上海地區(qū)2 437例食物不耐受患兒過敏原譜檢測分析

鄭 嵐，楊 藺，王 星

（上海交通大學醫(yī)學院附屬上海兒童醫(yī)學中心檢驗科，上海 200127）

近年來，由于外界環(huán)境的惡化和飲食結構的復雜化，食物性過敏性疾病（food allergy disease，F(xiàn)AD）在全球范圍內都呈上升趨勢[1]，在兒童中尤為嚴重，已成為全球的公共衛(wèi)生問題[2]。FAD易感者在攝入食物類抗原后，機體會產生異常免疫反應，其中由食物不耐受引起的過敏反應尤為常見，在臨床癥狀上有多種表現(xiàn)形式，包括皮膚癥狀、胃腸道癥狀、呼吸道癥狀，甚至過敏性休克。在兒童中，多種類型的過敏性疾病，如鼻炎、哮喘等很難找到明確的致病因素，且易反復發(fā)作，嚴重影響患兒的健康成長。FAD發(fā)病機制包括IgE介導、非IgE介導和混合型[3]。1982年，學者們發(fā)現(xiàn)了IgG介導的食物過敏反應，其與IgE分別作用于過敏反應的速發(fā)相和遲發(fā)相。此后，隨著人們對IgG介導的食物過敏反應的了解逐步加深，檢測方法被不斷改進，目前臨床上已可以有效地診斷IgG介導的食物過敏反應相關疾病并進行有效的防治。為了探討和研究IgG介導的食物過敏反應在兒童過敏性疾病中的發(fā)生規(guī)律，本研究對食物不耐受患兒的性別、年齡、發(fā)病季節(jié)及常見食入性過敏源的分布等進行了調查。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2015年1—12月在上海交通大學醫(yī)學院附屬上海兒童醫(yī)學中心過敏免疫科及兒科門診進行過敏原檢測的患兒2 437例，其中男1 478 例、女959例，年齡1個月～18歲，臨床表現(xiàn)主要包括哮喘、過敏性鼻炎、蕁麻疹、久咳、肺炎等。納入標準：患兒過敏史不詳，但均有典型臨床表現(xiàn)（明顯的過敏反應），且已明確診斷為過敏性疾病。

1.2 方法

食物特異性IgG抗體采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）微孔板技術檢測，試劑盒為蘇州浩歐博生物醫(yī)藥有限公司生產的食物特異性IgG抗體檢測試劑盒FIgG-14項-H（牛肉、牛奶、蛋清/蛋黃、雞肉、豬肉、蝦、蟹、鱈魚、大米、玉米、小麥、番茄、大豆、蘑菇）。實驗步驟：采集患兒血清20 μL，1∶100稀釋后加入包被有食物抗原的微孔中，使之發(fā)生反應，然后去除未結合的抗體，加入結合辣根過氧化物酶的抗人IgG抗體，與已結合的抗體反應。結合的辣根過氧化物酶催化發(fā)色底物四甲基聯(lián)苯胺（tetramethylbenzidine，TMB）產生發(fā)色反應。反應終止后，在450 nm波長處測定吸光度（A）值，A值的大小與待檢抗體濃度呈正比。根據(jù)每種食物特異性IgG抗體濃度的不同將測定值分為：陰性（＜50 U/mL）、1級（輕度敏感，50～100 U/mL）、2級（中度敏感，100～200 U/mL）、3級（重度敏感，50～100 U/mL）。1～3級均為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用Stata/SE 11.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗和χ2趨勢檢驗。以P＜0. 05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 過敏原譜分類

食物特異性IgG抗體總陽性率為79.1%（1 928/2 437）。最主要的食入性過敏原為蛋清/蛋黃，陽性率為54.7%，之后依次為小麥（44.3%）、西紅柿（31.3%），牛奶（30.5%），豬肉、牛肉陽性率最低（均＜1%），見圖1。單純1項過敏原陽性以蛋清/蛋黃或牛奶為主（31.0%），2項過敏原陽性以蛋清/蛋黃+牛奶為主（11.8%），3項過敏原陽性以蛋清/蛋黃+牛奶+西紅柿為主（5.0%）。蛋清/蛋黃、牛奶引起的過敏反應較強，IgG升高以“++”和“+++”為主；而小麥、西紅柿引起的過敏反應較弱，IgG升高以“+”為主。

圖1 2 437 例患兒14種食物過敏原檢測結果

2.2 性別分布

2 437例患兒中男1 478例、女959例，性別比例為1.5∶1。男、女童之間牛奶、小麥、大豆、玉米、鱈魚、大米、西紅柿、蟹、蝦、豬肉、牛肉、雞肉陽性率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。男童蛋清/蛋黃的陽性率（31.5%）明顯高于女童（23.2%）（P＜0.05），女童蘑菇的陽性率（1.0%）明顯高于男童（0.7%）（P=0.01）。見圖2。

2.3 年齡分布

將2 437例食物不耐受患兒按年齡分組，分為：＜3歲組（884例）、4～5歲組（480例）、6～7歲組（481例）、＞7歲組（592例）。不同年齡組牛奶、蛋清/蛋黃、小麥、玉米、鱈魚、大米、西紅柿、蟹、蝦和雞肉陽性率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。其中牛奶、小麥、玉米、鱈魚、大米、西紅柿、蟹、蝦、雞肉陽性率均隨年齡增長呈下降趨勢，蛋清/蛋黃陽性率均以＜3歲組最低，3歲后出現(xiàn)高發(fā)但呈緩慢下降趨勢。其他幾項與年齡因素并無明顯關系。見表3。

在＜3歲組中，男童蛋清/蛋黃和小麥的陽性率明顯高于女童（P＜0.05）。在4～5歲組中，女童蟹和蘑菇的陽性率明顯高于男童（P＜0.05）。在6～7歲組中，女童小麥陽性率顯著高于男童（P＜0.05），男童蝦的陽性率高于女童（P＜0.05）。在＞7歲組中，女童大米陽性率顯著高于男童（P＜0.05）。見表4。

表3 不同年齡段患兒食物過敏原陽性率比較 （%）

表4 各年齡組不同性別患兒食物過敏原陽性率的比較 （%）

2.4 檢測時間分布

在不同月份進行食物特異性IgG抗體檢測的患兒數(shù)量有一定的差異，其中1月份檢測例數(shù)和陽性率分別為155例、71.0%，2月份分別為109例、81.7%，3月份分別為203例、75.4%，4月份分別為233例、73.0%，5月份分別為162例、86.4%，6月份分別為189例、88.4%，7月份分別為272例、78.7%，8月份分別為301例、80.1%，9月份分別為226例、81.9%，10月份分別為176 例、81.3%，11月份分別為222例、74.8%，12月份分別為189例、79.4%。不同月份之間陽性率差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），無明顯的高峰期，說明食物性過敏原與季節(jié)因素無明顯相關性。

3 討論

FAD在全球范圍內呈上升的趨勢[1]，在兒童中尤為嚴重。當食物進入機體后不能被完全消化而產生食物大分子，食物大分子一旦進入血液中即可作為抗原提呈因子被免疫系統(tǒng)識別，從而刺激機體產生特異性IgG抗體。該抗體可對持續(xù)進入機體的同類過敏原產生保護性免疫反應，表現(xiàn)為非IgE介導的FAD。兒童由于處于身體的生長期，自身消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，很難徹底消化食物且易受外界因素的侵擾，更易患FAD。食物過敏原多為蛋白質分子，雞蛋、牛奶、魚類、甲殼類動物、花生、大豆、核果類食物和小麥經常會引起過敏反應，占食物過敏的90%以上[4]。本研究結果也顯示，蛋清/蛋黃、小麥、西紅柿和牛奶引起的過敏反應較強，其中蛋清/蛋黃、牛奶引起的過敏反應較強，IgG升高以“++”和“+++”為主，而小麥、西紅柿引起的過敏反應較弱，以“+”為主。

本研究結果顯示，與女童比較，男童患食物過敏性疾病的可能性似乎更大，男、女童性別比例約為1.5∶1，這與楊勇等[5]的報道不太一致，需要加大樣本量和擴大調查區(qū)域來驗證。在常見食入性過敏原中，絕大部分食物對男、女童的致敏性無差異，說明性別可能不是影響兒童FAD的主要因素。但男童的蛋清/蛋黃陽性率顯著高于女童，這與沈陽、大連等地區(qū)的報道相同[5-6]；而女童的蘑菇陽性率顯著高于男童，這說明某些致敏原對男、女童的致敏作用不太相同，其機制有待進一步研究。

按年齡分層的研究結果顯示，絕大部分食物對不同年齡段患兒的致敏作用有差異，說明年齡可能是影響兒童FAD的主要因素。牛奶、小麥、玉米、鱈魚、大米、西紅柿、蟹、蝦、雞肉均隨年齡增長呈下降趨勢，蛋清/蛋黃陽性率＜3歲組最低，3歲后出現(xiàn)高發(fā)但呈緩慢下降趨勢。這可能與兒童的消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)逐步發(fā)育成熟，產生免疫耐受有關[7-8]。

綜上所述，兒童食物特異性IgG抗體陽性率較高，因此應重點加強學齡前兒童食物不耐受防治工作，盡量避免和減少食用被列為過敏原的食物[9]。總之，通過檢測食物特異性IgG 抗體可以明確病因[10-11]，對于食物過敏患兒的個體化治療和健康教育都有重要作用。