異檸檬酸脫氫酶1在大腦膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)的意義

劉晉發(fā)，朱文標(biāo)，謝壽城，陳紀(jì)歡，郭維新

(1.梅州市人民醫(yī)院病理科，廣東 梅州 514031；2. 梅州市人民醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 梅州 514031；3. 梅州市人民醫(yī)院化療科，廣東 梅州 514031)

神經(jīng)上皮腫瘤是屬于最為常見的腦腫瘤之一，且發(fā)病逐漸年輕化，青少年發(fā)病率有顯著增高趨勢[1-2]。手術(shù)治療是其重要治療手段，術(shù)后根據(jù)患者病情，予以不同方式的放、化療。惡性腫瘤發(fā)生以及發(fā)展是屬于復(fù)雜過程，具有多因素、多步驟以及階段性，不僅與其中基因表達(dá)以及調(diào)控方式變異有關(guān)，同時還涉及多種分子調(diào)節(jié)作用。而異檸檬酸脫氫酶(isocitrate dehydrogenase 1，IDH1)編碼基因是屬于近年來膠質(zhì)瘤最早發(fā)生突變的基因。其主要突變發(fā)生于低級別膠質(zhì)瘤以及繼發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，突發(fā)率較高，目前尚未在其他腫瘤中發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)膠質(zhì)瘤基因是國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)問題[3-4]。本文就IDH1對腦膠質(zhì)瘤表達(dá)臨床意義進(jìn)行探究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選取我院2015年12月至2017年9月收治的30例大腦膠質(zhì)瘤患者，其中男21例，女9例；年齡8～67(48.7±3.7)歲；毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤(Ⅰ級)1例，星形細(xì)胞瘤(Ⅱ級)6例，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤(Ⅱ級)4例，間變型少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤(Ⅲ級)10例，原發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(Ⅳ級)9例，其中Ⅰ～Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤11例，Ⅲ～Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤19例。另選取尸解正常腦組織30例作為對照。3組一般資料比較差異無意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法采用免疫組化法對腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織中IDH1蛋白進(jìn)行檢測，IDH1 R132H鼠抗人單克隆抗體(濃縮型150)購自福州邁新生物技術(shù)有限公司；IDH1突變檢測標(biāo)本采用EDTA抗原修復(fù)液(pH=9.0)及檸檬酸緩沖液(pH=6.0)進(jìn)行高溫高壓抗原修復(fù)；標(biāo)本用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%中性多聚甲醛固定，常規(guī)取材、脫水、石蠟包埋組織切片，采用EnVision二步法免疫組化染色，所用儀器為德國LEICA公司LEICA BOND-MAX全自動免疫組化染色儀。以正常尸解腦組織作為陰性對照，以已知膠質(zhì)瘤IDH1突變陽性切片作為陽性對照。

1.3結(jié)果判斷染色結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為每張切片40倍物鏡下選取5個標(biāo)準(zhǔn)視野進(jìn)行觀察，IDH1突變蛋白表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)，腫瘤視野中出現(xiàn)任意數(shù)量的棕褐色染色細(xì)胞均被視為陽性突變。

2 結(jié)果

Ⅰ～Ⅱ級膠質(zhì)瘤組織、Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤組織中IDH1表達(dá)高于正常腦組織，Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤組織中IDH1表達(dá)高于Ⅰ～Ⅱ級膠質(zhì)瘤組織，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1 IDH1在不同腦組織中的表達(dá)

3 討論

腦神經(jīng)系統(tǒng)中最為常見的腦部腫瘤為腦膠質(zhì)瘤，現(xiàn)臨床上能夠有效控制疾病發(fā)展，改善患者預(yù)后狀況，但是由于其治療預(yù)后效果并不理想，仍然是屬于危害人類健康的疾病之一。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在腦部腫瘤細(xì)胞中會存在一部分可以自我更新、無限增殖，并且能夠多向分化的干細(xì)胞樣腫瘤細(xì)胞，被稱之為腫瘤干細(xì)胞[5-6]。而存在腦部膠質(zhì)瘤中，被稱之為腦腫瘤干細(xì)胞。IDH基因在腫瘤干細(xì)胞增殖過程中發(fā)揮著重要作用，在腦膠質(zhì)瘤中可以發(fā)現(xiàn)IDH1改變。并且有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，IDH1改變是處于疾病早期，在其疾病發(fā)病機(jī)制中起著重要臨床意義[7-8]。

而IDH在三羧酸循環(huán)中起著重要作用，由于此類氧化生成中間產(chǎn)物草酰琥玻酸，可以進(jìn)一步氧化脫羧能夠生成α酮戊二酸，兩者可以在能量產(chǎn)生以及合成代謝中起著重要作用，這些酶活性調(diào)節(jié)能夠直接參與不同生物通路，并發(fā)揮著不同生物功能。因此，IDH在生命體中廣泛分布。人類基因中共存在5種IDH基因編碼，并且存在不同的IDH酶。

本文研究表明，Ⅰ～Ⅱ級膠質(zhì)瘤組織、Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤組織中IDH1表達(dá)高于正常腦組織，Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤組織中IDH1表達(dá)高于Ⅰ～Ⅱ級膠質(zhì)瘤組織。隨著臨床上疾病病理級別不斷升高，腫瘤內(nèi)為腦腫瘤干細(xì)胞水平比例升高，這也是高病理級別膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有較高增殖能力以及侵襲能力的原因。腦膠質(zhì)瘤是成人腦部腫瘤中最為常見的一類，但是臨床上對于此類疾病發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。隨著腫瘤惡性程度的不斷提高，其IDH1水平也在不斷提高，兩者之間聯(lián)系密切。腦部IDH1變異基因能夠有效降低活性，但是并不能確定IDH1是酶蛋白含量的決定性因素，說明腫瘤組織在IDH1基因表達(dá)中具有較為復(fù)雜調(diào)控機(jī)制存在[9-10]。

綜上所述，IDH1可以作為人腫瘤基因測序中發(fā)現(xiàn)并證實的腫瘤發(fā)生相關(guān)基因，具有重要應(yīng)用潛力，而IDH1突變與腦膠質(zhì)瘤發(fā)生之間存在密切關(guān)系，能提高對腦膠質(zhì)瘤發(fā)生機(jī)制的認(rèn)識，為患者治療提供支持。