用蛋白質羰基含量評價抗氧化保健食品的研究

李衛國

在現代社會，衰老一直是困擾每個女性的問題。為了延緩衰老，都想盡辦法，如去美容院、打美容針、做手術、吃保健品等。其中抗氧化保健品是最常用的手段。抗氧化保健食品之所以有延緩衰老的作用，主要是因為該種保健品對人體內的蛋白質有保護功能。但也恰恰因為這個原因，許多不法商家為盈利，許多產品并沒有達到國家生產標準，針對這一情況，對抗氧化保健食品進行檢測勢在必行。蛋白質羰基含量與人體衰老程度有著直接關系，蛋白質羰基含量越多，表明人體越衰老。所以本次研究將三種抗氧化保健食品喂給老齡小白鼠，然后通過2.4-二硝基苯肼比色法測定白鼠體內的蛋白質羰基含量，建立以蛋白質羰基含量為檢測指標的評價抗氧化保健食品質量的方法。

實驗材料

實驗儀器：上海精科公司生產的型號為HI- 77s的分光光度計；北京時代北利離心機有限公司生產的型號為J GG- 38s離心機。

實驗試劑：蛋白酶抑制劑、N- 2-羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸、鹽酸胍、2.4-二硝基苯肼。

實驗動物：昆明種50周齡雌性小鼠4只。本實驗所用動物均來自中國醫學科學院實驗動物所繁育場提供的健康二級昆明種小鼠（動物許可證編號：XCK97089）。

實驗方法

首先取1個小白鼠體內組織，然后將其放入5毫升的勻漿緩沖液當中，然后利用J GG-38s離心機對其進行攪碎處理，然后將其放入溫室當中10min，等待檢測。

然后將另外三只小白鼠分別喂入三種不同的氧化保健食品，經過24小時后，將其殺死，取出體內組織，然后重復上述試驗步驟，等待2.4-二硝基苯肼比色法的測定。

實驗測定

在上述處理好的白鼠組織中加入3ml2.4-二硝基苯肼的溶液，室溫下放置1個小時，之后加入2ml的N- 2- 羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸和3ml的蛋白酶抑制劑，再次靜置1個小時，然后進行過濾，得到碎組織，加入鹽酸胍溶液，并充分震蕩，最后用HI- 77s的分光光度計進行吸光度測定，以摩爾消光系數計算蛋白質羰基含量。

結果分析

測定結果如表1所示。

從表1中可以看出，小白鼠在沒有喂過抗氧化保健品之前，其蛋白質羰基含量為0.85±0.10 nmol/mg；而喂過抗氧化保健品之后，三只小白鼠的蛋白質羰基含量分別為0.62±0.10 nmol/mg、0.83±0.10 nmol/mg、0.76±0.10 nmol/mg，與之前對比，三只小白鼠的體內的蛋白質羰基含量均有所降低，但是下降的程度有所不同。首先小白鼠2號體內的蛋白質羰基含量下降的最多，說明喂給小白鼠2號的抗氧化保健品功效最好；其次是小白鼠4號，其體內的蛋白質羰基含量下降了0.09±0.10nmol/ mg，說明喂給小白鼠4號的抗氧化保健品存在一定延緩衰老的功效；最后是小白鼠3號，其體內的蛋白質羰基含量較之前沒有明顯的下降，說明喂給小白鼠3號的抗氧化保健品幾乎沒有什么功效，質量完全不過關。

綜上所述，抗氧化保健食品是當前主要的抗衰老產品之一。因其具有巨大市場潛力，市面上的抗氧化保健食品的質量參差不齊，所以必須對其進行質量檢測。本次研究將蛋白質羰基含量作為衡量標準，通過2.4-二硝基苯肼比色法測定白鼠體內的蛋白質羰基含量變化情況，以此來判斷產品的功效。