探討血細胞分析儀計數血小板的影響因素

龔鳳

（內江驊康醫院 四川 內江 641100）

血細胞分析儀提高了臨床檢驗效率，在檢測大量實驗參數的基礎上，還能保證檢驗結果的準確性。然而，通過血細胞分析儀計數血小板，仍然會受到多種因素的影響，造成檢驗結果不準確。我院用顯微鏡、血細胞分析儀兩種方法計數血小板，并比較了計數結果，以期為臨床診斷提供科學的參考依據，現做出如下報告。

1.材料與方法

1.1 材料

全自動血細胞分析儀XS-500i（希森美康醫用電子上海有限公司生產）及其配套試劑。干擾標本96份，平均分為A、B、C三組。

1.2 方法

根據血細胞分析儀的計數原則，將96份干擾標本進行如下分組：A組、B組、C組標本的后峰翹起始處分別是＞25fl、20～25fl以及＜20fl。分別應用血細胞分析儀與顯微鏡對三組標本進行血小板計數，比較計數結果以及正常、異常血小板直方圖的血小板情況，包括大血小板、血小板聚集、顯微鏡計數以及血細胞儀計數。

1.3 統計學方法

本研究應用SPSS19.0統計學軟件進行處理，計量資料以（±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料以率（%）表示，組間比較進行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 血細胞分析儀與顯微鏡計數血小板結果比較，見表1

表1 血細胞分析儀與顯微鏡計數血小板結果比較（×109/L,±s）

表1 血細胞分析儀與顯微鏡計數血小板結果比較（×109/L,±s）

計數方法 A組（n=32）B組（n=32）C組（n=32）血細胞分析儀 155.13±40.86 208.15±49.63 256.98±61.27顯微鏡 152.27±39.64 177.28±41.54 168.54±45.65 t 1.2383 17.5692 17.1847 P＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 正常、異常血小板直方圖的血小板情況比較，見表2

表2 正常、異常血小板直方圖的血小板情況比較

3.討論

3.1 影響血小板計數的因素分析

3.1.1 小紅細胞對血小板計數的影響 A組標本的后峰翹起始點＞25fl，在血小板計數體積的范圍之外，所以分析儀無法將標本中的小紅細胞計入血小板中。B組、C組后峰翹起始點分別是20～25fl和＜20fl，雖然分析儀通過浮動界標區分標本的紅細胞與血小板，然而標本內的小紅細胞數量明顯多于血小板，縱然血小板中混入了很小一部分小紅細胞，同樣會影響血小板計數，而且后峰的左移程度越明顯，后峰翹越高，對血小板計數的影響就越大[1]。

3.1.2 試劑質量對血小板計數的影響 如果溶血素、稀釋液沒有按照要求過濾，或者受到污染，則會增加血小板計數的假性。在使用血細胞分析儀進行本底檢測時，若發現本底較高，則應徹底清洗，讓本底保持正常范圍。

3.1.3 藥物對血小板計數的影響 資料顯示[2]：患者輸注了脂肪乳后，會對血小板計數產生影響，因為血小板的直徑與脂肪乳劑的脂肪乳顆粒直徑十分相似，所以輸注后會造成血小板假性升高現象。如果對使用了脂肪乳劑患者進行血小板計數，盡量在5～6h檢測，若計數水平仍然過高，要在第一時間聯系臨床醫生，并經過血片觀察后，再報告血小板計數結果。

3.1.4 標本溶血對血小板計數的影響 溶血現象破壞了紅細胞，使其計數減少。遭到破壞后，紅細胞會形成大小不一的碎片。分析儀會把碎片判斷成血小板，導致血小板計數增加。

3.1.5 彌散性血管內凝血（DIC）對血小板計數的影響 對DIC患者實施手工計數、儀器計數，其結果差異很大。后者計數高于前者。主要是因為溶血后形成的紅細胞碎片，會對分析儀計數血小板造成正向干擾[3]。血小板直方圖顯示血小板的低鑒別線度數與分布寬度均高于規定值。DIC患者早期便會出現血管溶血現象，而血小板計數是臨床診斷DIC的重要參考指標[4]，對于疑似DIC患者的血液標本應采用手工方法計數血小板。

3.1.6 抗凝劑對血小板計數的影響 血細胞分析儀使用的抗凝管中是定量的ED-TA-K2水溶液[5]，一旦采集血液量不標準，就會破壞血液和抗凝劑之間的比例。如果血液量太少，那么水溶液則會稀釋血液，導致血小板計數減少。反之，血漿內會出現凝集，不僅造成血小板計數減少，而且會使之凝聚。此外，采集血液后沒有充分搖晃抗凝管，導致凝塊出現，同樣會影響血小板計數結果。特別是對于體積小，不容易發現的凝塊，因為分析儀會選擇性的吸入血漿多的血液[6]，所以血細胞一旦減少，血小板計數也會減少，與之有關的參數也會發生變化。因此，采集血液標本后，應立刻搖晃抗凝管，不能使用草酸鹽抗凝劑，否則會造成血小板聚集，影響白細胞的形態，從而影響血小板計數，也不便于白細胞分類。肝素則會使血小板與白細胞聚集減少，使用肝素后，如果標本放置時間過長，同樣會凝固。由此認為：肝素、草酸鹽會降低血小板計數，都不適合用于血細胞分析。

3.2 加強血細胞分析儀計數血小板的質量控制

3.2.1 檢測前 加強檢驗科工作人員的培訓，學習標本采集方法、儀器的校正和鑒定方法、質量控制方法等。血小板直方圖之所以會出現異常，根本原因是不合格的血液標本造成的[7]。在血小板計數過程中，合格的血液標本是提高計數準確度的重要因素。檢驗人員應和臨床護理人員積極溝通，明確告知對血液樣本的要求。

（1）采集標本時，抽血要流暢，保證準確的抗凝劑與血液比例；當血液注入硅管后，應充分顛倒，搖晃均勻，以免血液凝集。（2）采集血液時，指導患者統一姿勢。（3）止血帶壓迫止血的時間應＜1min[8]。（4）在臨床檢查、治療前進行采血。（5）對于輸液患者，應采集非輸液手臂的靜脈血。

3.2.2 檢測中 嚴格按照規范標準操作儀器，在儀器運轉過程中，仔細觀察運轉狀態及各個環節，減少外界環境對儀器造成的干擾，避免病理因素影響血細胞分析儀的正常使用。每天檢測儀器的精密度、準確度。

3.2.3 檢驗后 加強檢驗人員工作責任心的培養，保證完成復核程序后再報告計數結果。對于腫瘤放化療、白血病患者普遍存在血小板減少的情況，在使用分析儀檢測后，必須用顯微鏡再次檢測和計數。若患者沒有血液疾病，但表現為血小板直方圖異常，血小板計數減少，則應告知護理人員，重新采集標本復查。