半夏與虎掌南星、天南星的鑒別研究

黃雍 劉夢嬌 張琴 張裕民 張志國 楊磊

〔摘要〕 目的 探索半夏與虎掌南星、天南星的鑒別特征，確保臨床用藥安全有效。方法 采用性狀鑒別、薄層定性鑒別以及HPLC指紋圖譜進行研究。結果 半夏呈類球形，偶有1～2個小側芽，無序著生；虎掌南星呈扁半圓形，側芽數量1至多個，且與主塊莖多在一個平面，排列有規律，形如虎掌；天南星呈扁球形，少有側芽；薄層鑒別結果顯示三者在Rf值0.05、0.23和0.99處顯相同顏色斑點，虎掌南星在Rf值0.91左右處的斑點隨著側芽數量的增多，逐漸趨向天南星，與半夏存在一定差別；指紋圖譜結果顯示虎掌南星在20.38 min和55.79 min處比半夏新增2個峰，與半夏指紋圖譜相似度在0.88左右，天南星在6.663 min、20.858 min、42.412 min和63.287 min處比半夏新增4個峰，與半夏指紋圖譜相似度為0.697。結論 半夏、虎掌南星、天南星在性狀鑒別、薄層鑒別、指紋圖譜鑒別均存在較大差別，其變異品種也存在差異，建議臨床區別應用。

〔關鍵詞〕 半夏；虎掌南星；天南星；性狀鑒別；TLC；HPLC

〔中圖分類號〕R285.5 〔文獻標志碼〕A 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2018.04.010

〔Abstract〕 Objective To explore the identification characteristics of Pinelliae Rhizoma （Banxia）， Pedate Pinellia Rhizoma （Huzhangnanxing） and Arisaematis Rhizoma （Tiannanxing）， and ensure safe and efficacy of clinical use. Methods This three kinds medicines were identified by using character identification， thin layer qualitative identification and HPLC fingerprints. Results Banxia was spherical， with occasionally one to two small buds， growing disorded. Huzhangnanxing was flat semi-circular， with one to more lateral buds， and with the main tuber in a plane， arranged in a regular， shaped like a tiger palm. Tiannanxing was flat spherical with few lateral buds. The TLC of this three medicines showed same spots at Rf values of 0.05， 0.23 and 0.99. With the increase of lateral buds， the spot of Huzhangnanxing at Rf 0.91 gradually tend to Tiannanxing， and was different with Banxia. The fingerprint of Huzhangnanxing showed two new peaks at 20.38 min and 55.79 min compared with Banxia， their similarity was 0.88. Tiannanxing added 4 peaks at 6.663 min， 20.858 min， 42.412 min and 63.287 min than Banxia. And the similarity of fingerprint of Tiannanxing and Banxia was 0.697. Conclusion The morphological identification， thin layer identification and fingerprint identification of Banxia， Huzhangnanxing， Tiannanxing are significantly different， and their variants also have some differences. So it is suggested that clinical application should be different.

〔Keywords〕 Pinelliae Rhizoma； Pedate Pinellia Rhizoma； Arisaematis Rhizoma； character identification； TLC； HPLC

半夏來源于天南星科半夏Pinellia ternate （Thunb.）Berit.的塊莖，性溫、味辛、有毒，具有燥濕化痰，降逆止嘔，消痞散結的功效[1]。

虎掌南星來源于天南星科半夏屬掌葉半夏Pinellia pedatisecta Schott.的塊莖，性溫，味苦、辛，有小毒，具有降逆止嘔，燥濕化痰，消痞散結等功效[2-3]。天南星來源于天南星科天南星屬天南星Arisaema erubescens（Wall.）Schott、異葉天南星Arisaema heterophyllum BL.或東北天南星Arisaema amurense Maxim.的塊莖，性溫，味苦、辛，有毒，具有消腫散結的功效[1]。近年來，半夏臨床需求較大，野生資源日益枯竭，更由于環境因素的影響，半夏屬植物形態變異豐富[4]，部分人工栽培品生有不規則小側芽，個體細小的虎掌南星外型與之極為相似，常誤做半夏用，從而影響半夏質量及臨床用藥安全。本實驗采用性狀鑒別、薄層定性鑒別以及HPLC指紋圖譜研究對半夏、虎掌南星、天南星以及臨床收集的一些疑似品種進行鑒別，以期為三者鑒別方法的建立提供實驗數據，為臨床用藥安全提供保障。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LC-20AT型高效液相色譜儀（日本島津），AL204型電子天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），HX-06型超聲清洗器（武漢恒信世紀科技有限公司），HY-SY4型水浴鍋（長沙匯一儀器有限公司）。

1.2 試藥

乙腈（色譜純，ACE），乙醇（安徽安特生物化學有限公司），硫酸（衡陽市凱信化工試劑有限公司），石油醚（天津市恒興化學制造有限公司），乙酸乙酯（天津市大茂化學試劑廠），丙酮（衡陽市凱信化工試劑有限公司），甲酸（成都市科龍化工試劑廠），甲醇、磷酸（湖南匯虹試劑有限公司），以上試劑均為分析純，水為娃哈哈純凈水。半夏對照藥材購自中國藥品生物制品檢定所（121272-200401），1～8號供試品按外觀側芽數量由無到多排列（見圖1）。經湖南省藥品檢驗研究院方石林教授鑒定1號為半夏，4～6號為虎掌南星，8號為天南星，2、3、7號為臨床上遇到但無法確定品種的藥材。40 ℃低溫干燥后粉碎過80目篩，備用。

2 方法與結果

2.1 性狀鑒別

采用傳統經驗鑒別方法對半夏，虎掌南星和天南星的性狀、直徑、表面、顏色、質地、斷面、氣味等特征進行觀察和比較。見表1。

2.2 薄層定性鑒別

2.2.1 對照藥材溶液的制備 取半夏對照藥材粉末1 g，加乙醇10 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液濃縮至0.5 mL即可。

2.2.2 供試品溶液的制備 分別精密稱取1～8號供試品粉末1 g，按“2.2.1”項下方法制成供試品溶液。

2.2.3 色譜條件與方法 吸取對照藥材溶液及1～8號供試品溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（30∶6∶4∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰[1]。見圖2。

2.3 HPLC指紋圖譜研究

2.3.1 色譜條件 色譜柱Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脫：0～55 min 5%～55%A，55～70 min 55%～65%A，70～80 min 65%～80%A，80～90 min 80%～90%A。檢測波長270 nm，流速1.0 mL·min-1，柱溫26 ℃。

2.3.2 精密度實驗 取半夏對照藥材溶液，按“2.3.1”項下色譜條件重復進樣6次，計算各色譜峰的相對保留時間和相對峰面積，RSD分別為1.70%、2.30%，表明儀器精密度良好。

2.3.3 穩定性實驗 取半夏對照藥材溶液，按“2.3.1”項下色譜條件，分別于室溫下0、2、4、8、12、24 h進樣分析，計算24 h內各色譜峰相對峰面積，RSD 1.40%，表明樣品24 h內穩定性良好。

2.3.4 重復性實驗 取半夏對照藥材約1 g，精密稱定，按“2.2.1”項下方法制備供試液，平行6份，按“2.3.1”項下色譜條件進樣，計算各色譜峰相對峰面積，RSD 1.69%，表明方法重復性良好。

2.3.5 指紋圖譜的建立 精密吸取半夏對照藥材溶液及各供試品溶液10 μL注入高效液相色譜儀，按“2.3.1”項下色譜條件測定。見圖3。

2.3.6 指紋圖譜相似度評價 采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統（2004A版）進行數據處理分析，以半夏對照藥材為參照圖譜計算相似度。見表2。

3 討論

3.1 性狀鑒別

半夏部分栽培品長有少數不規則小側芽，易與較為細小的虎掌南星混淆，經查閱大量文獻和實物考證，歸納出兩者主要鑒別點：半夏呈類球形，質地呈粉性，在莖痕周圍，半夏密布的根痕為明顯的凹點狀，偶有1～2個小側芽，無序著生，常不在一個平面。虎掌南星呈扁半圓形，由主塊莖及多數附著的小塊莖組成，每一塊莖中心都有一莖痕，側芽數量1至多個，且與主塊莖多在一個平面，排列有規律，形如虎掌。天南星呈扁球形，少有側芽，無序著生。因此，性狀鑒別著重觀察側芽的數量和著生方式，可作為半夏、虎掌南星、天南星鑒定和質量控制的依據之一。

3.2 薄層定性鑒別

薄層定性鑒別結果顯示半夏、虎掌南星、天南星在Rf值0.05，0.23和0.99處顯相同顏色斑點，虎掌南星在Rf值0.91左右處的斑點隨著側芽數量的增多，逐漸下移并趨向天南星，與半夏存在一定差別，但差別不明顯，尚不能作為區分三者的鑒別方法。

3.3 HPLC指紋圖譜鑒別

本實驗在指紋圖譜建立時，分別考察了Generall C18AQ（250 mm×4.6 mm，5 um）和Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，其中Sepax C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱所得譜峰最多，分離度較好。在選擇流動相過程中分別考察甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1%冰醋酸、和乙腈-0.1%甲酸等流動相，結果乙腈-0.1%甲酸水溶液的洗脫效果最好，故選擇此作為流動相。分別考察254 nm和270 nm波長，結果表明在270 nm處各色譜峰峰形較好，色譜信息較為豐富，分離度較好，故選用270 nm作為檢測波長。

虎掌南星指紋圖譜在20.38 min和55.79 min處比半夏新增2個峰，與半夏相似度在0.88左右，天南星指紋圖譜在6.663 min，20.858 min，42.412 min和63.287 min處比半夏新增4個峰，與半夏的相似度為0.697。2、3、7號藥材是在臨床上遇見，但不能確定品種的藥材，根據專家推測為半夏的變異品種，其指紋圖譜與半夏對照藥材指紋圖譜對比，2號在41.006 min；3號在41.603 min各新增1個峰；7號在30.893 min，38.274 min，45.406 min新增3個峰。因半夏和虎掌南星為同科同屬植物，親緣性較大，半夏屬植物形態變異豐富，臨床上出現很多變異品種，且半夏、虎掌南星和天南星均有小毒，為保障用藥安全性，臨床應該嚴格區分。指紋圖譜研究中新增的色譜峰以及相似度均表明各樣品之間化學成分存在顯著差異，臨床療效也將不同[5-7]，新增的色譜峰可為半夏、虎掌南星、天南星及變異品種的鑒別提供參考依據。

參考文獻：

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