蒙藥夏枯草八味丸薄層色譜鑒別研究

錫林其其格　王海榮　張文

【摘 要】 目的：建立夏枯草八味丸的薄層色譜鑒別方法，為制定其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供試驗(yàn)依據(jù)。方法：采用薄層色譜法對(duì)夏枯草八味丸處方中的夏枯草球和板藍(lán)根進(jìn)行定性鑒別。夏枯草球鑒別中以環(huán)己烷-乙酸乙酯-異丙醇-甲酸（15∶3∶3.5∶0.5，V/V）為展開(kāi)劑；板藍(lán)根的鑒別中以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（1∶1）為展開(kāi)劑。結(jié)果：在薄層色譜中均能檢出夏枯草球、板藍(lán)根的特征斑點(diǎn)。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便可靠、專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好，可作為夏枯草八味丸的定性鑒別和質(zhì)量控制的方法。

【關(guān)鍵詞】 夏枯草八味丸；薄層色譜；質(zhì)量控制

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2018）12-0011-03

Abstract：Objective To establish a Thin-Layer Chromatography（TLC）identification method of eight flavor Xiakucao-pill suppositories，and to provide experimental basis for its quality control standard. Method The TLC method is mainly applied on major ingredients of this formula including Selfheal ball， and Radix isatidis. The developing solvent for Possession of Selfheal ball is Cyclohexane - Ethyl acetate - Isopropanol sopropanol tat（15∶3∶3.5∶0.5，V/V）， for Radix isatidis is Petroleum Ether （60～90 ℃） - Ethyl Acetate（1∶1）.Results The characterised spots of Xiakucao ball， and radix isatidis were identified through TLC methodology.Conclusion TLC is a simple，reliable and specific method with good reproducilility， and recommended to be used as quality control index for eight flavor Xiakucao-pill suppositories.

Keywords：Eight Flavor Xiakucao-pill； TLC； Quality Control

蒙藥夏枯草八味丸是全國(guó)名老蒙醫(yī)專家烏氏對(duì)蒙醫(yī)學(xué)歷代文獻(xiàn)記載診治甲狀腺病的相關(guān)理論和方藥進(jìn)行系統(tǒng)研究和臨床實(shí)踐中研制出的主治甲狀腺結(jié)節(jié)的經(jīng)驗(yàn)方，其臨床療效顯著，毒副作用小，作為院內(nèi)制劑使用[1]。夏枯草八味丸由夏枯草球、沙棘、紅景天、板藍(lán)根、金腰草等8種藥材組成，具有散結(jié)、消腫、調(diào)節(jié)免疫力等功效，主治甲狀腺結(jié)節(jié)、甲狀腺腫大、乳腺增生、自身免疫性疾病等。方中的夏枯草球是主要藥材之一，具有清肝瀉火，明目，散結(jié)消腫之功效[2-4]，板藍(lán)根具有清熱解毒，涼血利咽等功效[5-7]，臨床上常用于治療發(fā)熱頭痛、肝炎、水痘、流行性感冒、咽炎等。為了控制夏枯草八味丸的質(zhì)量，建立制劑中的夏枯草球和板藍(lán)根的薄層色譜的鑒別方法，作為該制劑的質(zhì)量控制參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器 754N紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；電熱鼓風(fēng)干燥器（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；ZF-7型暗箱三用紫外線分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）；電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；硅膠G板和GF254板（青島海洋化工廠分廠）；水浴恒溫震蕩器（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）；投入式恒溫水槽NTT-2200（上海愛(ài)朗儀器有限公司）。

1.2 材料 夏枯草八味丸樣品（批號(hào)：438SW150 828、438SW150604、438SW150456）、夏枯草、板藍(lán)根等藥材均由阿拉善盟特戈熙甲狀腺病蒙醫(yī)?？漆t(yī)院提供。迷迭香酸（批號(hào)：PO5M6R3）、表告依春（批號(hào)：H29J6X1）、夏枯草球（批號(hào)：120993-201002）及板藍(lán)根對(duì)照藥材（批號(hào)：Z15O6B4550）均購(gòu)于上海源葉生物科技有限公司；甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純，水為超純水。陰性供試品由內(nèi)蒙古自治區(qū)國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院藥物實(shí)驗(yàn)室自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 夏枯草球的TLC鑒別 夏枯草球?yàn)樘幏街兄饕幬吨?，具有清肝火、散郁結(jié)等作用。參照2015版《中國(guó)藥典》一部“夏枯草”和“養(yǎng)血清腦丸”項(xiàng)下的薄層鑒別方法，以迷迭香酸對(duì)照品為對(duì)照進(jìn)行條件摸索[8]。按處方比例折算，取夏枯草8味丸粉末6 g，研細(xì)，加稀鹽酸8 mL、乙醚20 mL，加熱回流30 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取以相同工藝制備的陰性對(duì)照（缺夏枯草球）6 g，加稀鹽酸8 mL、乙醚20 mL，加熱回流30 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為陰性對(duì)照溶液。取單藥0.6 g，加稀鹽酸1 mL、乙醚20 mL，加熱回流30 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為單藥溶液。另取迷迭香酸對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述陰性對(duì)照溶液5 μL，對(duì)照藥材10 μL，單藥、供試品溶液20 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上。以環(huán)己烷-乙酸乙酯-異丙醇-甲酸（15∶3∶3.5∶0.5，V/V）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。置于紫外燈下（365 nm）檢視。

結(jié)果薄層分離效果好，被檢成分半點(diǎn)清晰，供試品色譜中在與迷迭香酸對(duì)照品、單藥色譜相應(yīng)的色譜相應(yīng)的位置（Rf值0.62）上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且同工藝同法制備的陰性對(duì)照（缺夏枯草球）色譜中在相應(yīng)的位置上未出現(xiàn)斑點(diǎn)，表明處方中其他組分對(duì)夏枯草球鑒別無(wú)干擾，具有專屬性。如圖1所示。

2.2 板藍(lán)根的TLC鑒別 板藍(lán)根也屬于處方中主要藥味之一，參照2015版《中國(guó)藥典》一部板藍(lán)根項(xiàng)下的薄層鑒別方法，以表告依春對(duì)照品為對(duì)照進(jìn)行條件摸索，按處方比例折算，取供試品4 g，以相同工藝制備的陰性對(duì)照（缺板藍(lán)根）4 g，單藥0.6 g，加80%甲醇20 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液[8]。再對(duì)表告依春對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品的溶液。按照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述陰性對(duì)照溶液、對(duì)照品溶液、單藥溶液各10 μL，供試品溶液20 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（1∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。

結(jié)果薄層分離效果好，被檢成分斑點(diǎn)清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品、對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置（Rf值0.423）上顯相同顏色的斑點(diǎn)，且同工藝同法制備的陰性對(duì)照（缺板藍(lán)根）色譜中在相應(yīng)的位置上未出現(xiàn)斑點(diǎn)，表明處方中其他組分對(duì)板藍(lán)根鑒別無(wú)干擾。3批供試品薄層色譜結(jié)果如圖2所示。

3 討論

該蒙藥復(fù)方中夏枯草球和板藍(lán)根的薄層色譜方法鑒別中，除了考察室溫25 ℃、相對(duì)濕度35%條件以外，還按確定的方法分別對(duì)其考察了在低溫（6 ℃）、低濕（相對(duì)濕度20%）條件下對(duì)薄層結(jié)果的影響，結(jié)果以上2種藥材在低溫、低濕條件下對(duì)整體分離效果無(wú)太大影響（Rf值夏枯草=0.59、Rf值板藍(lán)根=0.433）。同時(shí)，在該制劑的薄層色譜鑒別研究中均采用了陰性對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果表明，各檢出成分不受處方中其它群藥的干擾，圖譜完整。

綜上，蒙藥夏枯草八味丸中的夏枯草球和板藍(lán)根的薄層色譜具有鑒別特征。所采用的方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好，可作為夏枯草八味丸的質(zhì)量控制指標(biāo)。

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（收稿日期：2018-04-04 編輯：程鵬飛）