核干細胞因子在食管腺癌組織中的表達及其與臨床特征的關系

管淑敏，孫麗麗

濮陽市人民醫院病理科，河南 濮陽457000

食管腺癌具有較高的發病率，且近年來其發病率呈現逐年增高的趨勢，嚴重威脅著患者的生命健康[1]，因此，如何有效地診斷與治療食管腺癌具有重要意義。相關研究顯示，核干細胞因子在細胞的增殖過程中起到了關鍵性作用，且呈現較高水平的表達[2-3]。本研究對食管腺癌患者體內核干細胞因子的表達情況進行分析，并對核干細胞因子表達與食管腺癌患者臨床特征的關系進行探討，旨在為食管腺癌的診斷與治療提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2006年1月至2016年12月濮陽市人民醫院收治的食管腺癌患者80例。納入標準：①均經病理學檢查確診為食管腺癌；②生存期≥3年。排除標準：①不符合臨床食管腺癌的診斷標準；②伴有嚴重的心肝腎功能不全者；③臨床資料不全者。80例食管腺癌患者中，男46例，女34例；年齡39～77歲，平均（57.85±4.61）歲；≥60歲50例，＜60例30例；腫瘤直徑：≥5.0 cm 45例，＜5.0 cm 35例；組織分化程度：低分化30例，中分化28例，高分化22例；TNM分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期25例，Ⅲ期28例，Ⅳ期12例；淋巴結轉移情況：有轉移30例，無轉移50例；浸潤深度：黏膜及黏膜下層20例，深肌層18例，纖維膜20例，淺肌層12例，周圍軟組織10例。

1.2 標本采集

選取食管腺癌患者的病灶組織及其對應的癌旁5.0 cm內的正常組織作為此次研究的標本，且所有選取的標本均經過40.0 g/L多聚甲醛溶液固定處理，隨后常規脫水和石蠟包埋處理，切片厚度為4.0～6.0 μm，最后進行HE染色與免疫組織化學染色處理[4]。

1.3 檢查方法

采用鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復合物法（strept avidin-biotin complex，SABC）對核干細胞因子進行測定，試劑盒為武漢博士德生物工程有限公司提供的即用型SABC免疫組化染色試劑盒，抗體為鼠抗羊IgGNS抗體。其中，以牛血清蛋白作為標準品，核干細胞因子的稀釋比例為1∶100。嚴格按照SABC進行操作，且需要進行二氨基聯苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色處理，緊接著蒸餾水沖洗和蘇木素復染處理，給予70%、85%、95%梯度濃度的乙醇進行脫水。最后，二甲苯透明和中性樹膠進行封片處理[5-6]。

1.4 判斷標準

組織切片中細胞核內染色為黃褐色則判斷為陽性染色。其中，陽性細胞所占比例≥20.00%為陽性；陽性細胞所占比例＜20.00%為陰性。另外，應用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）替代一抗作為陰性對照。

1.5 統計學分析

采用SPSS 18.0軟件對數據進行分析。計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組織中核干細胞因子表達情況的比較

核干細胞因子在食管腺癌組織、癌旁正常組織中的陽性表達率分別為75.0%（60/80）、31.2%（25/80），差異有統計學意義（χ2=30.74，P＜0.01）。（圖1）

圖1 核干細胞因子在不同組織中的表達情況（HE染色，×200）

2.2 核干細胞因子表達與食管腺癌患者臨床特征的關系

核干細胞因子的陽性表達與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度以及淋巴結轉移情況有關（P＜0.05）；核干細胞因子的陽性表達與食管腺癌患者的性別、年齡、腫瘤直徑及TNM分期無關（P＞0.05）。（表1）

3 討論

食管腺癌是消化內科常見的一種疾病，在臨床具有較高的發病率和病死率，嚴重影響患者的生命健康[7]。相關研究顯示，食管腺癌的發生、發展受到癌基因與抑癌基因的影響，癌基因與抑癌基因相互作用，可以引發腫瘤的發生[8-9]。核干細胞因子基因在多種腫瘤中高表達，尤其在胃癌、肝癌及結腸癌中表達水平更高，因此，核干細胞因子可以作為臨床上診斷腫瘤的重要標志物。人類的核干細胞因子基因位于3p21.1，與小鼠具有81%的編碼同源，核干細胞因子蛋白有538個氨基酸，由堿性區域、雙螺旋區和一級GTP組成。相關研究顯示，核干細胞因子可以通過與p53、c-MYC等相關的途徑影響細胞周期的進展，進而直接或間接地影響腫瘤細胞的增殖與分化[10-11]。大量臨床試驗結果顯示，干細胞與腫瘤細胞之間存在較多的相似性，其中協調控制的自我更新與保證分化是有效維持干細胞內環境穩定的重要因素，一旦平衡失調，便會導致腫瘤發生[12-14]。另外，研究還顯示，核干細胞因子在急性白血病患者中呈現出較高水平的表達[15]。同時，相關臨床研究顯示，核干細胞因子在卵巢癌患者體內也呈現高表達，并且臨床常將其作為診斷卵巢癌的重要標志物之一[16]。既往的臨床研究顯示，核干細胞因子可能參與食管癌的發生、發展[17]。因此，為了全面地了解食管腺癌的發生與發展情況，本研究進一步分析了核干細胞因子在食管腺癌中的表達及其與患者臨床特征的關系。

表1 核干細胞因子表達與食管腺癌患者臨床特征的關系

本研究結果顯示，食管腺癌組織中核干細胞因子的陽性表達率為75.0%，明顯高于癌旁正常組織的31.2%（P＜0.01），核干細胞因子在食管腺癌組織中呈現高表達，表明核干細胞因子可能參與了食管腺癌的發生過程。本研究還發現，核干細胞因子的陽性表達與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移情況有關，但與食管腺癌患者的性別、年齡、TNM分期及腫瘤直徑無關。核干細胞因子的表達與食管腺癌的發生、發展有著緊密聯系，可以將其作為診斷食管腺癌病情嚴重程度的標志物。同時，可以將核干細胞因子作為靶向治療的重要目標基因，為臨床中治療食管腺癌提供新的方向[18]。

綜上所述，核干細胞因子在食管腺癌組織中呈現高表達，且其陽性表達與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移情況有關，臨床中可以將其作為診斷食管腺癌的一種重要標志物。

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