片劑藥物溶解方法對含量測定結果的影響

南 灃，王 影，張 丹，米 欣

（陜西省商洛市藥品檢驗所，陜西 商洛 726000）

在藥品檢驗中，一般要對固體制劑進行預處理，即將藥品待測成分溶解出來，處理中常常提到“振搖使溶解”[1]，表述含糊不清。不同的實驗人員會選擇不同的溶解方法，通常采用超聲處理、手動振搖與調速震蕩3種方法[2－5]。超聲處理法（1 法）是指用頻率為 20～50 kHz的電磁波處理樣品，能讓樣品和溶劑產生聲波空化作用，在氣泡形成、體積增大且破裂的過程中，樣品能充分擴散到溶劑中，均勻分布，從而達到充分溶解樣品的作用，且不影響大多數藥物有效成分的生理活性[6－11]。調速震蕩法（2法）是振蕩頻率為0～320 r/min，振幅為20 mm，電機功率為60 W，具有受力均勻、節省能源、操作簡便、噪音小的優點。手動振搖法（3法）是指通過用手的振動充分搖勻，能使樣品充分溶解而不破壞樣品，使有效成分分離出來的溶解方法。本研究中探討了藥品檢驗時3種藥物溶解方法對樣品含量測定結果的影響，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV－2600型紫外分光光度計（日本島津有限公司）；BT125D型電子分析天平（賽多利斯科學儀器公司）；AS7240A型超聲溶解儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；HY－2型調速多用振動儀（國華電器有限公司）；1260型高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）；1HP－10－H型實驗用超純水機（重慶力德高端水處理設備研發有限公司）。

1.2 試藥

鹽酸二甲雙胍對照品（批號為1000664－201203，含量 100.0%），硝苯地平對照品（批號為 100338－201104，含 量 99.9% ），氫 氯 噻 嗪對 照 品 （批 號 為100309 －201204，含量 99.7%），均購于中國食品藥品檢定研究院；鹽酸二甲雙胍片（規格為每片0.25 g），維生素B1片（規格為每片10 mg），硝苯地平片（規格為每片10 mg），氫氯噻嗪片（規格為每片25 mg），廠家與批號見表 1；甲醇（色譜純，批號為 34860－4L－R），乙腈（色譜純，批號為 34851－4L），均購于 Sigma－Aldrich公司；鹽酸（分析純，四川西隴化工有限公司，批號為150608）；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 樣品處理及含量測定方法[1]

鹽酸二甲雙胍片：精密稱取樣品（批號分別為C0120160510，C0120151219，160326），分別置 100 mL容量瓶中，加水適量，超聲使鹽酸二甲雙胍溶解，用水稀釋至刻度，精密量取續濾液1 mL，置200 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液A。另精密稱取鹽酸二甲雙胍對照品，加水溶解并定量稀釋成每1 mL約含5 μg的對照品溶液。照紫外－可見分光光度法（藥典通則0401），在233 nm波長處測定吸光度。

維生素B1片：精密稱取樣品（批號分別為170305，G161101，170102），分別置 100 mL 容量瓶中，加鹽酸溶液（9→1 000）約 70 mL，使溶解，精密量取 5 mL，置100 mL容量瓶中，用上述溶液稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液B。照紫外－可見分光光度法（藥典通則0401）在246 nm波長處測定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系數為421計算。

硝苯地平片：避光操作，精密稱取樣品（批號分別為120803，C120903，130403），分別置 50 mL 容量瓶中，加甲醇適量，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取5 mL置50 mL容量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液C。另取硝苯地平對照品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋成每1 mL約含20 μg的對照品溶液。照高效液相色譜法（藥典通則0512）測定硝苯地平含量。

氫氯噻嗪片：精密稱取樣品（批號分別為B130304，13011412，130301），分別置100 mL容量瓶中，加甲醇－乙腈（1 ∶1）5 mL，振搖，加流動相 20 mL，超聲使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取續濾液5 mL，置20 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液D。另取氫氯噻嗪對照品，同法制備對照品溶液，同法測定。照高效液相色譜法（藥典通則0512）測定氫氯噻嗪含量。

2.2 高效液相色譜法色譜條件

2.2.1 硝苯地平片

色譜柱：C18柱（250 mm ×4.6 mm，10 nm/5 μm）；流動相：甲醇 －水（60 ∶40）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：235nm；柱溫：30 ℃；進樣量：20 μL。色譜圖見圖 1。

2.2.2 氫氯噻嗪片

色譜柱：C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.1 mol/L磷酸鈉二氫鈉（用磷酸調節pH至3.0）－乙腈（9 ∶1）；流速：1.5 mL/min；檢測波長：271 nm；柱溫：30℃；進樣量：10μL。色譜圖見圖 1。

2.3 藥物溶解時間

本試驗對前處理時間進行了考察。供試品溶液A和供試品溶液B經3種方法各處理溶解15 min，供試品溶液C經3種方法各處理溶解10min，供試品溶液D經3種方法各處理溶解5min。

2.4 含量測定結果

結果見表1。其中，鹽酸二甲雙胍片、維生素B1片、硝苯地平片、氫氯噻嗪片標準規定含量分別為95.0%～105.0%，90.0% ～110.0%，90.0% ～110.0%，93.0% ～107.0%。

3 討論

3.1 溶解因素分析

試驗結果表明，溶解樣品方法的選擇對含量測定結果有一定影響，鹽酸二甲雙胍片和維生素B1片采用紫外可見分光光度法，氫氯噻嗪片和硝苯地平片采用高效液相色譜法，結果含量測定結果為1法＞2法＞3法，表明超聲處理法溶解樣品效果最好，含量測定結果較高。

圖1 高效液相色譜圖

表1 3種方法含量測定結果（%）

3.2 溶解方法比較[4-15]

超聲處理法是利用超聲波，將原本是大分子的藥物通過物理方法將其打散，然后再將藥物聚在一起，使其成為小顆粒，比表面積呈幾何倍數增大，溶解速率較快，純物理方法不會改變原來的溶解度，只是加速溶解，可縮短幾倍甚至幾十倍的時間。調速振動法是通過調節調速震蕩儀的速度和頻率在連續往復振蕩工作中平穩可靠，上下振蕩、左右振蕩、回旋振蕩使樣品充分溶解并混合均勻，具有操作簡便、噪音小、受力均勻，節省能源的優點。手動振搖法是通過手動振搖將藥物溶解，雖操作簡單，但對于本身較難溶解的藥物，溶出量相對有限，存在費時費力、溶解效率低、易漏液、振搖速度不均勻等缺點。

3.3 建議

超聲處理法作為樣品檢測前處理方法，可大大加快溶出速率，使溶液在短時間內達到飽和，不僅提高了藥物有效成分的提取率，更能均勻地溶解待測樣品，具有安全高效、溶解快速、混合均勻的特點。故建議，若無特殊規定，可采用超聲處理法進行樣品溶解。