正交試驗法優選肝加欣片提取工藝

周立峰 尤春娟 黃帥波

（吉林省正和藥業集團股份有限公司，吉林通化134001）

0 引言

肝加欣片由五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根、云芝胞內糖肽、豬膽粉組成，具有舒肝解郁、清熱利濕的作用，用于治療慢性病毒性肝炎肝郁脾虛證，癥見胸脅脹痛、神疲乏力、食欲不振、煩躁等。該品種為半浸膏片，即由五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根的浸膏與云芝胞內糖肽、豬膽粉細粉制粒壓片而成。本文采用正交試驗法，對肝加欣片中五味子的乙醇提取工藝[1]進行優選，為該制劑的生產工藝提供依據。

1 試驗材料

1.1 試驗設備

實驗室用索氏提取器（上海舍巖儀器有限公司）、實驗室用旋轉蒸發儀（天津星科科技有限公司）、XZB-01型循環水式多用真空泵（遼寧方泰儀器有限公司）、SY-Z型數顯水浴鍋（上海晰達儀器有限公司）、電加熱套（上海晰達儀器有限公司）、多功能微型提取濃縮機組（武漢制藥設備制造有限公司）、YQB系列超音速氣流粉碎機（山東某氣流粉碎機廠）、LY-2型實驗室用槽型混合機（常州某制藥機械有限公司）、YB-30型實驗室用搖擺式顆粒機（常州某制藥機械有限公司）、實驗室用熱風循環烘箱（蘇州某制造有限公司）、XYP-1小型旋轉式壓片機（上海某制藥機械廠）、XXB-A實驗型高效包衣機（上海某制藥機械廠）、MB25型快速水分測定儀（上海洪紀儀器設備有限公司）、CS241電子計數臺秤（上海宏衡實業有限公司）、GF-300AX萬能粉碎機（江陰某機械制造有限公司）、多功能提取罐（武漢某制藥機械廠）、球形罐（武漢某制藥機械廠）、WZ75型外循環式真空蒸發器（武漢某制藥機械廠）、乙醇回收器（武漢某制藥機械廠）、GZHX-22管式真空干燥箱（武漢某制藥機械廠）、JZJ2BE型水環式羅茨真空泵機組（上海萬經泵業制造有限公司）、CHW-6型槽型混合機（北京某研究所）、YB-99型搖擺式顆粒機（北京某研究所）、GFG120型高效沸騰干燥機（上海某制藥設備廠）、HD-600型多向運動混合機（溫州某制藥機械設備廠）、ZPY-136型旋轉式壓片機（上海某制藥設備廠）、BGB-150B型高效包衣機（溫州某制藥機械設備廠）、DPP-250B型鋁塑包裝機（瑞安某包裝機械廠）、RE5210A（10 L）旋轉蒸發儀（上海賢德實驗儀器有限公司）、HH-A型數顯水浴鍋、電加熱套（上海況勝實業發展有限公司）、HTYWS-H型快速水分測定儀（武漢市華天電力自動化有限責任公司）、RS232接口電子臺秤（江蘇麥莎實業有限公司）、1/1 000電子天平（深圳市中杰衡器有限公司）、島津LC2010AC型高效液相色譜儀（上海納諾實業有限公司）、玻璃燒杯（上海達豐玻璃儀器廠）、藥典篩（山東青州市邁德森制藥機械廠）。

1.2 原輔料

原料：五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根、云芝多糖、豬膽粉等藥材（安徽省亳州市藥材總公司中藥材公司）。

輔料：淀粉（蘇州德巴化工有限公司），藥用乙醇（南京化學試劑股份有限公司），白色包衣粉、灰藍色包衣粉（湖南岳陽嘉之源生物科技有限公司）。

2 方法與結果

2.1 因素水平的確定

本試驗選擇提取次數（A）、提取時間（B）、乙醇濃度（C）、乙醇用量（D）4個影響因素，根據以往生產的提取工藝經驗，本試驗將提取次數（A）作為固定因素，選擇提取時間（B）、乙醇濃度（C）、乙醇用量（D）3個因素作為變量進行考察。

本試驗采用L9（34）正交試驗法，每次試驗水平為N，即試驗號，其因素水平設計如表1所示。

2.2 試驗方法與結果

按照L9（34）正交試驗表安排試驗，以粉碎后的浸膏混合粉中五味子醇甲的百分比含量為考察指標，試驗安排及結果如表2所示，方差分析結果如表3所示。

從方差分析結果可知：方差分析各因素兩水平間均無顯著性差異，影響最大的因素為D乙醇用量，3個因素影響主次順序為D＞B＞C。綜合考慮最佳提取工藝為AB2C2D2，即提取3次、提取180 m in、乙醇濃度75%、乙醇用量3倍量。

2.3 驗證試驗

2.3.1 制劑驗證過程

按以上最佳提取工藝，制備3批（批量300 000片）肝加欣片，稱取五味子95.25 kg，經萬能粉碎機粗碎成0.2～0.5mm顆粒，裝袋投入醇提罐中，提取3次。第1次：（先浸泡2 h）提取180 m in，75%乙醇3倍量；第2次：提取60 m in，75%乙醇3倍量；第3次：提取60 min，75%乙醇3倍量，提取液備用。按批配方量稱取柴胡、板藍根、棉茵陳投入提取罐中，加水量為藥材量的5倍，常壓回流提取1 h；真空回流提取4 h進行真空濃縮，溫度為60～90℃，真空度為-0.05～-0.09MPa，濃縮到相對密度達1.10～1.14（60℃）備用；將醇提藥液和水提藥液加入到刮板式濃縮器內合并濃縮至相對密度達1.3（60℃）；將五味子提取液與板藍根等藥液合并，用球形罐進行濃縮成稠膏（真空度0.04～0.06 MPa，溫度75～80℃）；稠膏相對密度為1.3（60℃），再加入30 kg的淀粉混合后，減壓真空干燥（干燥溫度為60～70℃，真空度為0.075～0.095MPa），干燥8 h后，放涼，稱重，用萬能粉碎機粉碎，過80目篩，放入桶內的塑料袋中；用600型多向運動混合機混合30 m in，放入桶內的塑料袋中，以30萬片為一批，分兩次制粒。

表1 肝加欣片正交試驗的因素水平

表2 肝加欣片正交試驗安排及結果

表3 方差分析

稱取每批量肝加欣膏粉的1/2，加入3 kg的云芝胞內糖肽和3 kg的豬膽粉，投入濕法混合顆粒機中，干混30 s后緩緩加入60%乙醇3 000m L，快切慢混60 s，投入沸騰干燥機內，60～65℃下干燥10m in，下料后用12目旋振篩整粒；兩批的顆粒稱重后投入多向運動混合機中，加總重1.0%的硬脂酸鎂，混合20m in，下料于不銹鋼桶中；在旋轉式壓片機10.5mm的淺凹沖膜中進行壓片，轉速為30 r/min，壓力適度。每15m in稱量一次片重，用1%的電子天平稱量，分別稱量10片，記錄，片重差異控制在0.35 g（±2%）。片子外觀：硬度適宜，無麻面，無破邊，無裂片，表面光潔。稱取白色包衣粉（為基片重的2.5%）放進不銹鋼桶中，加純化水，濃度為12%，如白色包衣粉2.5 kg，加純化水量為2.5 kg÷（12/100）-2.5 kg（包衣劑用量）=18.3 kg，攪拌45m in，即可噴用。噴漿開始轉速可為4 r/min，當包上一層后即可改為5～6 r/m in，再增加到8～9 r/m in，噴漿量以不粘片為準，溫度不可超過45℃。白色漿料用完后包灰藍色漿料（在白色漿料未包完之前即配灰藍色漿料，方法用量同白色），片面要求平滑，顏色均勻，無色差，無污點，美觀。對顆粒含量（按每片五味子乙素計）、每片素片五味子醇甲含量及每片薄膜衣五味子醇甲含量進行檢測，證明提取工藝的實用性。2.3.2 合格標準

每片含五味子醇甲以五味子醇甲計不得少于0.56mg。

2.3.3 檢測結果對比

每批取樣一次進行樣品檢測，以確認提取工藝的重現性，結果如表4所示。

表4 各指標檢測結果

檢測結果表明：顆粒含量、素片含量、薄膜衣片含量等均符合質量標準，表明優選的肝加欣片提取工藝穩定可靠。

3 結語

本研究運用正交試驗法優選肝加欣片提取工藝，優選的提取工藝操作簡便，切實有效，為提高肝加欣片中五味子醇甲的含量提供了新的提取方法，且經驗證該方法可用于實際生產。