易感基因有助于了解疾病的病因和高危人群的篩查。目前多數學者認為細胞色素P450 1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌的發生有關，但還存在較大的爭議。因此本研究搜集目前國內外已公開發表的探討CYP450 1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性的病例對照研究，并對符合納入標準的研究進行Meta分析，以期進一步了解兩者之間的相關性，為宮頸癌的病因研究提供一定的證據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1納入和排除標準研究類型：病例—對照研究。研究對象：病例組為組織病理學診斷為宮頸癌的患者，對照組為健康人群。暴露因素：CYP4501A1基因Ile462Val多態性。結局指標：宮頸癌的發病風險。排除標準：①非中、英文文獻；②重復發表的文獻；③數據不全或無法計算提取的文獻。

1.2文獻檢索策略計算機檢索 PubMed、Medline、CNKI及萬方數據庫，搜集CYP450 1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌相關性的病例—對照研究，檢索時限均為建庫至2017年9月。英文檢索詞包括：cytochromeP4501A1、CYP1A1、P4501A1、polymorphism、variant、mutation、cervical carcinoma、cervical cancer、cervix cancer；中文檢索詞包括：細胞色素P450、基因多態性、變異、宮頸癌。此外，輔助手動檢索納入研究及近期綜述的參考文獻以補充獲取相關文獻。

1.3文獻篩選與資料提取及偏倚風險評價由2名研究者獨立進行文獻篩選和資料提取，如遇分歧，則由第三方協助裁定。按照設計好的資料提取表提取資料，提取內容如下：第一作者、發表年份、研究地點、種族、樣本量、基因型的檢測方法、各組基因型分布及對照組哈迪—溫伯格平衡[4](Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)情況。然后采用觀察性研究的偏倚風險評價工具紐卡斯爾—渥太華量表[5-7](newcastle ottawa scale,NOS)評價納入研究的偏倚風險，評價總分為9分，≥5分者即可納入，>6分者為高質量研究。

1.4統計分析采用Stata12.0軟件進行Meta分析。效應量采用比值比(odds ratio,OR)及其95%可信區間(confidence interval,CI)。異質性檢驗采用Q檢驗及I2檢驗，若P<0.1且I2>50%，表明研究間存在異質性，采用隨機效應模型；反之，采用固定效應模型。為探討異質性的來源，根據研究種族、NOS評分及是否符合HWE進行亞組分析。采用Begg 檢驗及 Egger 檢驗來檢測發表偏倚，并運用敏感性分析檢測Meta分析結果的穩定性。對照組H-W檢測采用Stata12.0軟件進行，檢驗水準為α=0.05。用分子流行病學研究方法，采集研究對象血樣，對研究對象CYP1A1基因進行檢測，PCR產物經特定的酶切后分別產生了3種不同的CYP1A1基因型，包括純合子野生型Ile/Ile、雜合子Ile/Val和純合子突變型Val/Val，鑒于突變純合子ValVal頻率較低，故將它歸入雜合子Ile/Val組，所以把CYP1A1基因型分成了Ile/Ile和Ile/Val+ValVal進行比較，以病例組與對照組基因型分布的比值比(OR)為效應指標，探討CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性之間的關系。

2 結果

2.1文獻檢索結果初檢出相關文獻161篇，首先剔除重復文獻68篇，根據題目和摘要排除與CYP4501A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性無關的文獻共81篇，排除綜述類文獻10篇，通過閱讀全文排除對照組對象并非全部是健康人群的文獻共1篇，排除重復發表的文獻1篇。經逐層篩選后，最終納14個病例—對照研究[8-21]，其中8篇[8-15]為英文文獻，6篇[16-21]為中文文獻。其中11篇基因型檢測采用PCR-RFLP法，3篇采用PCR方法。從研究種族來看，有6篇研究高加索人群，8篇研究亞洲人群。

2.2納入研究的基本特征14個病例—對照研究共包括2 223例宮頸癌病例和2 424例健康對照。納入研究基本特征及偏倚風險評價結果見表1。

2.3Meta分析結果14篇文獻異質性檢驗，其存在著高度異質性，其中χ2=65.43，P=0.000，I2=80.1%，故選擇隨機效應模型進行Meta分析，其合并效應量OR=1.673，95%CI=1.20～2.231，Z檢驗結果顯示z=3.08，P=0.002。說明病例組與對照組間的差異具有統計學意義，即變異基因型(突變純合子ValVal+雜合子Ile/Val)的個體發生宮頸癌的危險性，比純合子野生型Ile/Ile基因的個體高1.673倍。

表1 納入研究的基本特征

2.4亞組分析納入的14項研究異質性較大，考慮可能因為研究的種族不同、納入文獻的質量好壞及對照組不符合HWE平衡引起，因此根據研究種族的不同，以NOS評分>6分和對照組符合HWE平衡進行亞組分析。

2.4.1根據研究種族不同進行亞組分析14篇文獻中，其中6篇文獻研究的是高加索人群，8篇文獻研究的是亞洲人群。關于高加索人群的研究進行異質性分析，結果顯示：χ2=17.65，P=0.003，I2=71.7%。因此選擇隨機效應模型進行統計分析表明：OR=2.335，95%CI=1.544～3.531，Z檢驗結果顯示z=4.02，P=0.000。說明在高加索人群中，變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發生宮頸癌的可能性明顯高于純合子野生型Ile/Ile基因的個體，差異具有統計學意義。關于亞洲人群的8項研究進行異質性分析，結果顯示：χ2= 29.00，P=0.000，I2=75.9%，因此選擇隨機效應模型進行統計分析，分析結果顯示：OR=1.274，95%CI=0.844～1.922，Z檢驗結果顯示：z=1.15，P=0.249，說明了亞洲人群中CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌發病風險卻沒有統計學的相關性。

2.4.2根據納入文獻的研究質量進行亞組分析14篇文獻中，其中9篇文獻NOS評分大于6分，為高質量的研究，將高質量的研究進行異質性分析，結果顯示：χ2=31.76，P=0.000，I2=74.8%。因此選擇隨機效應模型進行統計分析：結果是合并OR=1.946，95%CI=1.360～2.783，Z檢驗結果顯示z=3.64，P=0.000。說明變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發生宮頸癌的可能性高于純合子野生型Ile/Ile基因的個體，差異具有統計學意義。

2.4.3根據對照組是否符合HWE平衡進行亞組分析所納入的文獻中，其中8篇文獻的對照組基因型符合HWE平衡，將對照組符合HWE平衡的研究進行異質性分析，結果顯示：χ2= 16.49，P=0.021，I2= 57.6%。因此選擇隨機效應模型進行統計分析，得出結論：合并OR=1.710，95%CI=1.274～2.295，Z檢驗結果顯示z=3.57，P=0.000。說明變異基因型的個體與純合子野生型Ile/Ile基因的個體相比，變異型是純合子的1.710倍，其發生宮頸癌的可能性明顯增加1.710倍，差異具有統計學意義。

2.5發表偏倚分析對納入的14項研究進行漏斗圖分析，漏斗圖基本對稱，說明本研究不存在明顯的發表偏倚。用Egger試驗來評估發表偏倚(Pr>|z|指標為0.945)。

2.6敏感性分析剔除樣本總量中的任一研究，對剩余的文獻研究進行Meta分析，得出的結果與原結果相近，表明本次Meta分析結果穩定。

3 討論

細胞色素450(CYP450)是一組結構和功能相關的超家族基因編碼同工酶。CYP450不僅可以催化眾多內源性物質( 如脂肪酸、類固醇激素)和外源性物質(如藥物、毒物、前致癌物、致畸物質) 在體內的Ⅰ相代謝反應，而且與疾病、腫瘤易感性及機體耐藥性的產生有密切關系[22]。研究表明，CYP450基因多態性與宮頸癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、食管癌等多種腫瘤的易感性密切相關[23-24]。目前已知CYP4501A1基因多態性有4種，Msp、Ile462Val、AA及外顯子Exon7的4 887位點多態性[25]。其中Ile462Val多態性又稱為Exon7多態性，為Exon7的4 889位點多態性。CYP4501A1第七外顯子血紅素結合區A→G氨基酸替換，導致第462位密碼子Ile變為Val。近年來，有關CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性關系的研究很多，但所得結果卻不盡一致。研究表明CYP4501A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性無關。Joseph等[14]研究證實CYP4501A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性有顯著的相關性。出現較大差別的原因可能是不同研究設計、不同的研究方法等所引起。

本研究通過檢索CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌易感性相關的文獻,共納入國內外14篇文獻的研究結果，2 223例宮頸癌病例和2 424例健康對照。Meta分析結果顯示，CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌發病風險相關性具有統計學意義，其合并OR=1.673,95%的可信區間為1.205～2.321,P=0.002；但按照種族分層后，發現在高加索人群的合并OR為2.335,95%的可信區間為1.544～3.531,P=0.000；但在亞洲人群的合并OR為1.274,95%的可信區間為0.844～1.992,P=0.249；說明了高加索人群中變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發生宮頸癌的可能性是純合子野生型Ile/Ile基因個體的2.335倍，差異具有統計學意義，但亞洲人群CYP1A1基因Ile462Val多態性與宮頸癌的關系不具有顯著的相關性。推測可能發生的機制，宮頸癌的發生是由遺傳因素和環境因素共同作用的結果，而CYP1A1基因Ile462Val發生突變后，能催化多環芳香烴類物質活化，形成親電子的致癌分子[26]，從而影響宮頸癌發病的病理生理進程。

本研究得出的結論與Zhang等[27]通過CYP1A1和宮頸癌相關性的Meta分析相比，結論一致，但本研究發現CYP1A1基因Ile462Val多態性與高加索人群宮頸癌的發病風險有明顯的相關性，卻與亞洲人群的宮頸癌的發病風險無明顯相關性，這可能由不同人群的基因型分布、周圍環境和生活習慣不同所導致。

本研究可能存在一定的局限性：①本研究納入的文獻均為已發表的研究，未能將灰色文獻納入，因此可能會存在某些程度的發表偏倚；②未能考慮環境—基因或者基因—基因的相關作用對本研究的影響；③本研究中存在著較為明顯的異質性，會一定程度上影響該研究結果的可靠性。

總之，本研究結果表明，CYP1A1基因Ile462Val的多態性增加高加索人群宮頸癌發病風險，但與亞洲人群宮頸癌的發病風險無明顯相關性。但該研究受到納入研究數量及質量的限制，結論還需進一步的研究證實。

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