γ-干擾素釋放試驗與肺結核中醫證候的研究分析

童鳳軍 胡駕云 馮 剛

浙江省青春醫院 浙江 杭州 310016

本文通過檢測人體內分泌的γ-干擾素，探討其與肺結核診斷及中醫辨證分型之間的關系，以期為肺結核的診斷和證侯分析提供一定的參考指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2015年1月至2016年12月本院住院確診肺結核的病人115例，其中男92例，女23例，年齡17～63歲。30例否認結核暴露接觸史的單純呼吸系統感染者作為對照組。肺結核診斷參考《臨床診療指南：結核病分冊》（2009版）。肺結核的中醫辨證分型參考《中醫內科學》（2003版）。115例肺結核患者中肺陰虧損證者35例，其中男28例，女7例，年齡17～52歲，平均35.46±10.16歲；虛火灼肺證者32例，其中男26例，女6例，年齡19～63歲，平均33±10.96歲；氣陰耗傷證者28例，其中男23例，女5例，年齡19～61歲，平均38.10±14.25歲；陰陽虛損證者20例，其中男15例，女5例，年齡22～55歲，平均39.47±11.19歲。四組年齡及性別比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具可比性。

1.2 γ-干擾素釋放試驗檢測：具體如下。

1.2.1 標本采集：用肝素抗凝的真空采血管采集不低于4ml的全血標本，采集后的全血標本2小時之內加到培養管中進行培養。

1.2.2 γ-干擾素釋放試驗檢測方法：采用北京萬泰生物藥業股份有限公司提供的結核感染T細胞檢測試劑盒（批號20040097），按以下步驟檢測：①γ-干擾素的體外釋放：在2小時內將全血標本分裝入3種培養管中培養22小時，培養后的培養管離心后取上清液進行ELISA檢測。②γ-干擾素的定量檢測：用新鮮去離子水或注射用水溶解校準品，得到400pg/ml的濃度，然后用校準品稀釋液稀釋后分別得到200pg/ml、100pg/ml、50pg/ml、25pg/ml、12.5pg/ml。對受試者的培養血漿、校準品及空白對照分別編號，在相應孔中加入樣品稀釋液20μl及待測樣品50μl，用封板膜封板后，置37℃溫育60分鐘，每孔加入酶標示劑50μl后再次封板膜封板，置37℃溫育60分鐘。溫育后洗滌5遍，每孔加入顯色劑A、B各50μl，37度避光顯色15分鐘，再予每孔加終止液50μl，10min內用酶標儀檢測在波長450nm下經空白調零后的各孔A值。以測得值大于14pg/ml作為陽性表達，小于14pg/ml作為陰性表達。

1.3 統計學方法：采用SPSS19.0統計軟件進行分析，各組陽性率比較采用χ2檢驗，各組檢測值比較采用t檢驗及單因素方差分析。P＜0.05認為有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組γ-干擾素釋放試驗表達比較：結核組陽性數92例，陽性率80.0%，檢測值134.69±17.05；對照組陽性數8例，陽性率26.7%，檢測值22.37±6.63。陽性率及檢測值明顯高于對照組（P＜0.05）。

2.2 肺結核不同證型γ-干擾素釋放試驗陽性率和檢測值比較：見表1。

表1 γ-干擾素釋放試驗在肺結核不同證型中陽性率和檢測值比較

3 討論

肺結核，中醫稱之為肺癆，其致病因素，不外內外兩端。外因系指癆蟲傳染，內因系指正氣虛弱，兩者往往互為因果。肺癆的中醫證型共分肺陰虧損、虛火灼肺、氣陰耗傷及陰陽虛損四證。γ-干擾素釋放試驗被認為是近年來結核病診斷方面的一個重大突破，通過定量檢測γ-干擾素含量或計數分泌γ-干擾素的T淋巴細胞數量來判斷是否存在結核分枝桿菌特異性活化的效應T細胞，從而判斷是否存在結核分枝桿菌感染。本研究結果顯示，γ-干擾素釋放試驗在肺癆患者中陽性率及檢測值均有較高表達，而在非肺癆患者中表達明顯下降，提示γ-干擾素釋放試驗在肺癆患者中有較高的敏感性和特異性，可以作為診斷肺癆的一個重要參考指標。在肺癆四個中醫證型中，陽性率和檢測值在肺陰虧損、虛火灼肺、氣陰耗傷和陰陽虛損四組中依次下降，其中肺陰虧損組和陰陽虛損組表達差異有顯著性（P＜0.05）。考慮從肺癆疾病進程來看，肺陰虧損證多在肺癆初期，病損主要在肺；虛火灼肺證主要在肺癆中期，病程較長；氣陰耗傷證多見于肺癆中后期，病程較久，陰傷氣耗，肺脾同病；陰陽虛損證則為肺脾同病、氣陰耗傷的進一步發展。故γ-干擾素釋放試驗隨著肺癆的病程而有所下降。考慮病人在肺癆疾病后期，正氣虛弱，機體免疫功能下降，活化的效應T細胞數減少，故γ-干擾素釋放水平下降。從中醫治療來看，肺癆患者疾病前中期，應該以滋陰潤肺、降火殺蟲為主，而在疾病后期，正氣虛弱，則應該以益氣養陰、滋陰補陽為主。故臨床結合肺結核患者的γ-干擾素釋放試驗，為肺結核中醫證侯分型提供參考，從而有利于制定正確的治療方案。