白花前胡化學成分研究

汪 康，聶竹霞，孫云鵬，劉松照，王國凱

(1.安徽中醫藥大學藥學院 安徽道地中藥材品質提升協同創新中心，安徽 合肥 230012；2.安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽 合肥 230051；3.武漢市第六醫院，湖北 武漢 430015)

前胡為傘形科植物白花前胡(P.praeruptorumDunn)的干燥根，主產于浙江、江西、安徽、福建、江蘇、四川等地。具有散風清熱、降氣化痰的功效，臨床上用于風熱咳嗽痰多、痰熱喘滿、咳痰黃稠等癥。現代研究表明，白花前胡中主要含有香豆素類化學成分，其類型包括簡單香豆素、呋喃香豆素和吡喃香豆素[1-3]；此外白花前胡中還含有揮發油[4-5]、甾醇[6]、有機酸[7]等化學成分。本研究對白花前胡化學成分進行了研究，共分離鑒定了5個化合物，分別為異紫花前胡內脂、噢洛內脂、紫花前胡素D、Pd-C-Ⅱ、marmesin-11-O-β-D-glucopyranosyl (1→6)-β-D-glucopyranoside。

1 試藥與儀器

1.1 試藥 白花前胡藥材購自安徽省亳州市藥材市場，經安徽中醫藥大學謝冬梅副教授鑒定為傘形科植物白花前胡(P.Praeruptorum)的干燥根。所用試劑均為分析純。

1.2 儀器 AutoSpec-3000質譜儀：VG儀器公司；Bruker AM-400核磁儀：Bruker公司；分析型和制備型HPLC為Agilent 1100：美國安捷倫公司；柱層析和薄層層析硅膠：青島海洋化工廠生產；Sephadex LH-20：GE；ODS：日本YMC公司。

2 提取分離

白花前胡粗粉15 kg，95%乙醇滲漉，合并滲漉液，減壓濃縮至無醇味，水混懸后加乙酸乙酯等容積萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至浸膏(320 g)后，采用硅膠柱色譜以二氯甲烷/甲醇系統(100∶1-1∶1)進行梯度洗脫，得到A—G 7個流分。提取物B經硅膠柱色譜石油醚-丙酮系統(20∶1-1∶1)洗脫，得到提取物B1—B5 5個組分，提取物B2經葡聚糖凝膠純化，反復重結晶后得到化合物1(26 mg)和化合物2(18 mg)；提取物B3采用制備型HPLC分離，80%甲醇洗脫，得到化合物3(12 mg)和化合物4(10 mg)；提取物E經ODS柱(40%甲醇)洗脫，后反復經Sephadex LH-20柱純化，得化合物5(24 mg)。

3 結構鑒定

3.1 化合物1 黃色針晶；ESI-MSm/z247[M+H]+；1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δ：7.84(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.40(1H,s,H-5),6.72(1H,s,H-8),6.18(1H,d,J=9.6 Hz,H-3),4.75(1H,t,J=8.7 Hz,H-2′),3.26(2H,m,H-3′),1.32(3H,s,H-5′),1.26(3H,s,H-6′);13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δ：164.7(C-2),113.1(C-3),147.2(C-4),125.9(C-5),126.2(C-6),166.2(C-7),99.1(C-8),157.8(C-9),115.0(C-10),93.4(C-2′),31.2(C-3′),73.2(C-4′),26.3(C-5′),26.2(C-6′)。以上數據與文獻[8]報道一致，故確定其為異紫花前胡內酯(nodakenetin)。

3.2 化合物2 白色針狀結晶；EI-MSm/z244[M]+；1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δ：8.03(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.49(2H,m,H-5,6),6.95(1H,s,H-1′),6.39(1H,dd,J=1.2,9.6 Hz,H-3),1.65(6H,s,2×CH3);13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δ:162.8(C-2),115.1(C-3),146.8(C-4),125.1(C-5,109.7(C-6),158.6(C-7),118.6(C-8),149.3(C-9),114.5(C-10),98.2(C-1′),166.9(C-2′),69.7(C-3′),29.0(2×CH3)。以上數據與文獻[9-10]報道一致，故確定其為噢洛內酯(oroselol)。

3.3 化合物3 白色粉末；EI-MSm/z344 [M]+；1H-NMR(CDCl3,400 MHz)δ:7.60(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.33(1H,s,H-5),6.79(1H,s,H-8),6.25(2H,m,H-3,3″),6.00(1H,d,J=7.6 Hz,H-4′),3.90(1H,d,J=7.2 Hz,H-3′),1.52(3H,s,H-5′),1.37(3H,s,H-6′);13C-NMR(CDCl3,100 MHz)δ:169.1(C-1″),160.9(C-2),156.4(C-7),155.3(C-9),143.1(C-4),141.2(C-3″),128.3(C-5),126.2(C-2″),117.4(C-6),113.8(C-3),113.2(C-10),104.9(C-8),79.8(C-2′)73.8(C-3′),71.1(C-4′),25.8(C-5′),20.6(C-4″),20.0(C-6′),16.2(C-5″)。以上數據與文獻[11]報道一致，故確定其為紫花前胡素D(decursitin D)。

3.4 化合物4 淡黃色油狀物；EI-MSm/z344[M]+；1H-NMR(CD3OD,400 Hz)δ:7.84(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),7.40(1H,s,H-5),6.75(1H,s,H-8),6.22(1H,m,H-3),6.06(1H,d,J=7.6 Hz,H-4′),3.80(1H,d,J=7.2 Hz,H-3′),1.47(3H,s,H-5′),1.34(3H,s,H-6′);13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δ:168.0(C-1″),162.9(C-3″),160.1(C-2),158.0(C-7),156.4(C-9),145.5(C-4),130.0(C-5),120.0(C-6),116.5(C-2″),114.0(C-3),113.9(C-10),105.2(C-8),81.2(C-2′),73.8(C-3′),70.9(C-4′),27.5(C-5″),26.2(C-5′),20.8(C-6′),20.7(C-4″)。以上數據與文獻[11]報道一致，故確定其為Pd-C-Ⅱ。

3.5 化合物5 白色無定形粉末；ESI-MS:m/z593[M+Na]+；1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δ:7.94(1H,br.s,H-4),7.49(1H,s,H-5),6.82(1H,s,H-8),6.22(1H,br.s,H-3),1.31(3H,s,Me-12),1.13(3H,s,Me-13);13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δ:163.0(C-7),160.7(C-2),155.0(C-8a),145.2(C-4),125.7(C-6),124.5(C-5),112.7(C-4a),111.8(C-3),109.4(C-1″),97.6(C-1′),97.3(C-8),90.0(C-10),79.2(C-11),77.6(C-3″),77.3(C-3′),76.6(C-5″),75.4(C-5′),73.9(C-2′),73.7(C-2″),70.8(C-4″),68.5(C-6′),63.7(C-6″),29.6(C-9),23.7(C-12),21.2(C-13)。以上數據與文獻[12]報道一致，故確定其為marmesin-11-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside。

4 討論

本研究通過對白花前胡化學成分的研究，從中分離并鑒定了5個化合物，并通過波譜解析及化學方法等手段鑒定了化合物的結構，分別為異紫花前胡內酯、噢洛內酯、紫花前胡素D、Pd-C-Ⅱ、marmesin-11-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside，主要類型為香豆素類化合物，所有化合物均為首次分離得到。通過上述對白花前胡化學成分的進一步研究，有利于白花前胡有效成分的尋找和進一步闡明其藥理作用機制。可以為白花前胡開發利用提供參考。