P53及RasP21蛋白在胃癌組織中的表達及其臨床意義

周紅林，岳文彬，李偉芳，金 靜，段叢迪 (濮陽市油田總醫院腫瘤二科，河南 濮陽 457000)

胃癌的發生、發展是在多種致癌因子的協同作用下，多基因變異逐漸累積而成，明確各種致癌因子的作用機制和相互之間的關系對于探索胃癌的形成并阻斷其遠處轉移有重要意義[1]，P53、RasP21基因一直是臨床探究腫瘤發生、發展過程中的研究重點，本研究旨在通過檢測分析P53、RasP21基因在胃癌組織中的表達水平，判定兩者在胃癌發展過程中的意義，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料選取我院2014年至2016年行手術切除的胃癌組織石蠟標本30例，其中男18例，女12例；年齡35～78(55.0±5.0)歲；低分化癌15例，中分化癌7例，高分化癌8例。另選取20例正常胃黏膜組織標本作為對照，其中男12例，女8例；年齡35～78(55.0±5.0)歲。

1.2方法使用EnVision免疫組化染色法檢測P53及RasP21蛋白在20例正常胃黏膜和30例胃癌組織中的表達水平，其中抗原組織修復液為檸檬酸鹽緩沖液(pH=6.0)，一抗選擇鼠抗人P53單克隆抗體及RasP21單克隆抗體，二抗為羊抗鼠FITC-IgG，工作液濃度1100。

1.3結果判斷根據每張切片的陽性細胞數比例和著色深淺計分進行判斷，不著色為0分，淺棕色為1分，棕色為2分，深棕色為3分，陽性細胞百分比<10%為0分，10%～<25%為1分，25%～<50%為2分，50%～<75%為3分，≥75%為4分，最終結果為2項結果之和，≤1分為陰性，2～3分為弱陽性，4～5分為陽性，>5分為強陽性[2]。

1.4統計學處理采用SPSS 15.0進行統計分析，計數資料以百分數表示，比較用χ2檢驗，相關性分析用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05。

2 結果

正常胃黏膜組織中P53、RasP21蛋白表達均為陰性(0.0%和0.0%)，明顯低于胃癌組織中的陽性表達率(83.3%、70.0%，P<0.05)。胃癌組織中P53、RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。胃癌組織中P53蛋白表達與RasP21蛋白表達呈正相關關系(r=0.801，P<0.05)。見表1。

表1 不同胃組織中P53、RasP21蛋白陽性表達率比較 n(%)

3 討論

RasP21蛋白是具有廣泛抑制活性酶的細胞周期抑制蛋白，在細胞周期中具有雙重的抑制作用，在正常組織中，只存在少量激活狀態的RasP21蛋白，維持細胞的正常分化，當Ras發生突變時可使基因活化導致其產物P21蛋白表達過量[3-4]，在人類的多種腫瘤組織中均發現Ras基因的突變及P21蛋白的高表達，經臨床大量研究[5-6]證實Ras基因的突變與腫瘤的發生有密切關系，且Ras基因的表達強度與腫瘤的分化程度和腫瘤生長有關，胃癌的發生、發展與Ras發生突變后形成P21蛋白有密切關系。Kim等[7]的研究表明P21蛋白的表達與胃癌的遠處轉移呈正相關。

本研究結果顯示，正常胃黏膜組織中RasP21蛋白表達為陰性，明顯低于胃癌組織(P<0.05)。胃癌組織中RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。這證實了RasP21蛋白的表達可作為判斷胃癌分化程度的一個重要指標。

P53基因是一種抑癌基因，可通過抑制細胞的增殖參與細胞周期的調節，當P53蛋白發生基因突變時使其失去了對DNA的親和力，細胞抑制能力下降，失去了抗腫瘤活性，因此，P53突變與腫瘤的形成密切相關[8]。臨床研究[9-10]證實突變型P53蛋白的表達與胃癌的分化、轉移和浸潤等生物學行為有關，腫瘤的惡化程度越高，P53蛋白的表達水平就越高。本研究結果顯示，正常胃黏膜組織中RasP21蛋白表達為陰性，明顯低于胃癌組織(P<0.05)。胃癌組織中RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。這也再次證明了上述觀點。

本研究結果還顯示，胃癌組織中P53蛋白表達與RasP21蛋白表達呈正相關關系(r=0.801，P<0.05)。這與張宏等[6]的研究結果一致，經分析原因可能是P53基因與RasP21基因具有相互調節的作用。本研究證實P53及RasP21蛋白在胃癌組織中高表達，與腫瘤的分化程度有關，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高，且兩者在胃癌組織中有共同表達現象，提示兩者與胃癌的分級和分期相關，推測RasP21蛋白可通過作用于P53來促進腫瘤的發生、發展，當然，兩者的內在聯系需要進一步證實。