RAP1B在胃癌中的表達及其意義

劉云昊，荊湞豈

（陜西中醫藥大學第二臨床醫學院，陜西 咸陽 712000）

癌癥是目前全世界死亡的主要原因之一，而胃癌是癌癥中一種常見的消化系統的惡性腫瘤，是第三大腫瘤類型[1]。研究表明，RAP1B的作用機制已經證明與引起血管生成，內皮細胞遷移以及細胞增殖等有著密切的關系及影響，RAP1B還可以影響RAS-MAPK通路，使其信號通路的功能受阻[2]。本文針對RAP1B在胃癌中表達的實驗研究，進一步了解胃癌的發生、浸潤以及轉移機制。

1 材料與方法

1.1 一般材料

收集陜西中醫藥大學第一附屬醫院以及西安交通大學第一附屬醫院自2008年1月～2009年12月之間進行外科根治手術并由病理明確診斷為胃癌的患者，收集他們的固體石蠟塊標本100例以及30例距胃癌組織5 cm以上的癌旁正常組織。兩組的性別、年齡及腫瘤大小均無統計學差異（P＞0.05）。

1.2 試劑與方法

圖1 RAP1B在胃癌組織中高表達（①：SP×40、②SP×100、③SP×200）

將患者對應的蠟塊放置于冰上進行20～30 min的預冷后，使用輪轉式石蠟切片機進行連續切片（厚度為4～6 um）。按說明書用二甲苯脫蠟2次，梯度酒精水化，檸檬酸微波抗原修復，山羊血清封閉，滴加使用PBS稀釋的一抗RAP1B（1:200），4℃過夜，第2天常規二抗孵育，DAB（proteintech生物公司）顯色。

1.3 免疫組化評分

RAP1B的表達，大部分定位于細胞質，少數可出現于細胞核中；免疫組化的染色結果分別請兩位參加工作年限超過5年的病理科老師進行免疫組化的閱片工作，對制作好的片子運用免疫反應積分打分法（IRS）分別進行評分，記平均值。

1.4 統計學方法

本文采用SPSS 19.0統計學軟件對數據進行分析。運用x2檢驗分析。

2 結 果

2.1 RAP1B在胃癌組織與癌旁組織的表達

RAP1B主要表達在細胞質，少部分也可在細胞核中表達（圖1）。實驗結果提示（表1）：在100例胃癌組織中，RAP1B高表達的病例有72.0例，高表達率為72%，有28例為低表達，低表達率為28.0%。在30例胃癌癌旁正常組織中，高表達的病例有6例，高表達率為20.0%。

表1 RAP1B在胃癌組織與癌旁組織的表達 [n（%）]

3 討 論

RAP1B是一種小型的Ras相關的（Ras-related protein）GTP酶類蛋白，是RAP1的一種亞型[3]，RAP1是Ras樣GTP酶超級家族的進化保守蛋白。RAP1通過鳥嘌呤交換因子和GTP酶活化蛋白的作用下在與GTP結合的活性形式和與GDP結合的非活性形式之間循環作用。

RAP1B能夠促進腫瘤細胞的增殖。最早的研究顯示RAP1B具有促進細胞進行有絲分裂的生物學特性，正常的小鼠細胞在過表達RAP1B之后細胞倍增的時間能夠明顯的被縮短，隨之在裸鼠中發展成為腫瘤。馬明銘等人在2015年的研究也通過實驗證實了RAP1B在非小細胞肺癌的組織中可能發揮著類似癌基因的功效[4]。近些年的研究表明RAP1B與許多消化系統的腫瘤的發生與轉移也存在密不可分的關聯[5]。

[1]Fitzmaurice C,Dicker D,Pain A,et al.The Global Burden of Cancer 2013 Global Burden of Disease Cancer Collaboration [J].Jama the Journal of the American Medical Association,2015,1(4):505-527.

[2]Dow L E,Elsum I A,King C L,et al.Loss of human Scribble cooperates with H-Ras to promote cell invasion through deregulation of MAPK signalling [J].Oncogene,2008,27(46):5988.