肺泡灌洗液SAT-TB聯合結核菌Xpert檢測對診斷涂陰肺結核的價值

王 芳，邵 斌，王亮平

(來鳳人民醫院感染科，湖北 來鳳 445700)

結核病是影響人類健康的慢性疾病之一，也是世界重大公共衛生問題之一。我國結核病發病率居世界前列，活動性肺結核病人數居世界第二位[1]。該病早期無特異性臨床表現，發現率較低，確診肺結核主要結合臨床表現、影像學、細菌涂片、免疫及培養等，臨床多集中于涂陽肺結核的早期發現及治療。涂陰肺結核是指有肺結核臨床癥狀或影像學檢查有異常表現，至少有3次痰涂片鏡檢抗酸桿菌陰性[2]，其臨床癥狀多樣、輕重不一，易與其他呼吸系統疾病相混淆，若采用傳統方法進行確診，陽性率降低、耗時較長[3]，因此，尋找快速、高效、準確的診斷方法具有重要臨床意義。近年來，纖維支氣管鏡檢查作為肺部疾病重要的輔助檢查方法，通過肺泡灌洗進行SAT-TB、Xpert檢測，對診斷涂陰肺結核具有重要價值[4]。因此，本研究將探討肺泡灌洗液SAT-TB聯合結核菌Xpert檢測在涂陰肺結核的診斷中的應用價值，旨在提高涂陰肺結核的診斷正確率及確診速度。

1 對象與方法

1.1 研究對象

納入標準：1)符合《中國結核病防治規劃實施工作指南(2008年版)》[5]中的涂陰肺結核診斷標準；2)患者未伴有嚴重心功能不全。排除標準：1)近期發生心肌梗死者；2)伴有大量咯血者。依據納入、排除標準，選擇2015年8月至2016年8月，來鳳人民醫院收治的68例涂陰肺結核患者作為研究對象，男46例，女22例，年齡21～73(54.24±14.87)歲。臨床表現以夜間盜汗、發熱、咳嗽、咳痰為主；X線、CT檢查結果以斑片影云絮影多見。具體數據見表1。

表1 68例涂陰肺結核患者臨床表現、X線及

68例肺結核患者中，2例為原發性肺結核、66例為繼發性肺結核，13例合并肺外結核。本研究經本院道德倫理委員會批準，獲得患者及家屬同意，并簽訂知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 肺泡灌洗

患者均采用奧林巴斯纖維支氣管鏡檢查，依據患者胸部CT或X線檢查結果，選擇病變支氣管作為灌洗部位，將10～20 mL生理鹽水通過支氣管鏡灌入病變支氣管中，負壓吸引回收灌洗液，重復2～3次，收集約20 mL灌洗液至無菌瓶內，送檢。

1.2.2 SAT-TB檢測

根據灌洗液的清濁度，對于伴有黏液的灌洗液可加入4%NaOH溶液進行液化(加入量低于樣本量體積)，SAT-TB試劑盒由上海仁度生物科技有限公司提供，操作步驟嚴格按照說明書執行。

1.2.3 結核菌Xpert檢測

將肺泡灌洗液(約5 mL)與含有NaOH及異丙醇的處理液按照2:1均勻混合，室溫下靜置15 min，將混合液轉移至多室塑料反應盒中，置于Gene Xpert儀(由美國Cepheid公司提供)中進行檢測，120 min后記錄結果。

1.3 觀察指標

記錄患者肺泡灌洗液SAT-TB及結核菌Xpert檢測結果，并計算靈敏性、特異性、準確性、陽性預測值及陰性預測值。

靈敏性=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%；特異性=真陰性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%；準確性=(真陽性例數+真陰險例數)/總例數×100%；陽性預測值=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%；陰性預測值=真陰性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%。

1.4 統計學方法

采用SPSS15.5軟件包進行處理，計數資料的比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺泡灌洗液SAT-TB、結核菌Xpert檢測結果

肺泡灌洗液SAT-TB、結核菌Xpert檢測結果見表2—3。

表2 肺泡灌洗液SAT-TB檢測結果 n=68

表3 結核菌Xpert檢測結果 n=68

2.2 2種檢查方法診斷價值分析

聯合檢測對診斷涂陰肺結核的靈敏度、特異度及準確性較單獨檢測均有顯著提高(P<0.05)，見表4。

表4 2種檢查方法診斷涂陰肺結核的價值分析 %

*P<0.05，與SAT-TB檢測、結核菌Xpert檢測結果比較。

3 討論

我國結核病患者人群中，涂陰肺結核患者約占85%，在結核病的防控中成為不可忽視的群體[6]。從臨床癥狀來看，涂陰肺結核患者多伴有咳嗽癥狀；從單因素與多因素分析結果來看，咳嗽與肺結核無明顯關系，這與涂陽患者明顯不同；另外，涂陰肺結核患者可伴有盜汗、體質量下降、發熱、乏力等癥狀[7-8]。本文資料顯示，患者臨床表現以夜間盜汗、發熱、咳嗽、咳痰為主，缺乏典型表現，因而影響臨床醫師的判斷涂陰肺結核患者胸片表現不典型，缺乏特異性，多數缺乏涂陽肺結核的滲出、增生、鈣化灶同時存在的多形態特征表現[9]。本文資料顯示，X線、CT檢查結果以斑片影云絮影多見，同樣缺乏特異性，因此，臨床醫師需綜合患者病史、輔助檢查等進行綜合診斷，以提高診斷正確率。

目前，臨床診斷肺結核主要通過病原學檢查，但該方法易受到標本獲取、患者間斷性排菌、結核菌數量級別等因素的影響，致敏感度較低，且耗時較長，與臨床結核病快速診斷的要求存在一定差距[10]。SAT技術是RNA恒溫擴增新技術，其以結核分枝桿菌特異性16rRNA為檢測靶標，在特定溫度下，通過MMLV逆轉錄產生雙鏈DNA，然后再產生多個RNA拷貝，拷貝完成后進入下一個擴增循環，在擴增的同時將帶有熒光標記的探針與RNA拷貝結合，產生熒光，再通過熒光檢測儀實時捕獲，可直觀反映是否存在結核桿菌[11-12]。本研究結果顯示，SAT-TB檢測診斷的靈敏度為88.46%，特異度為69.05%，準確性為76.47%，說明SAT-TB檢測對于涂陰肺結核患者具有一定診斷價值，且檢測速度快，有望成為診斷涂陰肺結核的一種新檢測方法。

結核菌Xpert檢測是2011年WHO制定的對適應人群進行痰液的檢測，而近來研究[13-14]發現，纖維支氣管鏡獲得的肺泡灌洗液中的抗酸桿菌涂片及培養陽性率高于痰液標本，可顯著提高結核病診斷的敏感性。張海晴等[15]發現，通過Xpert MTB/RIF試劑盒對結核疑似患者進行診斷，將結果與痰涂片、培養及核擴增檢測方法相比：涂陽標本中，Xpert MTB/RIF的檢出率為98.2%；涂陰標本中，Xpert MTB/RIF的檢出率為72.1%，若復檢可提高檢出率。本研究結果顯示，結核菌Xpert檢測診斷的靈敏度為80.77%，特異度為52.38%，準確性為63.23%，此結果稍低于張海晴等[15]的報道，可能與本研究樣本容量較小有關。另，本研究結果提示，Xpert檢測在涂陰肺結核中的靈敏度較高。

本研究還探討聯合檢測對涂陰肺結核的診斷價值，結果顯示診斷的靈敏度為92.30%，特異度為78.57%，準確性為83.82%。聯合檢測對診斷涂陰肺結核的靈敏度、特異度及準確性均有顯著提高。此結果說明聯合檢測可準確、高效地協助臨床醫師進行診斷，縮短患者等待確診時間，使患者能夠得到及時治療，改善預后。

綜上所述，肺泡灌洗液SAT-TB聯合結核菌Xpert檢測對診斷涂陰肺結核具有重要價值，具有較高的靈敏度及特異度，為一種簡便、快速、高效的檢查方法。