植物內源RNAi抑制CRISPR編輯效率

2019年3月14日，深圳大學莫蓓莘教授研究組以擬南芥為模式植物，系統評估了內源RNAi對不同啟動子驅動的Cas9系統編輯效率的影響。研究結果顯示，組成型表達的強啟動子，如35S CaMV啟動子驅動的Cas9表達，受內源RNAi的影響較大，而胚特異性表達的啟動子，如EC1.2啟動子驅動的Cas9表達，則不受內源RNAi的影響。在擬南芥RNAi突變體rdr6、dcl2、dcl3、dcl4背景下，35S-Cas9系統的基因編輯效率較野生型（WT）背景下有顯著提高；基于此，利用人工miRNA（amiRNA）抑制擬南芥內源RNAi通路關鍵基因RDR6，將amiR-RDR6與Cas9元件構建在一起，可以有效提高35S-Cas9系統的基因編輯效率；同時，利用amiR-RDR6的發育表型，可有效地篩選不含Cas9 T-DNA插入的純合突變體。該研究為CRISPR/Cas9介導的農作物基因編輯技術的改良提供了新思路。

相關研究結果在線發表在《Science China Life Science》上。