2018年上半年產蛋雞致病性大腸艾希菌耐藥情況研究報告

李桂喜 ，董松嶺 ， 何永光 ，魏曼 ，梁磊

(1.商丘市動物疫病預防控制中心，河南 商丘 476100；2.商丘市質量技術監督檢驗測試中心，河南 商丘 476000；3.鄭州市動物衛生監督所，河南 鄭州450007；4.商丘市畜產品質量監測檢驗中心，河南 商丘 476100）

由于養雞生產中廣泛使用抗菌素 （飼料長期低劑量添加，雛雞和青年雞預防性投藥尤為嚴重），不合理使用或濫用抗菌素，導致大腸艾希菌因抗菌藥物的選擇性壓力，耐藥菌得以迅速繁殖而成為優勢菌，并引起多重耐藥和耐藥基因獲得較長期存留或遺傳。產蛋期藥物殘留嚴重影響食品安全和人體健康，殘留藥物通過排泄物進入土壤和地下水對生態安全造成嚴重危害。

為了臨床合理和最低限度使用抗菌藥物,2018年1月1日至6月30日對蘇魯豫皖交界某雞病門診140日齡以上、疑似患有大腸桿菌病的病死雞，進行常規大腸艾希菌分離并選用8種藥物進行藥敏試驗和耐藥性研究。

1 材料與方法

1.1 病料來源 疑似患有大腸桿菌病的病死蛋雞，進行常規大腸艾希菌分離鑒定毒株。

1.2 培養基 鄭州人福博賽生物技術有限公司商品化MH培養基。

1.3 質控菌 大腸埃希菌ATCC25922。

1.4 藥敏紙片 OXOID公司商品化藥敏紙片，選用 AMC(阿莫西林/克拉維酸)、N（新霉素）、CIP（環丙沙星）、CT（多粘菌素）、CTX（頭孢噻肟）、C（氯霉素）、SH（壯觀霉素）、K（卡那霉素）8 種藥敏紙片進行本研究。其中氯霉素作為獸藥氟苯尼考藥敏參考，頭孢噻肟作為獸藥頭孢噻呋藥敏參考。

1.5 藥敏試驗方法 采用CLSI標準K-B法。

1.6 藥敏結果判定 根據CLSI最新解釋標準。

2 結果

2.1 分離株致病性大腸艾希菌敏感結果 CT敏感率最高達86.27%，N最低敏感率僅為4.59%，由高到低排序：CT(289株/335 株，86.27%)＞SH(227株/429 株，52.91%)＞AMC(167 株/415 株，40.24%)＞CTX(108株/389株，27.76%)＞K(81株/354株，22.88%)＞CIP(76 株/395 株，19.24%)＞C(52 株/396株，13.13%)＞N(13 株/283 株，4.59%)。 結果見表 1、圖1。

圖1 不同藥物敏感（S）柱狀圖

表1 2018年上半年藥敏試驗結果匯總表（單位：株）

2.2 分離株致病性大腸艾希菌耐藥結果 C耐藥率高達83.08%，AMC耐藥率最低為11.08%，由高到低的排序：C(329株/396株，83.08%)＞N(202株/283 株，71.38%)＞CIP(262 株/395 株，66.33%)＞CTX(228株/389株，58.61%)＞K(203株/354株，57.34%)＞SH(121 株/429 株，28.21%)＞CT(株 46/335株，13.73%)＞AMC(46 株/415 株，11.08%)。 結果見圖2。

圖2 不同藥物耐藥（R）柱狀圖

2.3 0 mm藥敏值結果 C對78.28%菌株無任何作用，只有2株對CT的藥敏值是0mm，由高到底的排序 ：C(310株/396株，78.28%)＞K(203株/354株，57.34%)＞CIP(151 株/395 株，38.23%)＞CTX(109株/389 株，28.02%)＞SH(26 株/429 株，6.06%)＞N(15株/396 株，3.79%)＞AMC(8 株/415 株，1.93%)＞CT(2株/335株，0.59%)。結果圖3。

圖3 不同藥物抑菌圈直徑0mm柱狀圖

2.4 誘導耐藥和依賴耐藥菌株分離結果 對K、CIP和C產生誘導耐藥和依賴耐藥菌株較多，對CT產生最少，只有4株/335株，為1.19%。由多到少排序：K(34株/354株，9.60%)＞CIP(29株/395株，7.34%)＞C(22 株/396 株，5.56%)＞SH(15 株/429株，3.49%)＞CTX(13 株/389 株，3.34%)＞N(8 株/396株，2.02%)＞AMC＞(8 株/415 株，1.93%)＞CT(4 株/335株，1.19%)。 結果見圖 4。

圖4 依賴耐藥和誘導耐藥情況

2.5 多重耐藥結果 有24.72%菌株對7種藥全部耐藥，只有1株對8種藥全部敏感，1株對7種藥敏感，其余均對2種以上藥物耐藥。多重耐藥由高到低排序：7耐 (67株/271株，24.72%)＞6耐(66株/271 株，24.35%)＞5 耐 (62 株/271 株，22.88%)＞4耐 (25株/271株，9.23%)＞3耐 (21株/271株，7.75%)＞8耐(15株/271株，5.54%)＞2耐(13株/271株，%)＞1耐=0耐(1株/271株，0.37%)。 結果見圖5、表 2。

圖5 多重耐藥餅狀圖

表2 多重耐藥匯總表

綜合以上結果，C的耐藥率、0mm藥敏值居于首位；N、CIP耐藥率分別居于第二和第三；CT敏感率最高，0mm藥敏值、耐藥率、誘導耐藥和依賴耐藥菌株分離株均最低。

3 結論與討論

3.1 由于蛋雞親代細菌耐藥質粒的遺傳和育雛期、產蛋前期抗生素的不規范使用，導致蛋雞大腸桿菌耐藥性的產生。C、N、CIP高耐藥率的試驗結果，與蛋雞生產中氟本尼考、氟喹諾酮、新霉素類藥物的預防性投藥和濫用藥密切相關，這三類藥物也是多次禽蛋抽檢藥殘較多的品種，與2018年上半年食藥監部門鮮蛋抽檢藥物殘留結果一致。鮮蛋不合格原因是被檢出含有氟苯尼考、恩諾沙星、氧氟沙星等，其中氟苯尼考檢出頻次57.58%（38/66）、恩諾 沙星 39.39%（26/66）、氧氟沙星1.52%（1/66）。

3.2 致病性大腸艾希桿菌是一種機會菌，產蛋期是大腸桿菌原發和繼發的高發期。

加強飼養管理，降低雞舍NH3、H2S、粉塵的濃度可將發病率降至一個較低的水平。日常飼料添加微生態制劑，采用生物拮抗作用，可有效抑制致病性大腸艾希桿菌的繁殖。

3.3 加強低致病性禽流感、新城疫等病毒性疫病的防控，可以減少致病性大腸艾希桿菌的繼發感染。

3.4 蛋雞發病后可采用酸化劑飲水和加強雞舍消毒。酸化劑飲水將pH值調控至4.2左右，抑制致病性大腸艾希桿菌的繁殖，雞舍強化消毒能夠降低空氣致病性大腸埃希菌濃度。

3.5 選擇飼養優質抗病蛋雞品種，如農大三號、花鳳等本土品種。