分化型甲狀腺癌患者的NIS表達情況及其與甲狀腺超聲特征的關系

呂彥利,康秀梅,岳勝南,王燕

鄭州市人民醫院超聲科,鄭州4500000

甲狀腺癌是一種常見的內分泌系統惡性腫瘤,占所有惡性腫瘤的1%,且發病率呈逐年遞增趨勢,根據分化程度,可以將其分為分化型甲狀腺癌和未分化型甲狀腺癌,分化型甲狀腺癌又可以根據組織學來源分為甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和甲狀腺濾泡狀癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)[1-3].鈉/碘轉運蛋白(sodium/iodide symporter,NIS)是一種跨膜蛋白,近年來隨著對NIS基因序列以及分子結構的深入研究,發現其表達水平與甲狀腺癌的發生發展有著密切的關系[4].超聲檢查具有操作方便、及時、準確等特點,在臨床中已獲得廣泛應用.隨著高分辨率彩超儀的普及,超聲檢查逐漸成為診斷甲狀腺癌的首選方法,目前超聲診斷良惡性甲狀腺疾病主要是通過觀察病灶形態、邊界、回聲強度以及血流分布[5-7].本研究通過檢測甲狀腺結節、PTC和FTC患者中NIS的表達情況,分析NIS表達與甲狀腺超聲特征的關系,旨在為分化型甲狀腺癌的診斷和治療提供依據,現報道如下.

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年2月至2017年2月于鄭州市人民醫院治療的甲狀腺結節或甲狀腺癌患者的臨床資料.納入標準:①經甲狀腺結節和分化型甲狀腺癌診治指南(2006年版)[8]確診為甲狀腺結節或PTC或FTC;②接受過彩色多普勒超聲檢查.排除標準:合并其他重大疾病的患者.根據納入和排除標準,本研究共納入45例甲狀腺結節患者(甲狀腺結節組)、51例PTC患者(PTC組)和21例FTC患者(FTC組).甲狀腺結節組中,男12例,女33例;年齡 39～59歲,平均(43.2±2.8)歲.PTC組中,男20例,女31例;年齡35～63歲,平均(46.1±3.3)歲.FTC組中,男6例,女15例;年齡36～64歲,平均(48.1±3.1)歲.3組患者的年齡和性別比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性.

1.2 免疫組織化學檢測

將石蠟切片脫蠟、水化,使用雙蒸水沖洗兩次,采用3%的雙氧水對內源性過氧化氫酶進行滅活,置于磷酸鹽緩沖液中,微波加熱進行抗原修復,滴加兔抗人NIS多克隆抗體,室溫孵育1 h,然后滴加兔抗鼠多克隆抗體,室溫孵育30 min,滴加二氨基聯苯胺(diaminobenzidine,DAB)進行顯色,然后自來水沖洗終止染色,采用蘇木素復染1～2 min,使用梯度酒精脫水,二甲苯透明,然后封片,顯微鏡下觀察.

1.3 結果判斷

按照Soslow等[9]提出的方法對免疫組織化學染色結果進行評分.根據染色程度進行評分:未染色為0分,淺黃色為1分,黃色為2分,棕黃色為3.根據陽性細胞比例進行評分:0分,陽性細胞比例為0;1分,陽性細胞比例為1%～25%;2分,陽性細胞比例為26%～50%;3分,陽性細胞比例為51%～75%;4分,陽性細胞比例為76%～100%.每個切片選取5個視野,取平均值.每張切片的最后得分為兩項評分之和,免疫組化評分(immunohistochemical score,IHS)>6分為陽性.

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件對-數據進行統計分析.計量資料以均數±標準差()表示,組間比較采用t檢驗;計數資料以例數和率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗或Fisher確切概率法.以P<0.05為差異有統計學意義.

2 結果

2.1 3組患者NIS表達情況和IHS評分的比較

PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達率分別為72.5%(37/51)和66.7%(14/21),均高于甲狀腺結節組的24.4%(11/45),差異均有統計學意義(P<0.05);PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達率比較,差異無統計學意義(P>0.05).PTC組患者的IHS評分為(7.83±0.34)分,高于FTC組的(5.29±0.26)分,差異有統計學意義(P<0.05);甲狀腺結節組患者的IHS評分為(3.07±0.24)分,低于PTC組和FTC組患者,差異均有統計學意義(P<0.05).

2.2 PTC組和FTC組患者甲狀腺超聲特征的比較

甲狀腺超聲結果顯示,FTC組患者的腫瘤直徑為(1.77±0.10)cm,大于PTC組患者的(1.68±0.11)cm,差異有統計學意義(P<0.05).兩組患者的頸部淋巴結腫大情況比較,差異無統計學意義(P>0.05);兩組患者在回聲、形態、邊界、鈣化以及血流方面比較,差異均有統計學意義(P<0.05)(表1).

表1 PTC組和FTC組患者甲狀腺超聲特征的比較

2.3 PTC組和FTC組患者NIS表達情況與甲狀腺超聲特征的關系

PTC組中,NIS陽性表達患者的腫瘤直徑為(1.70±0.11)cm,明顯大于NIS陰性表達患者的(1.64±0.10)cm,差異有統計學意義(P<0.01).FTC組中,NIS陽性表達和陰性表達患者的腫瘤直徑分別為(1.77±0.12)cm和(1.76±0.09)cm,差異無統計學意義(P>0.05).PTC組中,NIS陽性表達和陰性表達患者在回聲、形態、邊界、鈣化以及頸部淋巴結腫大方面比較,差異均無統計學意義(P>0.05);而血流方面比較,差異有統計學意義(P<0.05),NIS陽性表達患者血流表現以點條狀為主,NIS陰性表達患者則以血流豐富為主.FTC組中,NIS陽性表達和陰性表達患者的上述甲狀腺超聲特征比較,差異均無統計學意義(P>0.05)(表2).

表2 PTC組和FTC組患者的超聲特征和NIS蛋白表達情況[n(%)]

3 討論

NIS作為一種跨膜蛋白,含有13個跨膜片段,在人體內不同組織中均有不同程度的表達,但在甲狀腺中的表達水平最高,其功能主要是轉運鈉離子和碘離子,從而為人體合成甲狀腺激素提供原料[10].研究報道,在不同的甲狀腺疾病中,NIS的表達水平有所不同[11-13].Lazar等[14]研究報道,甲狀腺癌患者對放射性核素的攝取能力較低,這是由NIS低表達造成的,并且腫瘤分期越高,NIS的表達水平越低.Dohán[15]則得出了與之相反的結論,其應用免疫組織化學方法和逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)對57例甲狀腺惡性腫瘤患者的NIS表達水平進行檢測,結果發現超過60%的甲狀腺癌組織的NIS表達水平與正常組織相當,甚至超過正常組織.Saito等[16]采用蛋白質免疫印跡法對PTC患者的NIS表達水平進行檢測,發現甲狀腺癌中NIS出現了過表達,分化良好的甲狀腺癌組織的NIS表達水平高于分化較差的甲狀腺癌組織,且NIS在未分化癌中不表達.也有研究認為,不同病理分型甲狀腺癌患者的NIS表達水平也有不同,其中乳頭狀癌中的NIS表達水平最高,其次是濾泡狀癌,而濾泡型乳頭狀癌中NIS的表達水平最低[17].NIS不能正確定位于甲狀腺濾泡基底膜,可能是造成131I治療效果不佳的主要原因.本研究通過免疫組織化學方法檢測甲狀腺結節、PTC和FTC患者中NIS的表達水平,結果顯示PTC組和FTC組患者的NIS陽性表達率均高于甲狀腺結節組,差異均有統計學意義(P<0.05);PTC組患者的IHS評分高于FTC組,PTC組和FTC組患者的IHS評分均高于甲狀腺結節組,差異均有統計學意義(P<0.05).

彩色多普勒超聲的分辨率較高,可以清晰地從形態上對甲狀腺病變進行評價,根據超聲特征可以有效地診斷甲狀腺癌.研究報道,PTC的超聲特征多表現為單發、低回聲且伴有鈣化、血流豐富等,FTC的超聲特征多表現為低回聲、不均質腫塊等[18],未分化癌的超聲表現為體積大、回聲多樣化、出現鈣化等[19].鈣化在甲狀腺超聲圖像中最為常見,研究表明,微鈣化、低回聲、形態不規則以及邊界不清晰是甲狀腺惡性腫瘤的征象[20].本研究中彩色多普勒超聲檢查結果顯示,FTC組患者的腫瘤直徑大于PTC組,差異有統計學意義(P<0.05);兩組患者在回聲、形態、邊界、鈣化以及血流方面比較,差異均有統計學意義(P<0.05).提示術前彩色多普勒超聲可以有效地對PTC和FTC進行鑒別.PTC組中,NIS陽性表達和陰性表達患者在腫瘤直徑和血流方面比較,差異均有統計學意義(P<0.05);NIS陽性表達患者的腫瘤直徑大于NIS陰性表達的患者,NIS陽性表達患者的血流表現以點條狀為主,NIS陰性表達患者則以血流豐富為主.提示NIS表達情況與血流豐富程度和腫瘤直徑相關.FTC組中,NIS陽性表達和陰性表達患者的上述甲狀腺超聲特征比較,差異均無統計學意義(P>0.05).

綜上所述,術前采用彩色多普勒超聲可以有效鑒別PTC和FTC.盡管NIS陽性表達和陰性表達的甲狀腺癌患者在血流方面存在差異,但本研究樣本量較少,尚不足以證明超聲可以預測分化型甲狀腺癌組織中NIS的表達情況,有待于進一步擴大樣本量進行證實.