氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素方法的探究

都麗莉 易楠

甜蜜素是一種較為常見的水溶性人工甜味劑，其專業(yè)名稱為“環(huán)已基氨基磺酸鈉”。《GB2760- 2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)甜蜜素的使用量有著嚴(yán)格規(guī)定，采取科學(xué)方法對(duì)食品中甜蜜素進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定至關(guān)重要。

應(yīng)用氣相色譜法能夠準(zhǔn)確、快速對(duì)食品中的甜蜜素含量進(jìn)行測(cè)定，甜蜜素含量在0.25-4.00mg之間呈較好線性關(guān)系。本文就高油脂含量食品中甜蜜素測(cè)定方法展開具體討論。

試驗(yàn)原理

富含油脂食品通過石油醚有效去除油脂，溶于水對(duì)樣品中環(huán)已基氨基磺酸鈉進(jìn)行獲取；經(jīng)過亞鐵氰化鉀、硫酸鋅進(jìn)行沉淀，處于硫酸介質(zhì)中環(huán)已基氨基磺酸鈉與亞硝酸產(chǎn)生虎穴發(fā)生，形成環(huán)乙醇亞硝酸酯、環(huán)乙醇；選擇氣相色譜氫火焰離子化驗(yàn)檢測(cè)器完成分離。

試驗(yàn)材料與方法

試驗(yàn)儀器：Aglient7890A型氣象色譜儀、旋渦混合器、冷凍離心機(jī)。試劑：環(huán)已基氨基環(huán)酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，含量>98.0%石油醚，沸程30- 60℃亞硝酸鈉溶液，50g/L硫酸溶液，100g/L亞鐵氰化鉀溶液，150g/L硫酸鋅溶液，300g/L正己烷（色譜純）氯化鈉（分析純）。試驗(yàn)前應(yīng)保證試驗(yàn)條件滿足氣相色譜法應(yīng)用基本環(huán)境及需要：色譜柱HP- 5，汽化室溫度應(yīng)保持200℃；程序升溫條件為：50℃持續(xù)1min，20℃升溫至100℃，40℃升溫至200℃，并持續(xù)1min；檢測(cè)器溫度為230℃。

準(zhǔn)確量取0.5612g環(huán)已基氨基磺酸鈉，采用水溶解其達(dá)到100mL，調(diào)配完成5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

樣品處理 準(zhǔn)確量取5.00g樣品并進(jìn)行剪碎處理，將其置于150mL三角瓶中，并加入25mL石油醚進(jìn)行振蕩，有效提取兩次后除去石油醚。氮吹出去除剩余石油醚，加入水超聲提取并將亞鐵氰化鉀溶液、硫酸鋅溶液各2mL加入，振蕩混合后過濾定容50mL備用。將20mL溶液置于比色管中（100mL比色管，帶蓋），并將其放置于冰浴中。其他樣品操作過程與標(biāo)準(zhǔn)溶液制備處理過程相同。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 準(zhǔn)確吸取 0.25、0.50、1.00、2.00m L 和 4.00mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液于 100m L 帶塞比色管中，各加水20m L，置于冰浴中 5min 后，依次加入 5m L 100g/L 硫酸溶液和5m L 50g/L 亞硝酸鈉溶液，混勻，并在冰浴中放置 30min（需經(jīng)常搖動(dòng)），然后加入 5m L 正己烷、5g 氯化鈉，振蕩提取，靜置分層后，吸取正己烷層于 10m L 帶塞離心管中離心分離，待進(jìn)樣分析。

結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)中采用毛細(xì)管柱為分析柱，其峰型良好，通過標(biāo)準(zhǔn)譜圖可知在HP- 5色譜柱反應(yīng)下有兩個(gè)產(chǎn)物，分別為環(huán)乙醇亞硝酸酯和環(huán)已醇，出峰時(shí)間為4.930、5.123min。將環(huán)乙醇亞硝酸酯與環(huán)已醇兩峰之間的面積和作為縱坐標(biāo)，其橫坐標(biāo)為濃度，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，食品中環(huán)已基氨基磺酸鈉含量在0.25- 4.00mg/mL之間呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r為0.9987，回歸方程為：y=416.0x- 12.5

準(zhǔn)確量取五份平行樣，進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，測(cè)得RSD%=1.6。對(duì)已知含量樣品進(jìn)行方法回收率試驗(yàn)，通過添加標(biāo)準(zhǔn)濃度水平溶液，測(cè)定其加標(biāo)回收率為87.0%，其具體結(jié)果如下所示。

本次試驗(yàn)針對(duì)油脂含量較高食品中甜蜜素進(jìn)行測(cè)定分析，采用HP- 5毛細(xì)管柱，對(duì)色譜條件進(jìn)行了調(diào)整，前處理對(duì)樣品進(jìn)行除脂、沉淀，再通過振蕩進(jìn)行上清液衍生化反應(yīng)，這些優(yōu)化有效降低了衍生乳化反映，能夠更準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單的對(duì)食品中的環(huán)已基氨基磺酸鈉進(jìn)行檢測(cè)。試驗(yàn)中要保證試驗(yàn)冰浴溫度，注意對(duì)提取液進(jìn)行保存冷藏，試驗(yàn)結(jié)果可靠，是食品檢測(cè)中對(duì)環(huán)已基氨基磺酸鈉測(cè)定的較理想方法。