食品微生物檢驗菌落總數測定方法的效果分析

王春林

目的：食品微生物檢驗菌落總數測定方法的效果分析。方法：現選取2016年5月- 2016年6月需要進行菌落總數檢測食品樣本共60例作為調查對象，對其分別采取瓊脂傾注TTC平板法、計數瓊脂平板法、測試片法進行檢測，對比分析這三種方法的檢出率。結果：進行菌落總數檢的60例樣本中，經過檢測檢測結果為：測試片法檢出數為2、檢出率為3.33%；計數瓊脂平板法檢出數為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數為19、檢出率為31.66%，經對比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數檢出率高于計數瓊脂平板法、測試片法，組間差異明顯，具有統計學意義（P<0.05）。結論：在食品微生物檢驗菌落總數中可采取瓊脂傾注TTC平板法，檢出率較高，值得推廣和應用。

隨著我國經濟的發展和提高，廣大的人們群眾越來越重視生活，尤其是食品衛生這一塊，而且食品是否衛生、安全，這也直接的關乎了人們群眾的身體健康，因此國家的有關部門，對食品安全生產采取了大力的監管，而在辨別食品是否衛生中，對其進行微生物菌落總數檢驗中一個重要的有效途徑，在檢驗的過程中應采取準確、有效微生物的檢驗辦法，并將可靠、安全食品的檢驗標準進行有效的制定，是在飲食安全的保障中是基本的措施以及重要的方式，其總菌落數能夠直接反映出食物加工的衛生整體的情況，而且具備準確性高、檢驗快速等優點，可以直接作為檢驗食品衛生結果獨立性的指標，為了探討直接有效的檢測方法，特此選取瓊脂平板法、計數瓊脂平板法、測試片法進行分別的檢測，詳情如下。

資料和方法

資料。現選取2016年5月- 2016年6月需要進行菌落總數檢測食品樣本共60例作為調查對象，以上60例樣本由五個食品加工提供。

方法。

（1）測試片檢測法，檢測方式為：（1）檢測材料以完全符合美國：AOAC O- MA的標準以及中國 SN/T 1897- 2007的標準，為986.33/989.10/990.12；（2）檢測方法為：將2個- 3個樣本稀釋后，將其滴入在測試紙片上，位置為中央處，將其靜置5/min，使用顯微鏡進行觀察并計數，在操作中要對薄膜的按壓力度進行控制、保證操作臺面水平以及操作全程的無菌性。

（2）計數瓊脂平板檢測法，檢測方式為：（1）檢測材料：計數用的瓊脂培養基PCA為250g ；（2）檢測方法為：在對樣本進行測試之前，將在試驗中所使用的耗材、容器、吸管進行消毒，能夠確定試驗所用的產品等的無菌性，進行瓊脂培養基的制作，將待測試的樣本取出，在樣本中滴入無菌磷酸緩沖液，將其充分的混勻后，按梯度稀釋成十倍、百倍、千倍、萬倍樣本均液，選出2個- 3個適用于計數的稀釋濃度樣本液選出，將其接種到無菌瓊脂培養皿中進行恒溫培養，取磷酸緩沖液進行對照接種，其培養條件為36度左右，其培養時間為48±2小時，在進行菌落換算、計數中，應依據GB4789.1- 2010的規定進行。

（3）瓊脂傾注TTC平板檢測法：檢測方式為：（1）檢測材料：將TTC添加至PCA中，其培養基中的TTC濃度是0.005%；（2）檢測方法為：在對樣本進行測試之前，將在試驗中所使用的耗材、容器、吸管進行消毒，能夠確定試驗所用的產品等的無菌性，進行瓊脂培養基的制作，將待測試的樣本取出，在樣本中滴入無菌磷酸緩沖液，將其充分的混勻后，按梯度稀釋成十倍、百倍、千倍、萬倍樣本均液，選出2個- 3個適用于計數的稀釋濃度樣本液選出，將其接種到無菌瓊脂培養皿中進行恒溫培養，取磷酸緩沖液進行對照接種，其培養條件為36度左右，其培養時間為48±2小時，將TTC加入到瓊脂培養中，觀察其顯色反應，在進行菌落換算、計數中，應依據GB4789.1-2010的規定進行。

指標觀察。

（1）觀察菌落總檢出數：嚴格按照檢測方式的計數方法對菌落進行計數，其計數要求為CFU每個/g，其納入計數菌落的種類遵照GB4789.1- 2010的要求進行納入，其中包含霉菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、艾希大腸桿菌等等的病原菌。

（2）菌落總數的超標率為：參照國標GB4789.1- 2010內總菌落數超標的標準與本次檢測樣本的總菌落數進行對比，樣本以檢驗總菌落數超過1500個/g，為超標的判斷標準。

統計學處理。本次調查中涉及60例樣本的實驗數據，應用SPSS17.0統計學軟件包對實驗數據進行處理，計數資料應用n（%）描述，計量資料應用（ 士s）描述，組間經t和x2檢驗，差異在P<0.05時，存在臨床可比意義。

結果

進行菌落總數檢的60例樣本中，經過檢測檢測結果為：測試片法檢出數為2、檢出率為3.33%；計數瓊脂平板法檢出數為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數為19、檢出率為31.66%，經對比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數檢出率高于計數瓊脂平板法、測試片法，組間差異明顯，具有統計學意義（P<0.05），見表1。

討論

隨著近年來食品安全問題的頻繁發生，引起了大家的廣泛關注，在食品加工中，常見的病原菌如沙門氏菌、大腸桿菌將會引起傳染性的疾病，導致食用者的生體遭到危害，因此對食品加工進行有效、準確性高的微生物檢測是至關重要的，有效的微生物檢測是保證食物安全的前提，其中總菌落數在食品質量評價中必不可少的重要指標，在總菌落數的檢測中，常見的檢測方法為CAP、TP，這兩種檢測方法在樣本因素如固體殘渣、顆粒物、計數精度的影響下，將直接影響到檢測的靈敏度，因此在本次調查中采取了TTC檢測方法，TTC指示劑的靈敏度較高，能夠特異性的染色細菌，檢測人員對染色菌落數進行準確、直觀的統計，并且可以將雜質干擾進行排除，且檢出率較高。在本次調查中發現進行菌落總數檢的60例樣本中，經過檢測檢測結果為：測試片法檢出數為2、檢出率為3.33%；計數瓊脂平板法檢出數為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數為19、檢出率為31.66%，經對比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數檢出率高于計數瓊脂平板法、測試片法，組間差異明顯，具有統計學意義（P<0.05）。

綜上所述，在食品微生物檢驗菌落總數中可采取瓊脂傾注TTC平板法，檢出率較高，值得推廣和應用。