腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-二聚體聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的早期診斷價(jià)值

孫洪帥，朱 華，高海燕，萬(wàn)廣財(cái)，于秀艷

(吉林省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130012)

非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)占肺癌總數(shù)的80%～85%[1]，常見(jiàn)的病理類型包括腺狀細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌和大細(xì)胞癌。目前NSCLC主要通過(guò)低劑量肺部螺旋CT、纖維支氣管鏡和肺部病理活檢等檢查確診，但其起病隱匿，多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已為晚期，失去了手術(shù)切除的機(jī)會(huì)，如不治療，中位生存時(shí)間僅4～5個(gè)月[2]。因此，NSCLC的早期發(fā)現(xiàn)對(duì)于延長(zhǎng)患者的生存期至關(guān)重要。腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤發(fā)生過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞合成、分泌或脫落到體液或組織中并與腫瘤密切相關(guān)的活性物質(zhì)[3-11]。吳園園等[12]報(bào)道了利用腫瘤標(biāo)志物來(lái)輔助診斷肺癌。曹耿磊[13]也報(bào)道了腫瘤標(biāo)志物在肺部腫瘤臨床研究中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，其可以用于NSCLC早期診斷。本實(shí)驗(yàn)選取靈敏度與特異度相對(duì)較高的腫瘤標(biāo)志物[鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag)[14-15]、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)[16]、細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1)][17]來(lái)輔助診斷NSCLC。最近，有關(guān)D-二聚體(D-D)與NSCLC之間關(guān)系的研究逐漸受到重視，蔡文慧等[18]研究發(fā)現(xiàn)：在NSCLC患者中，D-D有升高的趨勢(shì)。國(guó)內(nèi)外關(guān)于NSCLC早期診斷的研究相對(duì)較少，本研究選取腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合診斷NSCLC，以期為NSCLC的早期診斷提供一種確實(shí)有效的方法。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2013年6月—2017年9月于本院就診的NSCLC患者(200例，NSCLC組)、肺部良性病變患者(198例，肺部良性病變組)和健康體檢者(196名，對(duì)照組)作為研究對(duì)象。NSCLC患者由病理學(xué)或組織學(xué)診斷確診，肺部良性病變患者由低劑量肺部螺旋CT和纖維支氣管鏡等方法綜合診斷。排除標(biāo)準(zhǔn)：①腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D未同時(shí)檢測(cè)的患者；②接受過(guò)NSCLC系統(tǒng)治療的患者；③既往有其他部位惡性腫瘤病史患者；④伴有肝硬化、充血性心力衰竭和腎病綜合征的患者；⑤在測(cè)量腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1與D-D之前，攝入了高劑量利尿劑的患者。

1.2 分組和檢測(cè)方法 將研究對(duì)象分為NSCLC組、肺部良性病變組(肺結(jié)核瘤、肺錯(cuò)構(gòu)瘤和肺炎性假瘤等)和對(duì)照組，收集每組患者的基線信息。采用雅培ARCHITECT i2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀及原裝配套試劑測(cè)定SCC-Ag、CEA和CYFRA21-1水平，采用ACL(TOP700)全自動(dòng)凝血分析儀及原裝配套試劑測(cè)定D-D水平。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，以CEA>5 μg·L-1、SCC-Ag>5 μg·L-1、CYFRA21-1>5 μg·L-1和D-D>5 00 μg·L-1判定為陽(yáng)性，聯(lián)合檢測(cè)時(shí)若有1個(gè)及1個(gè)以上指標(biāo)陽(yáng)性則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性。在前期臨床工作中本文作者發(fā)現(xiàn)NSCLC組患者腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平高于肺部良性病變組和對(duì)照組，因此，本研究采用腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合檢測(cè)NSCLC，從而放大NSCLC的檢出率；對(duì)檢測(cè)結(jié)果作圖繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)，計(jì)算曲線下面積(AUC)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，ROC曲線繪制采用MedCalc 15.0軟件。各組研究對(duì)象年齡比較采用單因素方差分析，各組性別構(gòu)成比比較采用χ2檢驗(yàn)。對(duì)于不滿足正態(tài)分布的SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平比較采用秩和檢驗(yàn)，兩個(gè)獨(dú)立樣本間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，多個(gè)獨(dú)立樣本比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-willsH檢驗(yàn)。采用ROC曲線比較4種標(biāo)志物與4種標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能，并計(jì)算ROC的AUC、靈敏度和特異度。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組研究對(duì)象一般資料 NSCLC組200例，其中男性108例，女性92例，中位年齡63歲(41～78歲)。肺部良性病變組198例，其中男性98例，女性100例，中位年齡59歲(31～81歲)。對(duì)照組196名，其中男性100名，女性96名，中位年齡60歲(36～80歲)。研究對(duì)象年齡和性別構(gòu)成比比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.426，P=0.311)，具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 各組研究對(duì)象基線信息

2.2 各組研究對(duì)象腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 由于NSCLC組、肺部良性病變組和對(duì)照組研究對(duì)象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平均呈非正態(tài)分布(P<0.01)，因此3組間比較采用Kruskale-WallisH秩和檢驗(yàn)。結(jié)果顯示：NSCLC組患者SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平明顯高于肺部良性病變組和對(duì)照組 (P<0.01)，而肺部良性病變組與對(duì)照組研究對(duì)象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1及D-D水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PSCC-Ag=0.312,PCEA=0.780，PCYFRA21-1=0.379，PD-D=0.313)。見(jiàn)表2。

表2 各組研究對(duì)象SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平

Pvalue was obtained using Kruskale-WallisHtest;*P<0.05vscontrol group;△P<0.05vsbenign lung disease group.

2.3 不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 肺腺癌患者CEA水平明顯高于肺鱗癌患者(P=0.005)，肺鱗癌患者SCC-Ag和CYFRA21-1水平明顯高于肺腺癌患者(P=0.008，P=0.004)，而不同病理類型NSCLC患者D-D水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.923)。見(jiàn)表3。

表3 不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平

Pvalue was obtained using Mann-WhitneyUtest.

2.4 不同疾病分期NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平 Ⅲ-Ⅳ期患者CEA、CYFRA21-1和D-D水平明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者 (P<0.05)，而Ⅲ-Ⅳ期患者SCC-Ag水平與Ⅰ-Ⅱ期患者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表4。

表4 不同疾病分期NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物和D-D水平

Pvalue was obtained using Mann-WhitneyUtest.

2.5 ROC曲線分析腫瘤標(biāo)志物及D-D水平對(duì)NSCLC的診斷價(jià)值 腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平及4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在NSCLC診斷中的AUC分別為0.805、0.728、0.746、0.778和0.933，與對(duì)照組(AUC=0.5)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)圖1。單項(xiàng)檢測(cè)中，SCC-Ag的AUC高于其他單項(xiàng)指標(biāo)，其靈敏度和特異度分別為85.42%和4.21%。4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能均優(yōu)于各單項(xiàng)檢測(cè) (AUC=0.933)，其靈敏度和特異度分別為86.46%和88.42%。見(jiàn)表4。

表5 ROC曲線分析各腫瘤標(biāo)志物和D-D水平對(duì)NSCLC的診斷價(jià)值

AUC: Area under curve；PV+: Positive predict value；PV-: Negative predict value; YI: Youden index.

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圖1 腫瘤標(biāo)志物和D-D水平在NSCLC診斷中的ROC曲線

Fig.1 ROC of levels of tumor markers and D-D in diagnosis of NSCLC

3 討 論

腫瘤標(biāo)志物是腫瘤組織在發(fā)生發(fā)展過(guò)程中釋放的微量物質(zhì)，在惡性腫瘤中呈高表達(dá)，其可用于腫瘤的早期診斷。此外，惡性腫瘤還可使NSCLC患者血液呈高凝狀態(tài)， 繼而D-D水平在NSCLC患者血液中相應(yīng)升高，且D-D水平升高程度與病情的嚴(yán)重程度有關(guān)聯(lián)，因此，研究腫瘤標(biāo)志物和D-D水平與NSCLC的相關(guān)性對(duì)早期診斷NSCLC具有重要意義。

SCC-Ag是從宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者中分離、提純出的一種糖蛋白，廣泛存在于惡性腫瘤的上皮細(xì)胞中。研究[13]表明：SCC-Ag是檢測(cè)NSCLC特異性較高的指標(biāo)。CEA是一種酸性糖蛋白，編碼基因位于19號(hào)染色體上，為胚胎性癌抗原，國(guó)內(nèi)外均有證實(shí)，CEA在多數(shù)NSCLC患者血液中呈高水平表達(dá)。

CYFRA21-1屬于細(xì)胞角蛋白家族，當(dāng)腫瘤細(xì)胞破壞或死亡時(shí)大量可溶性的細(xì)胞角蛋白19片段釋放入血，使其在血液中的水平明顯升高，其為NSCLC特異性最好的腫瘤標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示：腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平在NSCLC組患者中明顯升高，而肺部良性病變組和對(duì)照組研究對(duì)象各腫瘤標(biāo)志物和D-D水平較低，說(shuō)明腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平對(duì)NSCLC早期診斷具有一定的臨床價(jià)值。許利芳等[19]研究表明：腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1和SCC-Ag對(duì)NSCLC診斷和預(yù)后評(píng)估具有重要的臨床價(jià)值。不同病理類型NSCLC患者腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D水平不同，考慮肺鱗癌時(shí)優(yōu)先選擇檢測(cè)SCC-Ag和CYFRA21-1，考慮肺腺癌時(shí)優(yōu)先選擇檢測(cè)CEA。曹耿磊[13]報(bào)道：CEA在腺癌中的水平高于鱗癌，SCC-Ag在鱗癌的水平高于腺癌，其結(jié)論與本研究結(jié)果一致。隨著NSCLC分期越高，患者腫瘤標(biāo)志物CEA、CYFRA21-1和D-D水平升高越明顯，提示可根據(jù)腫瘤標(biāo)志物及D-D表達(dá)水平來(lái)評(píng)估NSCLC患者的預(yù)后，與許利芳等[19]研究結(jié)果一致。本研究ROC曲線結(jié)果顯示：?jiǎn)蝹€(gè)指標(biāo)SCC-Ag在NSCLC診斷效能最高，AUC為0.805，靈敏度為85.42%；而4項(xiàng)聯(lián)合指標(biāo)AUC為0.933，靈敏度為86.46%；4項(xiàng)聯(lián)合指標(biāo)AUC高于SCC-Ag(0.128)，靈敏度高于SCC-Ag(1.02%)，說(shuō)明4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能大大優(yōu)于單項(xiàng)指標(biāo)。

綜上所述，CEA是診斷肺腺癌較理想的指標(biāo)，SCC-Ag和CYFRA21-1是診斷肺鱗癌較理想的指標(biāo)；CEA、CYFRA21-1和D-D檢測(cè)值大小與NSCLC的分期有關(guān)；腫瘤標(biāo)志物SCC-Ag、CEA、CYFRA21-1和D-D聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC的診斷效能和靈敏度最高，本研究與許利芳等[19]結(jié)果比較，具有更高的診斷靈敏度與特異度，從而為早期無(wú)創(chuàng)性診斷NSCLC提供了一種確實(shí)有效的方法。