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2018年第一季度廣東湛江地區規?;i場豬群重大疫病抗體檢測與分析

2018-08-09 09:35:06臺凡力黃如渠岑建明廖春燕
中國豬業 2018年7期
關鍵詞:血清檢測

臺凡力 黃如渠 岑建明 廖春燕

(廣東湛江農墾畜牧有限公司,廣東湛江 524022)

2018年春季,生豬價格低迷,養豬行業虧損嚴重,豬場開始減少對豬群的投入以節約成本。這種情況很容易造成重大疫病的發生和流行。為了解規模化豬場對豬群的免疫狀況以及豬群的健康狀態,對廣東湛江地區8家規?;i場進行抽血檢測,調查豬群的免疫狀況、健康程度。采集251頭經產母豬血清,進行豬瘟(CSF)、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)、豬圓環病毒病(PCVD)和豬偽狂犬?。≒R)等4種豬病毒病的免疫抗體檢測和分析。

1 材料和方法

1.1 材料

2018年4月,在廣東湛江地區8個規?;i場采集251頭經產母豬血清。

采用美國IDEXX公司生產的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病毒抗體檢測試劑盒(gB)、豬偽狂犬病毒抗體檢測試劑盒(gE)和韓國金諾公司生產的豬圓環病毒病檢測試劑盒進行血清學檢測。

主要試驗用儀器有MK3酶標儀、MK2自動洗板儀、Milli-Q-A超純水機、單道微量移液器、多道微量移液器、渦旋混合儀等。

1.2 樣品采集

每個豬場一次采集血樣不少于30份。血樣采集后及時進行常規血清分離,冷凍備檢。

1.3 抗體測定

1.3.1 CSFV抗體測定

取50 μL血清,按照CSF病毒抗體檢測試劑盒的說明進行抗體檢測,讀取450 nm處樣本的吸光度值。有效的檢測結果為陰性對照平均OD450>0.500,陽性對照的阻斷率大于50%。如果被檢樣品阻斷率≥40%,則判為陽性;如果被檢樣品的阻斷率≤30%,則判為陰性;如果被檢樣品的阻斷率在30%~40%之間,則判為可疑,需重復檢測。如果重測結果仍可疑,就使用血清中和試驗進行最終確認。

1.3.2 PRRSV抗體測定

取10 μL血清,按照PRRS病毒抗體檢測試劑盒說明進行抗體檢測,讀取630 nm處樣本的吸光度值。陰性對照平均OD630≤0.150,陽性對照的平均值減去陰性對照的平均值≥0.150時,檢測結果有效。被檢樣品阻斷率≥40%,判為陽性;被檢樣品的阻斷率≤30%,判為陰性;如果被檢樣品的阻斷率在30%~40%之間,判為可疑,需重復檢測。

1.3.3 PCV2抗體測定

取10 μL血清,按照PCV2病毒抗體檢測試劑盒說明進行抗體檢測,讀取450 nm處樣本的吸光度值。陰性對照的平均OD450≤0.30,陽性對照的平均值≥0.50時,檢測結果有效。如果被檢樣品S/P值≥0.40,判為陽性;被檢樣品的S/P值≤0.30,判為陰性;如果被檢樣品的0.3≤S/P≤0.4之間,判為可疑,需重復檢測。

1.3.4 PRV(gB/gE)抗體測定

取50 μL血清,分別按照PRV gB和gE病毒抗體檢測試劑盒的說明進行抗體檢測,讀取630 nm處樣本的吸光度值。陰性對照的平均OD630減去陽性對照平均值>0.3,檢測結果有效。被檢樣品阻斷率≥0.70,判為陰性;被檢樣品的阻斷率≤0.60,判為陽性;如果被檢樣品的阻斷率在0.60~0.70之間,判為可疑,需重復檢測。

1.4 離散度分析

離散度(CV)采用變異系數表示。被檢測豬場免疫抗體的離散度≤40%,判為豬場免疫抗體比較整齊,防疫工作比較扎實。反之,離散度>40%,認為豬場免疫水平參差不齊,免疫效果不理想。

2 結果與分析

2.1 CSFV免疫抗體的檢測結果與分析

2018年4月,抽檢豬血清248份,CSFV免疫抗體陽性數229份,陽性率為92.33%。優勢抗體(S/N≥60%)190份,占群體比重76.61%。離散度平均為25.26%(表 1)。

由表1可見,該地區規?;i場CSF免疫抗體水平非常高,對豬群有保護作用的合格抗體所占比例大,陽性合格率達到了國家有關部門的要求(抗體陽性率大于70%)。特別是優勢抗體(S/N≥60%)所占比重超過半數,CSF免疫狀態良好,免疫效果非常理想。CV小于40%,免疫抗體非常整齊。抽檢的8家豬場中有7家豬場免疫合格率超過96.00%,顯示該地區規?;i場沒有放松對豬瘟的免疫。

2.2 PRRSV免疫抗體的檢測結果與分析

2018年4月,抽檢血清251份,PRRSV陽性血清抗體221份,陽性率為88.05%。CV為65.15%。有21份血清抗體S/P≥3.0,分布在7個豬場。

表1 2018年4月份CSFV免疫抗體檢測結果

由表2可見,該地區規模化豬場PRRS免疫抗體水平較高,但免疫抗體的離散度大于40%,說明免疫效果并不理想。7個豬場中有21份血清抗體S/P≥3.0。根據經驗,當S/P≥3.0時,懷疑有野毒感染,因此這7家豬場PRRS野毒感染壓力巨大,PRRS的防治工作不容樂觀。特別是編號為8號的豬場,血清抗體陽性率不高,且S/P≥3.0占比非常大,同時CV大于100;編號為2號的豬場,抗體陽性率雖達100%,但是S/P≥3.0所占比例也非常大。總的來說,該地區規?;i場PRRS的免疫工作不到位,防治工作不理想。

表2 2018年4月份PRRSV免疫抗體檢測結果

2.3 PCV2免疫抗體的檢測結果與分析

2018年4月,抽檢血清248份,PCV2血清抗體陽性243份,陽性率為97.98%。CV為17.61%。

由表3可見,該地區規模化豬場的PCV2抗體水平、陽性抗體合格率很高,抗體離散度非常小。8家豬場中有5家抗體陽性率達100%,并且CV都很小。另外編號為5號和8號的豬場離散度偏大,抗體滴度偏高,懷疑有野毒活動。總的來說,該地區規模化豬場對PCV2的免疫工作到位,防治工作比較理想。

2.4 PRV免疫抗體的檢測結果與分析

2018年4月,8家豬場共抽檢血清251份,gB抗體陽性251份,陽性率為100.00%,CV為27.56%;在抽檢的8家豬場248份血清中,gE陽性93份,分布在4家豬場。

表3 2018年4月份PCV2免疫抗體檢測結果

表4 2018年4月份PRV(gB)免疫抗體檢測結果

由表4可見,該地區規?;i場PR免疫抗體合格率非常好,免疫合格率高達100%,并且CV小于40%。說明該地區規模化豬場對PR比較重視,疫苗免疫非常到位。由表5看出,半數的規?;i場偽狂犬病野毒已經轉陽,其中有編號為1、2和4的3個場野毒檢出率非常高,分別是85.71%、100.00%和95%,說明偽狂犬病野毒非常活躍,正在發生或者流行。但是這3個場gB抗體的離散度非常小,分別為17.85%、24.15%和33.05%,說明豬場已經做了補救措施,疫苗免疫到位,并且效果確實。另外1個編號為8號的場,雖然檢測結果為陽性,但是檢出率比較低,同時gB抗體離散度只有15.20%,懷疑是剛剛感染,也有可能是檢測誤差。剩余4個場野毒檢測均為陰性,其中編號為3號和5號的場gB抗體離散度分別為14.53%和16.05%,說明這2個場免疫程序合理,免疫效果確實;編號為6號和7號的2個場,gB抗體離散度分別為48.52%和51.13%。說明這2個場雖然免疫的疫苗效果確實,但是免疫程序還需要稍微調整。

表5 2018年4月份PRV(gE)免疫抗體檢測結果

2.5 CSFV、PRRSV、PCV2和PRV免疫抗體檢測結果及分析

采集251份血清,其中有3份血清量不足,只檢測了PRRS和PR項目,而未檢測CSF和PCVD項目。CSF、PRRS、PCVD和PR免疫抗體合格樣品分別為229、221、243和251份,免疫抗體合格率分別為92.23%、88.05%、97.98%和100.00%,CV分別為25.26%、65.15%、17.61%和27.56%,見表6。

該地區規模化豬場抽檢血清的CSF、PRRS、PCVD和PR免疫抗體合格率非常理想,都高于85%,說明該地區規?;B殖場在市場低迷的情況下,并沒有減少對生物安全措施的投入,免疫程序合理,免疫力度比較大。豬群的免疫抗體水平高,免疫狀態和健康狀況好。

表6 2018年4月份CSFV、PRRSV、PCV2和PRV免疫抗體檢測結果

3 討論

3.1 豬瘟

CSF是由CSFV引起的一種急性熱性全身性敗血性傳染病,各年齡豬均可發病。現在我國已將該病列為一類傳染病,是當前養豬業重點防控的重要疾病之一。從抽檢結果看,該地區規?;i場對豬瘟的防治工作比較重視,免疫工作精準到位,免疫抗體合格率高。豬群比較健康,對CSFV疫苗的免疫應答比較敏感。另外也可推測,這一地區市面流行的豬瘟疫苗質量比較有保障,效果比較確實。所以這一地區豬瘟感染壓力相對較小。

3.2 豬繁殖與呼吸綜合征

PRRS是由PRRSV引起的一種繁殖與呼吸道癥狀的傳染病。臨床表現為厭食、發熱、母豬繁殖障礙、懷孕母豬大批流產、產死胎和木乃伊胎,仔豬與育成豬發生以高死亡率為特征的急性傳染病,我國將其列為二類傳染病。目前對該病的控制措施主要是疫苗接種,因此對PRRSV抗體的監控成為規?;i場控制該病的一種重要手段。但是用血清抗體來評估PRRSV疫苗的免疫效果不科學,因為PRRS具有免疫介導作用。目前主要利用動態監測和橫向對比來評估PRRS免疫抗體。在本研究中,該地區不同的8個規模化豬場PRRS免疫抗體差別明顯,PRRS的防治效果差異很大。PRRS屬于豬的免疫抑制性疾病,使得豬群的免疫機能受到抑制,其他疫苗的免疫效果明顯下降。結合對CSFV、PCV2和PRV的檢測結果來理解PRRS抗體的水平更有意義。當CSF、PCVD和PR 3種病毒病的免疫抗體效果都比較理想時,說明這一時期豬場沒有出現免疫抑制性疾病。此時如果PRRSV抗體水平比較高,基本可以認為疫苗免疫效果比較好;如果PRRSV抗體水平比較低,說明疫苗免疫不到位。當其他3種病毒病的免疫抗體效果都不理想的時候,如果PRRSV的抗體水平比較高,或者比較低,抑或比較亂,都可以說明豬場正在流行PRRS。本研究抽檢的8家豬場中,盡管個別豬場出現一種或兩種病毒病疫苗免疫不合理,但是總體來說,這3種病毒病的抗體還算比較理想。豬群的免疫狀態不錯,并沒有發生PRRS的流行,但是這一時期各個豬場的PRRS的CV都比較大,說明這一時期疫苗免疫效果不理想。

3.3 豬圓環病毒病

豬圓環病毒是斷奶仔豬多系統衰竭綜合征的主要病原,一般在仔豬斷奶后2~3天或1周發病,病死率可達10%,耐過豬后期發育明顯受阻。雖然近年來PCV2一直困擾著養豬業,但是就本研究抽檢的結果看,廣東湛江地區規?;i場對該病的防治比較成功??贵w合格率都在95%以上,這一地區規?;i場對該病的感染壓力不大。

3.4 豬偽狂犬病

自1956年,我國開始流行偽狂犬病。近年來,該病呈擴大趨勢。從本研究看該病在湛江地區已經流行,抽檢的8家豬場有4家陽性。在該病的疫區還有4家豬場能夠保持陰性,說明這幾家選擇的疫苗對豬群具有保護性。

4 小結

雖然目前養豬行情比較低迷,但湛江地區規?;i場幾種常見的重大疫病,如豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒病、豬偽狂犬病都防疫到位,抗體整齊,且合格率高,有效降低了該地區重大動物疫情流行的風險。

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