慢性蕁麻疹患者細胞免疫功能檢測及其臨床意義(附68例報告)

閆天懿，安 林，李 萍，賈玉璽

(1.吉林大學中日聯誼醫院風濕免疫科，吉林 長春 130033； 2.吉林大學中日聯誼醫院皮膚科，吉林 長春 130033)

慢性蕁麻疹是臨床上常見的疾病，其病因及發病機制復雜,與多種內外因素相關，如食物、藥物、吸入物、物理因素及系統疾病等均可能是蕁麻疹的誘發因素[1-3]。由于該病缺乏有效的治療手段，嚴重影響患者的生活質量，近年來，關于蕁麻疹發生機制及治療研究已成為國內外學者的研究熱點。既往研究[4-6]表明:蕁麻疹的發生不僅與IgE介導的體液免疫有關，也有細胞免疫的參與，蕁麻疹與Th17/Th1細胞和Tc17/Tc1比例失調相關[4]，但目前有關伴有并發癥的慢性蕁麻疹患者CD4+T、CD8+T和CD3+T淋巴細胞的數量及比例的研究尚未見國內外文獻報道。為進一步探討T淋巴細胞在慢性蕁麻疹發病機制中的作用，闡明慢性蕁麻疹發生的免疫學機制，本文作者采用流式細胞術檢測分析68例慢性蕁麻疹患者外周血T淋巴細胞亞群的表達情況，并進一步研究伴有不同并發癥慢性蕁麻疹患者外周血 T淋巴細胞亞群的改變情況。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇本院2017年1—2 月68例慢性蕁麻疹門診患者作為研究對象。慢性蕁麻疹納入標準：①皮膚突然出現大小不等、形狀不一的風團，境界清楚，皮疹此起彼伏，伴瘙癢，消退后不留痕跡，反復發作 6 周以上；②年齡 18 歲以上，符合慢性蕁麻疹診斷標準[7]。排除標準：①妊娠、哺乳期婦女；②物理性蕁麻疹及特殊類型蕁麻疹；③過去1個月內應用抗組胺藥物、免疫調節劑或糖皮質激素的患者。68例患者中，男性 30例，女性 38例；年齡18～79歲，平均年齡(51.7±6.34)歲，病程2月～12年，平均病程(31.6±15.4)個月。并發自身免疫性疾病11例(類風濕3例、紅斑狼瘡2例、甲狀腺疾病4例、白癜風2例)，并發幽門螺旋桿菌感染13例，并發乙肝和丙肝感染10例，并發腫瘤6例，無并發癥患者28例。對照組為健康體檢者 70名，其中男性32名，女性 38名；年齡20～76歲，平均年齡(49.9±5.99)歲。2組研究對象年齡和性別構成比等基本資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究已通過吉林大學中日聯誼醫院倫理委員會審批且所有受試者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2 試劑和主要儀器 CD3、CD4和CD8細胞試劑購自美國 BD 公司。Cytomics FC500流式細胞儀為美 國 Becton Dickinson 公司產品，LD4-2A(I)型離心機為北京京立公司產品。

1.3 流式細胞術檢測患者外周血T淋巴細胞亞群 采集各組研究對象外周血(肝素抗凝)2 mL,檢測方法嚴格按試劑說明書操作，分離淋巴細胞, 采用 MultiSET 軟件上機，檢測CD4+T、CD8+T和CD3+T淋巴細胞的數量及比例，計算CD4+/CD8+比值。

2 結 果

2.1 慢性蕁麻疹組和正常對照組研究對象外周血T細胞亞群 與對照組比較，慢性蕁麻疹組患者外周血中CD4+T淋巴細胞比例明顯降低(t=-15.239，P<0.01)，CD8+T淋巴細胞比例升高(t=8.519，P=0.001)，CD4+/CD8+比值下降(t=-9.545，P=0.001)，CD3+T淋巴細胞比例無明顯變化(t=1.475，P=0.142)。見表 1。

表1 2組研究對象外周血 T淋巴細胞亞群比例

*P<0.01 compared with control group.

2.2 不同病程慢性蕁麻疹患者外周血T淋巴細胞亞群 與病程≤12個月慢性蕁麻疹患者比較，病程>12個月慢性蕁麻疹患者外周血CD4+T淋巴細胞比例明顯降低(t=2.359，P=0.021)，CD8+T 淋巴細胞比例升高 (t=-3.093，P=0.003)，CD4+/CD8+比值下降(t=2.471，P=0.016)，CD3+T淋巴細胞比例無明顯變化(t=1.145，P=0.236)。見表2。

表2 不同病程慢性蕁麻疹患者T淋巴細胞亞群比例

*P<0.05 compared with ≤12 months.

2.3 不同并發癥慢性蕁麻疹患者外周血T淋巴細胞亞群 與無并發癥組慢性蕁麻疹患者比較，并發幽門螺旋桿菌感染、血液病或惡性腫瘤、自身免疫病、乙肝/丙肝的慢性蕁麻疹患者外周血中CD4+T淋巴細胞比例明顯降低(t1= 4.060，P1<0.01；t2= 3.725，P2=0.001；t3= 5.756，P3<0.01；t4= 4.333，P4=0.001)，CD8+T淋巴細胞比例明顯升高 (t1= -2.049，P1=0.047；t2=-3.199，P2=0.003；t3=-4.913，P3<0.01；t4=-3.484，P4=0.001)，CD4+/CD8+比值下降(t1=3.771，P1=0.001；t2= 2.721，P2=0.001；t3= 8.985，P3=0.001；t4=2.144，P4=0.013)，CD3+T淋巴細胞比例明顯降低(t1= 2.471，P1=0.001；t2=2.190，P2=0.036；t3=4.119，P3<0.01；t4= 2.835，P4=0.007)。見表3。

表3 伴有不同并發癥慢性蕁麻疹患者T淋巴細胞亞群比例

*P<0.05 compared with no complication.

3 討 論

T 淋巴細胞是介導細胞免疫應答的主要細胞，在人 體 免 疫 系 統 中 扮 演 重 要 的角色，CD3分子在所有成熟T淋巴細胞表面表達，是成熟T淋巴細胞的標志。 CD4+T 淋巴細胞能夠輔助B細胞和細胞毒性T淋巴細胞活化，并產生抗體使巨噬細胞激活，增加其提呈抗原及殺傷細胞內微生物的能力[8-9], CD8+T淋巴細胞為具有殺傷活性的細胞，能夠通過分泌腫瘤壞死因子(TNF)顆粒酶和穿孔素等細胞因子殺傷靶細胞，介導靶細胞凋亡[10-11]。其中CD4+T細胞被提呈的抗原激活后,能成熟并分化為2個不同的功能亞群:Th1和Th2，Th2細胞能夠釋放白細胞介素 4、5和10等細胞因子，誘導B淋巴細胞及巨噬細胞的激活，引起IgE及組胺釋放，發生炎癥反應及超敏反應，導致慢性蕁麻疹皮損的發生[12]。Th1細胞能夠釋放γ干擾素和白細胞介素12等細胞因子，減緩超敏反應的發生及Th細胞向Th2 細胞分化，減輕慢性蕁麻疹的臨床癥狀[4，13-14]。紅斑狼瘡、干燥綜合征、風濕病、甲狀腺炎和甲狀腺功能亢進等自身免疫性疾病與慢性蕁麻疹發生有密切關聯[15-18],提示免疫失衡可能是慢性蕁麻癥發生發展的關鍵因素之一。

本研究通過流式細胞術檢測慢性蕁麻疹患者外周血 T淋巴細胞亞群的變化，結果顯示：患者組CD3+T細胞比例與對照組比較差異無統計學意義，CD8+T細胞比例明顯高于對照組，而CD4+T細胞比例和CD4+/CD8+比值明顯低于對照組，提示慢性蕁麻疹患者外周血免疫細胞功能失衡與疾病的發生有密切關系。本研究對不同病程慢性蕁麻疹患者外周血 T淋巴細胞亞群進行了分析，與病程≤12個月慢性蕁麻疹患者比較，病程>12個月慢性蕁麻疹患者外周血CD4+T淋巴細胞比例明顯降低，CD8+T 淋巴細胞比例升高，CD4+/CD8+比值下降，表明病程越長，患者的免疫功能失衡越嚴重。本研究結果顯示：慢性蕁麻疹伴有并發癥的患者，尤其是并發自身免疫性疾病組患者，CD4+T淋巴細胞比例和CD4+/CD8+比值明顯降低，CD8+T比例明顯升高。關于并發結締組織病患者出現的蕁麻疹是自身免疫性疾病本身的皮膚表現，還是2種疾病共同的皮膚表現，還有待進一步的研究。慢性蕁麻疹長期反復發作，逐漸增加機體對自身抗原的敏感性，可能改變了疾病自身的特點，增加了自身免疫的成分，使蕁麻疹的發病具有自身免疫學的背景，進一步誘導細胞免疫功能紊亂，表明CD3+T淋巴細胞比例、CD4+T淋巴細胞比例、CD8+T淋巴細胞比例和 CD4+/CD8+比值與慢性蕁麻疹患者的臨床特征有一定的關聯。建議對病程較長及伴有并發癥的慢性蕁麻疹患者進行抗核抗體等免疫學指標的檢測，以便早期發現并發存在的系統性自身免疫性疾病[19-20]。

綜上所述, T淋巴細胞亞群失衡與慢性蕁麻疹發病機制有密切關聯，對慢性蕁麻疹患者進行T淋巴細胞檢測，對評估病情、完善治療方案以及預測預后具有一定的意義，本研究結果為慢性蕁麻疹的臨床治療提供了新的思路。