藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠血液流變學的影響?

羅亞敏，任小巧，宋慧榮，頓 珠，陶曉華，△

(1.北京中醫藥大學，北京 100029； 2.西藏藏醫學院，拉薩 850000)

偏頭痛作為一種反復發作的慢性疾病，其病程較長，遷延難愈。據文獻研究記載，頭痛占47%，其中偏頭痛占10%，而慢性頭痛的發病率約為3%，且這一發病率呈上升趨勢[1]。本病屬于中醫學頭風、頭痛、首風等范疇，并有久痛入絡、久病多瘀之論，且臨床上偏頭痛患者也多有血瘀兼證，故瘀血阻絡是偏頭痛發作的主要病機特點[2-3]。血瘀證指多種原因引起的血脈不暢、血行遲緩澀滯、血液壅阻于脈中或離經停積的病理狀態，是多種疾病的發病基礎或病變結果[4]。血液流變學相關指標檢測是臨床判斷血瘀證的重要客觀指標[5]。

藏醫認為偏頭痛為內脈疾病[6]，屬于白脈病范疇。作為治療白脈病的首選藏藥，如意珍寶丸療效顯著，其由珍珠母、沉香、石灰華、金礞石、紅花等30余種藥材組成，具有清熱、醒腦開竅、舒筋活絡及干黃水等功效，主要用于治療瘟疫、陳舊熱癥、白脈病、四肢麻木、癱瘓、口眼歪斜、神志不清、痹癥、痛風、肢體強直和關節不利等疾病，尤其適用于治療白脈病[7]。故本實驗從血液流變學方向探討藏藥如意珍寶丸治療偏頭痛的藥理作用。

1 材料與方法

1.1 藥物與儀器

藏藥如意珍寶丸(0.5 g×10丸/板×2板/盒)，青海金訶藏藥藥業股份有限公司生產(國藥準字Z63020064)；復方丹參滴丸，天津天士力集團生產(國藥準字ZL93100050)；鹽酸腎上腺素注射液，天津金耀藥業有限公司生產(國藥準字H12020526)；注射用生理鹽水,四川科倫藥業股份有限公司生產；肝素鈉抗凝管,河北鑫樂醫療器械科技股份有限公司(國藥準字17088801)；枸櫞酸鈉抗凝管,湖南省瀏陽市醫用儀具廠(國藥準字140523)；戊巴比妥鈉，德國生產(國藥準字171060)；全自動血液黏度動態分析儀，重慶南方數控設備有限責任公司生產；LD5-2B臺式低速離心機，京立有限公司生產。

1.2 動物

清潔級SD雄性大鼠，體質量200～220 g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供(合格證號SCXK(京)2016-0006)。

1.3 血液流變學檢測

SD雄性大鼠48只，體質量200～220 g，大鼠按隨機數字表法分為空白組、模型組、藏藥如意珍寶丸高(10 g·kg-1)、中(5 g·kg-1)、低(2.5 g·kg-1)組和復方丹參滴丸組(0.5 g·kg-1)6組各8只，連續灌胃給藥7 d。動物取血前1 d，除空白組外其余動物均皮下注射腎上腺素0.08 mL·kg-1，每日2次，間隔4 h。注射后2 h將大鼠浸入冰水中5 min，復制血瘀模型后禁食不禁水。次日上午大鼠動脈取血4.5 mL，其中3 mL血迅速注入肝素鈉抗凝管中搖勻后，置入35 ℃ 恒溫水浴箱中備用，1.5 mL迅速注入枸櫞酸鈉抗凝管中搖勻備用。

采用全自動血液黏度動態分析儀記錄中切變率黏度值、低切變率黏度值(切變率分別為30 s-1、1 s-1)；血漿黏度值、紅細胞壓積值(HCT)、纖維蛋白原含量、紅細胞聚集指數用高速微量離心機離心后，以全自動血液黏度分析儀測定。

1.4 統計學方法

采用SPSS20.0統計軟件進行統計分析，所有數據以均數±標準差(±s)表示，每組數據符合正態分布時，組間比較采用單因素方差分析，若方差齊組間差異比較采用LSD法，若方差不齊組間差異比較采用Tamhane法，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響

表1顯示，與空白對照組比較，模型組大鼠中切變率黏度、低切變率黏度、血漿黏度均明顯提高(P<0.01)，表示造模成功。與模型組比較，陽性藥可不同程度地降低中切率、低切率、血漿黏度值，尤以低切率差異變化明確(P<0.05)；而藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦可不同程度地降低中切率、低切率、血漿黏度，然以低劑量對血液黏度值顯示出明確的量效關系，而高劑量僅在中、低切變率有顯著變化(P<0.05)。與陽性藥比較，如意珍寶丸高、中、低劑量對血液黏度雖然產生改變，但差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s)

組 別鼠數劑量/g·kg-1全血黏度中切/mPa·s-1低切/mPa·s-1血漿黏度/mPa·s-1空白組8—34.0±4.8110.5±1.641.6±0.13模型組8—45.7±4.09&&14.5±1.22&&1.9±0.02&&珍寶丸組810.038.4±1.49*12.0±0.46*1.7±0.1185.043.4±6.7113.6±2.351.8±0.0582.536.5±1.30*11.3±0.41*1.7±0.10*丹參組80.538.9±1.5013.2±0.73*1.8±0.05

注：模型組與空白組比較:&&P<0.01；實驗組與模型組比較:*P<0.05

2.2 藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠紅細胞聚集指數、紅細胞壓積、纖維蛋白原的影響

表2顯示，與空白組比較，模型組的紅細胞聚集指數(P<0.01)、紅細胞壓積含量(P<0.05)均有不同程度的提高，顯示造模成功。與模型組比較，陽性藥組可使紅細胞聚集指數、紅細胞壓積含量產生顯著的藥物作用(P<0.05)，可知復方丹參滴丸對紅細胞聚集指數、紅細胞壓積值的變化有特異性，以此表現出活血作用；而藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦可不同程度地降低紅細胞聚集指數、紅細胞壓積等紅細胞指數值，其中以低劑量顯示出明確的量效關系，高劑量僅紅細胞壓積中有顯著改變(P<0.05)。與陽性藥比較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對血液狀態產生趨勢，但差異無統計學意義(P>0.05)。

表2顯示，與空白組比較，模型組大鼠纖維蛋白原出現明顯量效關系(P<0.01)，表示模型成功。與模型組比較，陽性藥組可使纖維蛋白原值降低，差異無統計學意義(P>0.05)；藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦有使纖維蛋白原降低的特性，但僅以低劑量對纖維蛋白原具有相關性(P<0.05)，可見實驗藥有一定的活血化瘀作用。與陽性藥比較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量雖有使纖維蛋白原產生變化的功能，但差異無統計學意義(P>0.05)。

表2 藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠紅細胞聚集指數、紅細胞壓積、纖維蛋白原的影響(±s)

表2 藏藥如意珍寶丸對急性血瘀模型大鼠紅細胞聚集指數、紅細胞壓積、纖維蛋白原的影響(±s)

組 別鼠數劑量/(g·kg-1)紅細胞聚集指數紅細胞壓積/%纖維蛋白原/g·L-1空白組8—0.3±0.050.4±0.013.5±0.42模型組8—0.5±0.04&&0.5±0.02&4.0±0.15&&珍寶丸組810.00.4±0.030.4±0.00*3.7±0.1485.00.4±0.080.4±0.063.8±0.0282.50.4±0.01*0.4±0.02*3.6±0.13*丹參組80.50.4±0.02*0.4±0.00*3.9±0.01

注：模型組與空白組比較:&&P<0.01，&P<0.05；實驗組與模型組比較:*P<0.05

3 討論

藏醫以“黑白脈”學說論述神經、血管之間的聯系。其理論表明，人體各有脈絡，而部分脈絡又相互連接稱之聯結脈。聯結脈分為白脈(指神經)和黑脈(指血管)2種，腦為白脈之海，腦至延髓自內發出命脈，延伸若干分支，布于五臟六腑、四肢及具感知功能的水脈中[8]。如白脈神經損傷，則有可能引起全身性神經功能障礙，日久可造成黑脈的病變，因此白脈病的發病機制與偏頭痛的病理性質相似。現代研究證實，藏藥如意珍寶丸治療白脈病有效率達 87%以上，且有明顯的止痛效果，是目前治療神經性疼痛最理想的藏藥之一[9]，且其用于偏頭痛的治療亦具良效[10]。

中醫學認為，偏頭痛其病因可為感受外邪或臟腑功能失調或外傷，使氣血運行不暢，瘀阻腦中脈絡而發，或久病入絡入血而致瘀，瘀阻于上，清氣不升，濁氣不降，氣血壅滯，閉塞不通，不通則痛，故“瘀血阻絡”必然為頭痛的主要病機[11-12]。治療原則以祛風止痛通絡、活血化瘀為主，而藏藥如意珍寶丸的藥方中即包含此類作用。如珍珠母、甘草膏、短穗兔耳草醒腦開竅、疏通脈道；蓽茇、高良姜、肉桂溫通經絡；木香、 藏木香、麝香消炎止痛；紅花、乳香活血化瘀；決明子、黃葵子干黃水；丁香、肉豆蔻、豆蔻調養五臟；金礞石、螃蟹補腎利尿；沉香祛風、調和風能和隆病[13]，諸藥合用可以改善血液濃度、疏通經絡、修復陳舊組織的神經血管損傷。

利用現代技術不僅能深入辨釋血瘀證的血液流變學特點，亦能清楚其治療機制及過程，提高治證效果。臨床血液流動指標主要包括全血黏度、紅細胞壓積、血漿黏度、紅細胞變性指數、紅細胞聚集指數、纖維蛋白原含量[14]。全血黏度是血液流動時鄰近兩層平行流體層互相位移時的摩擦力而形成的阻力，其為血清黏度、血細胞比容、紅細胞變性、聚集能力、血小板和白細胞流變性的綜合表現。全血黏度包括高切、中切、低切變率黏度，中切變率黏度反映紅細胞無明顯變形和聚集時的流動性，低切變則反映紅細胞的聚集能力。血黏度受諸多因素影響，而紅細胞作為血液的有形成分，由于數量最多、所占比率最大，是影響血液黏度的主要成分。因此，紅細胞壓積是影響血黏度最重要的因素，紅細胞壓積增大，使血液的黏滯性增加、流動性減弱，紅細胞表面電荷減少、聚集性增加，紅細胞沉降率方程式K值增大，紅細胞沉降增快，血液黏度增大[15-16]。紅細胞數量增加，細胞的聚集性增強，引起低切變率血黏度升高，紅細胞的變形性降低，引起高切變率血黏度升高。總之在任何切變率下，隨著紅細胞壓積的增高，血黏度隨之升高[17]。此外，纖維蛋白原含量增加則表示血液黏度越高。

由于暴怒時機體內腎上腺素分泌快速升高，本實驗一次性大劑量皮下注射腎上腺素模擬機體的暴怒狀態，肝氣郁結、氣滯血瘀，使大鼠皮膚黏膜血管收縮，血液流動變慢；至2 h后給予冰水刺激，模擬中醫寒凝血瘀、結合氣滯血瘀和寒凝血瘀兩種因素建立急性血瘀證模型。結果發現，陽性藥活血作用體現在于導致紅細胞聚集能力下降；藏藥如意珍寶丸對紅細胞壓積值改善作用最好，對紅細胞聚集指數作用次之，對纖維蛋白原作用最弱。與陽性藥組相較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對血液狀態的影響無明顯關系變化。但可以說明，藏藥如意珍寶丸與陽性藥具有同等效果的活血化瘀作用，且丹參滴丸注重心血管方面的化瘀作用，故可考慮進一步探討藏藥如意珍寶丸治療心血管方面的藥效學作用。

本實驗研究結果表明，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對腎上腺素聯合冰水游泳法復制大鼠急性血瘀模型，均不同程度地降低大鼠血液黏度、紅細胞壓積、紅細胞聚集指數和纖維蛋白原含量，活血化瘀作用明顯，而該作用可能是其臨床用于治療偏頭痛的藥理作用之一。