糖皮質激素聯合丙種球蛋白對重癥藥疹患者N—乙?；D移酶活性的影響

汪小柳 劉志軍

摘要 目的：檢測糖皮質激素聯合丙種球蛋白對N-乙酰基轉移酶活性的影響，探討糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療重癥藥疹可能的機制。方法：收集正常人和重癥藥疹患者經糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療前后尿液，采用反相高效液相色譜技術，檢測尿液中咖啡因的3種主要代謝產物5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基嘧啶（AFMU）、1-甲基黃嘌呤（1X）和l一甲基尿酸（1U）含量，以AFMU/（AFMU+1U+1X）的比率評價各組N-乙酰基轉移酶活性。結果：重癥藥疹患者N-乙?；D移酶平均活性（0.12±0.01），明顯低于正常人群組的（0.54±0.06）（P<0.01）。結論：N-乙酰基轉移酶在重癥藥疹患者中活性降低，糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療有助于恢復N-乙?；D移酶活性，是治療重癥藥疹的作用機制之一。

關鍵詞 重癥藥疹；糖皮質激素；丙種球蛋白；N-乙酰基轉移酶；RP-HPLC

研究表明，重癥藥疹的發生與體內N-乙酰基轉移酶活性降低有關[1]。我們檢測正常人和重癥藥疹患者經糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療前后N-乙?；D移酶活性的變化，為糖皮質激素聯合丙種球蛋白的臨床應用提供更多的理論基礎。

資料與方法

試驗對象：2015年1月-2017年6月收治重癥藥疹患者20例，男8例，女12例；平均年齡（25.3±5.6）歲；病程0.5～7 d。選取同期來本院體檢的健康人50例，男25例，女25例；平均年齡（28.3±7.8）歲。所有參與患者均簽署知情同意書。

儀器、試劑和藥品：IOAvp型高效液相色譜儀，包括SCL中央控制器，SPD紫外可見檢測器，LC高壓泵，SIL自動進樣器，CLASS-VP 5.0色譜數據工作站；甲潑尼龍琥珀酸鈉；5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基嘧啶、l-甲基黃嘌呤（Ⅸ，2-FJ-103-1）和l一甲基尿酸（1U，1399520）；雀巢咖啡。乙腈、甲醇為色譜純，其余試劑為分析純。

色譜條件：Shim-pack VP-ODS柱、Shim-pack C18預柱；流動相為乙腈（A相），0.05%醋酸（B相），O～24 min B相的比例從2.5%線性增加至8%；流速l mL/min；在柱溫25℃、280 nm波長下檢測。

方法：①治療方法：患者使用丙種球蛋白2g/kg，分3～5d靜脈滴注；同時結合靜脈使用糖皮質激素相當于潑尼松1 mg/（kg·d）治療，待病情穩定后逐次遞減激素用量。②樣品收集及處理：試驗當日，受試者上午預留空白尿樣后，口服1杯咖啡（含咖啡因約215 mg），5h之后再次留取10mL尿液樣品置樣品瓶中（預先加入200mg維生素C），保存于-20℃直至上機分析。在整個試驗過程中，受試者禁服其他含咖啡因的食物，且不得服用其他藥物。試驗全過程受醫師監護。上機分析時，精密稱取AFMU、IX和IU對照品適量，用ddH20陪成20μg/mL對照品溶液。根據AFMU/（AFMU+ 1X+ 1U）的峰面積比，繪制出概率分布直方圖。

統計學方法：采用SPSS 13.0 f'orWindows統計軟件。計量資料采用（x±s）表示，計數資料比較使用Kruskal-Wallis檢驗，相關關系采用配對資料的關聯性分析。P< 0.05代表差異有統計學意義。

結果

色譜分離：將咖啡因3種代謝物對照品溶液、空白尿液樣品和受試尿液樣品按照上述標準色譜條件進樣測定，可見代謝物AFMU. 1U和IX之間具有良好的分離度，在3種峰位上沒有尿液中其他雜質的干擾，而且代謝物與雜質之間的分離度也比較清楚，可以用于分析N-乙?；D移酶的活性，見圖l。

正常人和重癥藥疹患者治療前后N-乙?；D移酶活性比較：采用RP-HPLC法測定大鼠服用咖啡因后尿液中代謝產物AFMU、1U和1X，其中以AFMU/（AFMU+1U+1X）的比率來評價N-乙?；D移酶的活性。重癥藥疹患者N-乙?；D移酶平均活性（O.12±0.01），明顯低于正常人群組（0.54±0.06）（P< 0.01），且服藥7d后平均活性（0.49±0.04），與正常組相比，差異無統計學意義（P>0.05），見表l。

討論

重癥藥疹在臨床上是常見的藥物不良反應，不但皮膚損害嚴重，常常還伴有內臟受損及全身中毒癥狀，易出現并發癥，如果未得到及時和有效的治療，該病死亡率相當高。因此積極和早期治療重癥藥疹患者有著極其重要的意義。糖皮質激素是有效的抗炎、抗過敏藥物，它能有效地減少炎性滲出[2]。而丙種球蛋白具有中和抗原、抑制細胞因子炎性介質的產生和釋放等作用，且其不良反應少見，是臨床上治療重癥藥疹的重要手段。糖皮質激素聯合丙種球蛋白目前是重癥藥疹治療中最有效的藥物[3]。但其治療機制仍尚未完全明確。

本研究結果與Dietrich的結果相符，與正常人群相比，重癥藥疹患者中N-乙酰基轉移酶活性降低，而且，經過糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療后，重癥藥疹患者中N-乙酰基轉移酶活性逐漸升高，直至接近正常人水平，這可能是糖皮質激素聯合丙種球蛋白治療重癥藥疹的機制之一，可為糖皮質激素聯合丙種球蛋白的臨床應用提供更多的理論基礎和實驗室依據。

參考文獻

[1]包振宇，鄒先彪.重癥藥疹的研究進展[J].實用皮膚病學雜志，2015，8（2）：1 12-1 14.

[2]汪小柳，李銳.方紅，等.38例重癥藥疹臨床分析[J].實用皮膚病學雜志，2010，3（3）：137-140.

[3]王俠生.重癥大皰型藥疹研究進展[J].臨床皮膚科雜志，2004，33（4）：254-256.