中藥材農(nóng)藥殘留提方法對比分析

陳家德 高興國

【摘要】目的：對比分析中藥材中農(nóng)藥殘留采取不同提取方法的有效性。方法：采取索氏提取、加速溶劑萃取以及超聲提取等方式提取中藥材中農(nóng)藥殘留，經(jīng)過凝膠滲透色譜、濃硫酸磺化以及弗羅里硅土柱凈化方式，得出相應(yīng)的樣品，然后對比農(nóng)藥殘留含量。結(jié)果：凝膠滲透色譜相較于固相萃取、磺化法準(zhǔn)確率較高。結(jié)論：ASE的提取率相對較高，檢測的結(jié)果也較為準(zhǔn)確，并且操作自動(dòng)，可以省時(shí)省力。

【關(guān)鍵詞】中藥材；農(nóng)藥殘留；超聲提取法

[中圖分類號(hào)]R473 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2018）02-210-02

中藥多采用口服的方式，通過改善人體的內(nèi)環(huán)境提高人體抵抗疾病的能力，順其自然的治好疾病。相對于西藥來說，中藥的毒副作用更小一些，但中藥材在種植過程中，農(nóng)藥使用導(dǎo)致一定的殘留，對使用者造成一定危害。有研究[1]認(rèn)為，中藥材農(nóng)藥殘留檢測方法比較多，很多檢測方式都是采取添加回收率的方式，對農(nóng)藥提取是否安全進(jìn)行衡量。然而，添加農(nóng)藥與藥材自身吸收農(nóng)藥的狀態(tài)存在巨大差異，但添加的農(nóng)藥和藥材本身吸收的農(nóng)藥狀態(tài)差異很大，通過添加回收方式無法對藥物自身對農(nóng)藥吸收的情況進(jìn)行準(zhǔn)確反映。本次研究采用索氏提取、加速溶劑萃取以及超聲提取等方式提取中藥材中農(nóng)藥殘留，探究了中藥材中農(nóng)藥殘留采取不同提取方法的有效性，總結(jié)如下：

1.儀器、試藥與方法

1.1 儀器、試藥

儀器包含SHB-B型循環(huán)水式多用真空泵、GC-2氣相色譜儀——電子捕獲檢測器（GC-ECD）、HP-5石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）、DB1701石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）：DionexASE-350加速溶劑萃取儀、KH-3000plus凝膠滲透色譜儀、凈化柱、填料50gBio-BeadsTypeS-X3200-400；KX（GJ）100-1密封制樣粉碎機(jī)、CP214電子天平、SK5200LHC超聲波清洗器、RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等。

玄參、白術(shù)、黃芪；Florisil硅土柱、正己烷、無水硫酸鈉、濃硫酸、乙酸乙酷、丙酮、石油醚、乙睛。農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)品：六六六（BHC）3個(gè)異構(gòu)體α-BHC、β-BHC、γ-BHC、六氯苯、五氯硝基苯、pp-DDE、反式氯菊酯（trans-permethrin，批號(hào)80104，純度都高于99.0%。

1.2 方法

1.2.1 提取方法

將樣品在自然條件下陰干后粉碎，過0.24mm孔徑的樣品篩，待用。

加速溶劑萃取：準(zhǔn)確稱取樣品1g、硅藻土1g（硅藻土起到分散劑的作用），混勻，置于10mL的萃取池中，待測。ASE系統(tǒng)壓力1500psi，溫度100℃，加熱時(shí)間5min，靜態(tài)萃取時(shí)間5min，沖洗體積為60%，氮吹60s，循環(huán)2次。提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。

超聲提取：準(zhǔn)確稱取1g樣品與1g無水硫酸鈉，混勻，置于100mL具塞三角瓶中，加入提取溶劑30mL，冰浴提取15min，將提取液過濾至100mL茄形瓶中，重復(fù)提取1次，合并提取液并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。

索氏提取：準(zhǔn)確稱取樣品10g與無水硫酸鈉1.0g，混勻，置于濾紙包中，放入索氏提取器中，加80mL提取溶劑（索氏提取器中30mL，100mL圓底燒瓶中50mL），65℃水浴提取30min，約回流6次，將提取液轉(zhuǎn)移至100mL茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃水浴中濃縮至近干，待凈化。

1.2.2 凈化方法

磺化法指的是把濃縮后的殘?jiān)谜和槎哭D(zhuǎn)移至具塞刻度試管中，定容至5mL，再用移液槍加入1mL濃硫酸，渦旋1min，3000r/min離心10min，取上清液，進(jìn)氣相色譜儀測定。

固相萃取法操作如下：將濃縮后的殘?jiān)?mL的正己烷進(jìn)行溶解，將裝有1mL左右高度無水硫酸鈉的弗羅里硅土柱置于固定架上，先用10mL正己烷-乙酸乙醋（85：15）進(jìn)行淋洗，當(dāng)淋洗液近干時(shí)快速移入樣品濃縮液，用2mL淋洗液脫茄，轉(zhuǎn)入柱中，用50mL茄形瓶收集洗脫液20mL，在40℃水浴旋轉(zhuǎn)濃縮至近干。

凝膠滲透色譜是把濃縮后殘?jiān)靡宜嵋掖?環(huán)己烷（1：1，V/V）定容至5mL，0.22μm濾膜過濾后，進(jìn)行凝膠滲透色譜凈化，乙酸乙醋-環(huán)己烷（1：1，V/V）為流動(dòng)相，流速5mL/min，玄參樣品收集11-14min流出物，白術(shù)收集11-16min流出物，黃芪樣品收集14-17min流出物，在40℃水浴中進(jìn)行濃縮，加正己烷1mL溶解，待測。

1.2.3 色譜條件

HP-5彈性石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm，0.25μm），進(jìn)樣口溫度250℃，不分流進(jìn)樣。升溫程序：初始溫度120℃保持1min，以8℃/min速度升溫至150℃保持2min，以4℃/min速度升溫至270℃保持4min。檢測器溫度為300℃，流速為1mL/min，進(jìn)樣量為1μL。

2.結(jié)果

檢測結(jié)果見表1。

3.討論

現(xiàn)階段，在對中藥材中農(nóng)藥殘留進(jìn)行監(jiān)測時(shí)，主要采取回收率判斷檢測結(jié)果好壞。然而，基于添加農(nóng)藥會(huì)附著在藥材的表面，和藥材自然生長時(shí)所吸取農(nóng)藥不一樣，兩者提取出農(nóng)藥量也就存在差異[2]。本次研究中指出ASE的提取率相對較高，檢測的結(jié)果也較為準(zhǔn)確，并且操作自動(dòng)，可以省時(shí)省力。但是在實(shí)際檢測過程中，需要按照自身情況來設(shè)計(jì)方案與方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉洪波.氣質(zhì)聯(lián)用測定杭白術(shù)等3種中藥中5種擬除蟲菊醋類農(nóng)藥殘留[J].浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，32（1）：110-115.

[2]何惠芳.氣相色譜技術(shù)檢測中藥農(nóng)藥殘留的應(yīng)用體會(huì)[J].醫(yī)藥前沿，2014，23（18）：10-11.