B族鏈球菌核酸檢測在產前篩查中的應用

張桂花 羅錦彬

GBS是一種常見的細菌, 是導致胎膜早破、新生兒感染、腦膜炎等嚴重并發癥發生的重要致病菌。GBS感染后存活的新生兒可伴有較為嚴重的耳聾、腦積水、小頭畸形等后遺癥［1-3］。為此, 對孕產婦進行 GBS檢測尤為重要, 不僅能夠有效降低并發癥發生率, 還能夠有效改善母嬰結局。臨床上主張加強對孕周為35～37周的孕產婦的產前檢測, 通過給予孕產婦早期GBS產前檢查干預, 能夠較好地降低新生兒早期感染風險以及產褥病發生風險, 從而有效提高預防效率, 最大可能保障母嬰健康。本文將本院800例孕產婦作為觀察對象并進行了研究, 現總結如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 將于2016年7月～2017年7月本院行產檢的800例孕產婦作為本次觀察對象, 所有孕產婦均行GBS感染產前篩查, 隨機抽選出GBS陰性孕產婦(陰性組)和GBS陽性孕產婦(陽性組), 各100例。陰性組年齡最小22歲, 最大48歲, 平均年齡 (40.13±2.62)歲；孕周35～37周, 平均孕周(36.57±0.14)周；57例經產婦, 43例初產婦。陽性組年齡最小23歲, 最大48歲, 平均年齡(40.33±2.56)歲；孕周35～37周, 平均孕周(36.42±0.19)周；58例經產婦, 42例初產婦。兩組孕產婦一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。

1. 2 方法 ①標本采集：擦拭清理干凈孕產婦的外陰分泌物, 將兩根拭子緩慢小心地插入孕產婦的陰道內, 旋轉1周,將陰道前1/3處的分泌物采集；而后將拭子緩慢小心地插入孕產婦的肛門, 約3 cm肛門括約肌上緣位置處進行1周的旋轉, 進行直腸標本采集, 待標本采集完畢之后進行細菌培養以及PCR檢測。②細菌培養：標本置入5%的羊血培養基里, 34～35℃溫度保持, 培養時間：16～24 h。而后接種培養選取可疑的灰白色細菌或圓形細菌, 培養時間：16～18 h。對細菌種類進行檢測、鑒別, 采用細菌鑒定儀進行操作處理。③PCR檢測：采用Vortex振蕩器對標本運輸液管進行處理,迅速震蕩均勻運輸液后于其中提取出懸濁液, 并將懸濁液放入1.5 ml離心管內, 對其進行5 min 13000 r離心, 將上清棄掉之后于離心管內將拭子浸泡液1 ml倒入其中, 而后再次對其進行混合均勻處理, 并對其進行5 min 13000 r離心, 將上清棄掉之后液重懸采用50 μl拭子進行浸泡處理。采用一管對固形物進行提取, 并將其置于菌液中, 2 min 95℃干浴后進行高速震蕩, 5 min后瞬時離心, 最后10 μl內參照加入, 2 min 95℃干浴后即刻冰浴備用。

1. 3 觀察指標及判定標準 觀察比較兩種檢測方法對GBS的陽性檢出率以及陰性組、陽性組母嬰并發癥發生情況。GBS陽性評定標準：熒光信號存在顯著的S形擴增曲線, CT值＜33［4］, TexasRed(內參)CT值＜40。母嬰并發癥發生情況包括胎膜早破、產后出血、早產、敗血癥、窒息、感染等。

1. 4 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 兩種檢測方法對GBS的陽性檢出率比較 細菌培養檢測的GBS陽性檢出率為9.00%, 明顯低于PCR檢測的12.75%, 差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法對800例孕產婦GBS的陽性檢出率比較 ［n(%)］

2. 2 陰性組、陽性組母嬰并發癥發生情況比較 陰性組孕產婦并發癥發生率為18.00%(18/100), 新生兒并發癥發生率為5.00%(5/100)；陽性組孕產婦并發癥發生率為43.00%(43/100),新生兒并發癥發生率為25.00%(25/100)；陽性組孕產婦、新生兒并發癥發生率顯著高于陰性組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

GBS通常寄居于人體的直腸或女性的陰道內部, GBS屬于條件致病菌, 是導致新生兒腦膜炎、肺炎等嚴重并發癥發生的重要因素。此外, GBS還可導致孕產婦感染, 是胎膜早破、早產的主要致病菌之一。相關數據研究顯示, 在健康女性生殖道內, 約有30%的女性體內存在GBS, 通常情況下,GBS不會致病, 當人體身體抵抗力下降或機體免疫功能減退時可引發嚴重感染, 尤其是在妊娠期過程中極易出現GBS感染, 導致孕產婦患上胎膜感染、菌血癥等嚴重性疾病［5-7］。

以往, 臨床上行GBS檢測通常采用細菌培養的方式進行處理, 通過收集直腸、陰道分泌物進行細菌培養, 能夠在一定程度上有效檢測出陽性GBS, 但是隨著醫學的深入發展,人們發現采用常規方式進行細菌培養極易出現假陰性等不良情況［8］。與此同時, 常規的細菌培養其檢測方法所消耗的時間比較長, 陽性鑒定最短時間需要48 h, 且該檢測方式的免疫學敏感性往往和菌量檢測存在緊密的聯系, 若檢測的菌量比較低時極易發生漏診、誤診等情況［9,10］。GBS的攜帶存在較為明顯的間歇性以及短暫性等特征, 對孕產婦實施B族鏈球檢測過程中選擇合適的時機非常重要。

本文采取PCR對孕產婦進行GBS核酸檢測, 從篩查、檢測的結果來看, 細菌培養檢測的GBS陽性檢出率為9.00%,明顯低于PCR檢測的12.75%, 差異具有統計學意義(P＜0.05),充分表明了在產前篩查中應用PCR檢測的應用優勢。GBS感染可誘發多種妊娠期并發癥, 如胎膜早破、早產、敗血癥等, 因而臨床上將GBS作為妊娠期并發癥誘發的主要致病菌之一。

綜上所述, 在產前篩查中應用PCR檢測方進行檢查, 可以有效提高GBS的陽性檢出率, 便于及時對陽性的孕產婦進行有效的干預處理, 從而最大限度降低母嬰并發癥發生風險,確保母嬰的生命安全。

［收稿日期：2018-04-02］