安康市部分桑樹栽培品種桑葉1—脫氧野尻霉素含量的測定

禚蘇 王中興 韓敏

摘要：為促進蠶桑產業的發展，促進桑葉產品的開發，以安康地區具有代表性的24個桑樹栽培品種的桑葉為原材料，運用反相高效液相色潽法測定各品種春季桑葉中1-脫氧野尻霉素（DNJ）的含量。結果表明，安康地區桑樹品種中桑葉DNJ含量具有顯著差異，其中旬陽青皮荊桑中的含量最高為0.381 5%，顯著高于其他品種；大坪2號變異、恒2號、安選1號、流水青桑、當地胡桑、沈2號、大坪桐桑、箔籃桑、前進桑含量較高；而光明桑、荊桑12號等品種含量較低。旬陽青皮荊桑DNJ含量最高，可以作為DNJ提取的桑樹品種。

關鍵詞：1-脫氧野尻霉素；桑葉；反相高效液相色潽法；安康市

中圖分類號：S888.2；S886.9 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2018）11-0093-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.11.023

Abstract： The contents of 1-deoxynojirimycin （DNJ） in spring leaves from 24 representative cultivars of mulberry in Ankang city were determinated using reversed-phase high performance liquid for promoting the development of sericulture industry and the development of mulberry products. The results indicate that the contents of DNJ in different mulberry cultivars have significant differences. The content of DNJ in leaves of Xunyangqingjing is 0.3815%，it is significantly higher than the other varieties. The contents of DNJ in leaves of Daping No. 2 variation，Heng No. 2，Anxuan No. 1， Liushuiqingsang， Local husang，Shen No. 2，Dapingtongsang，Bolansang， Qianjinsang are relatively high； the contents of DNJ in leaves of Guangmingsang，Jingsang are relatively low. The variety of Xunyangqingjing could be as material for exaction DNJ because of the highest content of DNJ.

Key words： 1-deoxynojirimycin； mulberry leaf； reversed-phase high performance liquid chromatography； Ankang city

1-脫氧野尻霉素（DNJ）是一種極性化合物，研究證實它對α-葡萄糖苷酶具有抑制作用[1-3]，對血糖、甘油三酯、膽固醇等多項生理代謝指標具有良好的調節作用[4-8]，可以緩解肝臟的傷害[9，10]，降低胰島素抵抗[11]，保護血管[12，13]，治療肥胖癥[14，15]，抗病毒[16-18]，抑制腫瘤[19-22]，在醫療保健方面有著重大的應用價值。

DNJ在自然界分布廣泛，部分植物、微生物和昆蟲體內都存在DNJ，而桑樹是已知植物中DNJ含量最高的品種。研究表明，不同桑樹品種間DNJ含量具有顯著差異[23]，確定高含量DNJ桑樹品種，對于DNJ的應用具有重大的現實意義。陜西省安康市座落在秦嶺和巴山之間，海拔跨度大，物種豐富，蠶桑產業在該地具有悠久的歷史，桑樹品種豐富[24-26]，桑樹品種選育具有良好的物質和歷史基礎。本研究運用反相高效液相色潽法對安康市24個典型桑樹品種的桑葉進行DNJ含量測定，確定適合DNJ生產的桑樹品種，對于蠶桑產業的發展具有重要意義，為DNJ高含量桑樹品種的選育奠定了基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

供試的24個桑樹品種桑葉采自安康學院蠶桑研究品種資源圃，品種為前進桑、恒10號、大坪2號變異、旬陽青皮荊桑、恒2號、安康藤桑、荊桑12號、恒7號、當地胡桑、光明桑、沈2號、恒8號、大坪3號、恒3號、流水青桑、流水1號、恒日新街良桑、大坪桑、安選1號、箔籃桑、大坪桐桑、安選2號、秦巴桑、旬陽白皮。選擇生長一致的植株，取桑枝頂自下7、8片處，3次重復。

1.2 主要試劑和儀器

1-Deoxynojirimycin-HCl（1-DNJ-HCl，美國Sigma公司）；9-Fluorenyl-methyl chloroformate（FMOC-Cl，Fluca公司）；乙腈、醋酸、甲醇（均為色譜純）；其余試劑均為分析純；試驗用水為重蒸水。

高效液相色譜儀1260 Infinity（美國安捷倫公司）；超聲波清洗機KQ-250D（昆山市超聲波儀器有限公司）。

1.3 桑葉DNJ含量的測定

所采樣品均采用反相高效液相色潽-紫外檢測法測定[27]，每個樣品重復測定2次，取平均值。

1.4 數據處理

數據運用PASW Statistics 18進行分析處理。

2 結果與分析

2.1 桑葉測試樣品的高效液相色譜

按照“1.3”的方法對DNJ標樣和桑葉樣品進行含量測定。分離結果見圖1。通過圖1可見，DNJ的分離效果較佳。

2.2 不同桑樹品種間桑葉DNJ含量的比較

通過方差齊性檢驗（表1）可以看出，顯著性沒有達到最小值0.05，所以差異不顯著，這證明方差是齊性的，各品種間可以采用單因素方差分析進行比較，各桑樹品種間DNJ含量見圖2。

通過單因素方差分析表2可以看出，部分桑樹品種間DNJ含量具有顯著性差異。而從同質子集表3中可以看出，根據桑葉中的DNJ含量可將24個品種區分為11類。

3 結論

由上述試驗研究可以看出，安康地區桑樹品種中桑葉DNJ含量具有顯著差異，其中旬陽青皮荊桑中的含量最高，為0.381 5%，顯著高于其他品種；大坪2號變異、恒2號、安選1號、流水青桑、當地胡桑、沈2號、大坪桐桑、箔籃桑、前進桑含量較高；而光明桑、荊桑12號等品種含量較低。

這種顯著性差異為DNJ的研究和應用奠定良好的基礎。第一，對于同一區域、同一時間段生長的不同桑樹品種進行桑葉DNJ含量的測定，并且能夠得到顯著差異，說明不同桑樹品種產生DNJ是有差異的，為桑樹產生DNJ含量的內在機理奠定基礎。

第二，為DNJ的應用奠定基礎。提取分離DNJ是DNJ應用的基礎，而選擇合適的桑樹品種則是提取分離DNJ的基礎。選擇良好的桑樹品種，除了要對桑樹葉的DNJ含量有所了解，還要對桑樹葉片的生長量以及桑樹的抗病性等方面有所了解，綜合考慮，選擇最佳品種。在后續的試驗中，將結合桑樹本身的生理特性進行研究。

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