低咖啡因普洱茶提取物的通便功能實驗研究

樓彩霞　徐閻　周王誼　黃威 嚴家榮 饒子亮 鄺少松

【摘 要】 目的：通過小腸運動實驗和排便實驗，評價低咖啡因普洱茶提取物對實驗性便秘小鼠的通便作用。方法：通過優(yōu)化普洱茶提取工藝得到低咖啡因普洱茶提取物；將小腸運動實驗和排便實驗的各50只小鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、普洱茶提取物低（0.5 g/kg）、中（1.0 g/kg）、高（1.5 g/kg）劑量組，各5組，10只/組，連續(xù)干預14天后，采用復方地芬諾酯建立小鼠便秘模型，分別測定小腸運動實驗中的墨汁推進率，排便實驗中的首次排便時間、5 h內排黑便粒數和5h內排黑便重量。結果：與模型對照組比較，普洱茶提取物高劑量組小鼠的墨汁推進率轉換值升高（P<0.01）；普洱茶提取物低、中、高劑量組小鼠的首次排便時間縮短、5 h內排黑便粒數增多、5 h內排黑便重量加重（P<0.05或P<0.01）。結論：此低咖啡因普洱茶提取物具有促進小鼠通便的功能，具有一定的開發(fā)價值。

【關鍵詞】 低咖啡因普洱茶提取物；通便功能研究；小鼠

【中圖分類號】R285.5 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2018）08-0031-03

Abstract：Objective To objectively appraise the cathartic effect of low-caffeine Pu-erh tea extract through small intestinal movement tests and defecation tests. Methods The low-caffeine Pu-erh tea extracts were obtained by optimizing the Pu-erh teas extraction process. 100 mice （the small intestinal movement test and defecation test were fifty-fifty） were randomly divided into normal control group， model control group， Pu-erh tea extract groups with low dose （0.5g/kg）， middle dose （1.0g/kg） and high dose （1.5g/kg） respectively， 5 groups each， 10 mice in each group. After treated for 14 days， Mouse constipation models were established by compound diphenoxylate. We measured the ink propelling rates in small intestinal movement tests and the first dejection time， the grain number and total weight of black faeces within 5 hours in defecation tests respectively. Results Compared with the model control group， the small intestine movement tests showed that the ink propelling rate（converted value） of Pu-erh tea extract group with high dose were increased （P<0.01）， the defecation tests showed that the first dejection time of Pu-erh tea extract groups with three doses were shorter（P<0.01，P<0.05）， the grain number and total weight of black faeces within 5 hours were increased （P<0.01， P<0.05）. Conclusions This study suggests that the low-caffeine Pu-erh tea extracts have cathartic effect in mice.

Keywords：Low-caffeine Pu-erh Tea Extracts； Cathartic Effect； Mice

便秘是一種常見的消化系統(tǒng)疾病，雖然理論上不會增加病死率，但卻可直接降低人們的生活質量。當慢性便秘引起高血壓或者排便用力誘發(fā)急性心腦血管疾病等并發(fā)癥時，可嚴重危害患者的健康[1]。據流行病學調查，隨著人們生活方式和飲食結構的改變，伴隨精神、心理等社會因素的影響，全球便秘的發(fā)病率呈上升趨勢，我國功能性便秘的發(fā)病率約為10%～15%[2]。

普洱茶為山茶科植物普洱茶的嫩葉，味苦、甘，性寒，歸胃、肝、大腸經。普洱茶作為一種傳統(tǒng)歷史名茶，因其獨特的口感和多種保健功能深受人們喜愛。清朝藥學家趙學敏在《本草綱目拾遺》中記載：“普洱茶膏黑如漆，醒酒第一。綠色者更佳，消食化痰，清胃生津，功力尤大也”；卷六《木部》又寫道：“普洱茶膏能治百病，如肚脹，受寒，用姜湯發(fā)散，出汗即可愈。口破喉顙，受熱疼痛，用五分茶膏噙口內，過夜即愈” [3]。現代文獻記載，普洱茶具有降脂、減肥、抗腫瘤、殺菌、抗疲勞、抗氧化和預防心血管疾病等功能[4]。

本實驗的普洱茶產地是云南普洱，通過優(yōu)化普洱茶的提取工藝得到低咖啡因普洱茶提取物，主要成分組成有茶多酚、茶褐素和茶多糖等。本普洱茶提取物的特點是咖啡因含量低，普通普洱茶提取物中咖啡因的含量為7%～9%，本普洱茶提取物中咖啡因的含量為2%～4%，安全性更高[5]。實驗中，通過小鼠的小腸運動實驗和排便實驗，研究此低咖啡因普洱茶提取物對實驗性便秘小鼠的通便作用，評價其作為通便保健產品的開發(fā)價值。

1 材料和方法

1.1 實驗動物及實驗環(huán)境 SPF級BALB/c小鼠100只（小腸運動實驗50只，排便實驗50只），均為雄性，體重18～22 g，均購于廣東省醫(yī)學實驗動物中心〔SCXK（粵）2013-0002〕，實驗動物質量合格證編號44007200017304、44007200017388。所有動物實驗操作均在廣東省醫(yī)學實驗動物中心實驗設施內進行，實驗動物使用許可證號：SYXK（粵）2013-0002。

1.2 藥品與試劑 低咖啡因普洱茶提取物粉末（批號：20130926，云南天士力帝泊洱生物茶集團有限公司）；復方地芬諾酯片（批號：12030401，河南鼎昌藥業(yè)有限公司）；阿拉伯樹膠（批號：20101119，天津市大茂化學試劑廠）；活性炭（批號：20100611，茂名市鴻生活性炭廠）；屈臣氏蒸餾水（批號20150104，廣州屈臣氏食品飲料有限公司）。

1.3 儀器 JEA3001型電子天平（精度：0.1 g，上海浦春計器有限公司）；BS223S電子天平（精度：0.001 g，德國sartorius公司）；YP3001N電子天平（精度0.1 g，上海精密科學儀器有限公司）。

1.4 低咖啡因普洱茶提取物的提取工藝[5] 取適量的普洱熟茶和生茶，分別加10倍水80 ℃提取2次，每次1 h，過濾，茶渣再加入8倍量的水，80 ℃提取0.5 h，過濾，合并提取液，過300目濾布，濾液減壓真空濃縮，離心，分別得到熟茶上清液和生茶上清液。取熟茶上清液，加入95%乙醇，醇沉，過夜離心，加水復溶，離心，得上清，噴霧干燥，得到熟茶提取物；取生茶上清液，噴霧干燥得到生茶提取物。熟茶提取物和生茶提取物以4∶1比例混合均勻，得到本次實驗所用普洱茶終提取物。

1.5 分組和干預方法 將小腸運動實驗和排便實驗的各50只小鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、普洱茶提取物低、中、高劑量組，各5組，10只/組。以人體推薦量的10倍、20倍和30倍作為普洱茶提取物低（0.5 g/kg BW）、中（1.0 g/kg BW）、高（1.5 g/kg BW）劑量組，正常對照組和模型對照組給予蒸餾水。各組動物分別給予相應的藥物，按照0.2 mL/10 g的劑量灌胃給藥，連續(xù)14 d。本實驗所有動物實驗操作均經過廣東省醫(yī)學實驗動物中心實驗動物倫理委員會批準。

1.6 模型建立和墨汁給予方法[6] 各組動物灌胃14 d 后禁食16 h，除正常對照組給蒸餾水外，其余各組均灌胃給予復方地芬諾酯（小腸運動實驗劑量為5 mg/kg BW，排便實驗劑量為10 mg/kg BW）建立實驗性便秘小鼠模型。給予復方地芬諾酯0.5 h后，各劑量組分別給予含相應樣品的墨汁（以墨汁作溶劑），動物均單籠飼養(yǎng)，正常飲水進食。正常對照組和模型對照組給予墨汁灌胃，墨汁按照0.2 mL/10 g BW給予。

1.7 指標檢測方法

1.7.1 小腸運動實驗 給予墨汁25 min 后頸椎脫臼處死動物，測量小腸總長度，計算墨汁推進率。

墨汁推進率（%）= 墨汁推進長度（從幽門至墨汁前沿）/小腸總長度（幽門至回盲部）×100%。

1.7.2 排便實驗 從灌墨汁開始，記錄每只動物首粒排黑便時間，5 h內排黑便粒數及重量。

1.8 數據處理及結果判定方法 墨汁推進率經數據轉換（X=Sin-1P，P為墨汁推進率，用小數表示）后進行統(tǒng)計分析。計量資料采用SPSS 13.0進行單因素方差分析，以均數±標準差（x±s）表示，組間兩兩比較采用LSD檢驗方法，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。數據處理和結果判定參照《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》（2003版）通便功能檢驗方法[6]進行。

2 結果

2.1 墨汁推進率（數據轉換后進行統(tǒng)計） 與正常對照組比較，模型對照組小鼠的墨汁推進率轉換值降低（P<0.01），提示模型建立成功。與模型對照組比較，普洱茶提取物低、中劑量組小鼠的墨汁推進率轉換值未見統(tǒng)計學差異（P>0.05），普洱茶提取物高劑量組小鼠的墨汁推進率轉換值升高（P<0.01）。見表1。

2.2 首次排黑便所需時間、5 h內排黑便粒數和5 h內排黑便重量 與正常對照組比較，模型對照組小鼠的首次排黑便時間延長、5 h內排黑便粒數和重量均減少（P<0.01）；與模型對照組比較，普洱茶提取物低、中、高劑量組小鼠的首次排便時間縮短、5 h內排黑便粒數增多和黑便重量加重（P<0.05或P<0.01）。見表2。

3 討論

從實驗結果可以看出，本實驗的低咖啡因普洱茶提取物可以增加小鼠小腸運動實驗中的墨汁推進率、縮短小鼠排便實驗中的首次排便時間、增多5h內排黑便粒數和增加5 h內排黑便重量，具有促進小鼠通便的功能。

對于便秘的治療，西醫(yī)學主要有灌腸、口服和外用西藥等的方法，中醫(yī)學主要有口服中藥、針灸治療、推拿按摩等方法[7]。美國結腸和直腸外科醫(yī)師學會（ASCRS）在2016年《臨床實踐指南：便秘的評估和管理》中提出：便秘最初的治療是飲食調整，包括水和膳食纖維的補充[8-9]。所以預防和治療慢性便秘除了飲食調配和常用的藥物治療外，飲用具有通便功能的茶類保健品，也是一種較好的選擇，日常調理方便且易于堅持。

本普洱茶提取物具有低咖啡因的特點。茶中含有的咖啡因對大腦有興奮作用，對心臟有一定的刺激作用，它可以導致神經細胞活動增高，引起心跳加快、血壓增高等副作用[5]。本普洱茶提取物通過優(yōu)化提取工藝，有效地降低了咖啡因的含量，具有輔助小鼠通便的功能，具有一定的開發(fā)價值。對于通便的作用機理，還需后續(xù)進一步研究。

參考文獻

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[3]云南天士力帝泊洱生物茶集團有限公司.一種普洱茶提取物在制備調節(jié)腸道菌群及通便的藥物或食品中的應用：中國，CN201310295829.4[P]. 2015-01-21.

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[5]云南天士力帝泊洱生物茶集團有限公司.一種低因茶粉及其制備方法：中國， CN201210019755.7[P]. 2013-07-31.

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[9]劉曉峰.慢性便秘非手術治療的進展[J].中華消化病與影像雜志，2017，7（2）：49-52.

（收稿日期：2018-03-08 編輯：劉 斌）