代償期和失代償期肝硬化病人的腸道菌群分析

郭珍紅

（山西省長治市第二人民醫院 山西 長治 046000）

肝硬化是因為肝臟纖維化受損導致的肝臟病變情況，肝細胞組織纖維進程受到發病機制等各項因素的影響，代償期肝硬化屬于早期肝硬化階段，患者的肝臟各項指標并沒有明顯的改變，而由此患者也不會對疾病有所重視，這段時期患者的肝臟功能相較于健康群體并沒有明顯的差異性，患者也不會出現明顯不適癥狀[1]。待患者出現肝性腦病、靜脈曲張等癥狀時，便進入了失代償期肝硬化階段，病情逐漸發展為終末期肝病。臨床醫學中針對肝硬化患者的治療普遍采用非手術治療，會提高患者的存活率。針對肝功能評分不高的患者并不建議進行肝移植手術[2]。此項研究通過對肝硬化患者和健康對照群體腸道菌群的探討，采用對比論證法，分析代償期和失代償期肝硬化病人的腸道菌群，研究結果如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

此項研究對象為我院2017年1月—2018年12月肝硬化患者和健康對照群體，共計30例，20例肝硬化患者中，代償期肝硬化患者10例，失代償期肝硬化患者10例，健康對照組10例。肝硬化患者依照相應的影像學、臨床表現等肝病檢查指標進行診斷。失代償期肝硬化患者均滿足以下條件之一：（1）取樣存在腹水；（2）靜脈曲張；（3）肝性腦病；（4）存在上消化道出血。

1.2 方法

首先對樣品進行相應的處理，采集三組糞便標本后分為0.2g并做好保存。使用珠打斷法對DNA進行提取工作。經過濃度較高的SDS聯合鹽溶液，使用珠子對細菌予以敲打操作，對其進行破壁處理。將糞便放置螺帽管中進行冷凍，以不同溫度的水浴鍋進行離心。將雜質予以沉淀。

1.3 觀察指標

根據humann的算法，對比功能基本以及KEGG pathway數據，確保每條代謝路徑均有兩個以上KO基因；采用SOAP align version2.21，測序序列以及NCBI原核生物基因組的相應數據庫對比，對菌群豐富進行建立[3]。

1.4 統計學方法

此項研究的調查數據應用統計軟件SPP20.0進行分析，計量資料與計數資料分別用t檢驗與χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

擬桿菌門、厚壁菌門屬于較為優勢的菌群，分別在代償期肝硬化組所占菌群90.4%，失代償期肝硬化組所占菌群86.7%，健康對照所占菌群的94.2%；普通擬桿菌、普氏菌以及糞便擬桿菌所占菌群豐富，代償肝硬化組為26.4%，失代償肝硬化組為27.8%，健康對照28.7%。

肝硬化組（代償期肝硬化、失代償期肝硬化）和健康對照組，隨著疾病的加重菌群豐度也在增多，菌群豐度失代償期肝硬化＞代償期肝硬化＞健康對照組。

3.討論

腸道正常菌群有原籍菌、共生菌以及過路菌。原籍菌屬于專性厭氧菌，典型的有雙歧桿菌以及類桿菌，有免疫能力，對生物有拮抗能力；共生菌屬于兼性厭氧菌，典型的有腸桿菌和腸球菌，和原籍菌共生，一定條件下會具有侵蝕作用；過路菌典型的有假單胞菌和變形桿菌。肝硬化患者其免疫功能會有明顯的降低，并且腸蠕動也會有所緩慢，受到低蛋白血癥等因素的影響，腸系膜會有明顯缺血的情況，腸動力由此變慢，腸道菌群的平衡被打破[4]。研究表明，不同發病機制導致的肝硬化具有相近的腸道菌群，而腸道菌群的平衡被打破是因為肝硬化所致。比如典型的酒精型肝硬化相較于乙肝肝硬化，其普雷沃菌科含量較為豐富。基于門以及科的基礎上對肝硬化患者糞便菌群進行檢查過程中，肝硬化患者相較于健康群體，基于門的基礎上觀察，擬桿菌門會有明顯的降低，梭桿菌門以及變形菌門會有明顯的升高。基于科的角度進行分析，肝硬化患者韋榮球菌科、腸桿菌科明顯較多，毛螺旋菌科會有明顯的降低。有學者認為，宏基因組學對該類改變進行了確認，并且還指出肝硬化患者的超過一半的腸道菌群是從口腔來的。

乙狀結腸和肛管內的細菌較多，調查指出大概占糞便的百分之二十左右。健康群體的腸道內擬桿菌以及雙歧桿菌大約是總菌體的一半，腸球菌的比例相對較少。腸道菌群對免疫功能、腸蠕動等有積極影響，肝硬化患者的腸道菌群會有不同程度的失衡情況，其中厭氧雙歧桿菌會有明顯的降低，腸球菌、梭菌等會有增加。調查表明，機體菌群的失衡的相關程度和肝硬化的發病原因并沒有直接聯系。

機體真菌菌群較為豐富，有擔子菌門、壺菌門等。一般情況下，腸道菌群間共生、協同并且存在拮抗作用。調查指出，正常腸道細菌菌體能夠抑制真菌的繁殖。而由此分析，肝硬化患者菌群的平衡被打破，實則是細菌菌群的失衡。真菌菌群的失衡是基于腸道真菌感染。也有學者認為，通過對肝硬化失代償期患者腸道真菌的評估，患者均有使用抗生素史。肝硬化失代償期的腸道真菌出現感染相較于原疾病是存在一定相似性的，會出現誤診的情況。部分醫生由于并不了解真菌性腸炎，給予患者抗生素治療后，反而加重了患者的病情。經過對肝硬化患者無菌腹水的評估，經過真菌DNA測評，白假絲酵母菌是較為多見的真菌菌體，腹水、血清等檢查中，核苷酸片段相近程度較高。慢性肝衰竭患者其腸道菌群的平衡會被打破，雙歧桿菌以及乳桿菌的含量會有明顯的降低，腸桿菌科細菌等明顯升高。經過乙肝肝硬化、慢性乙肝肝炎等患者的檢查，酵母菌屬于較為優勢的均屬。研究表明，伴隨著患者疾病的加重，相應的真菌豐度會有明顯的升高，由此分析，真菌菌群的平衡被打破和乙肝病情加重有聯系。肝硬化患者較為常見的并發癥狀有自發性細菌性腹膜炎，而肝硬化患者也會引發肝性腦病，腸道菌群失去平衡、細菌感染等均是導致其發病的重要因素，存在感染的患者一定程度上會有認知功能上的障礙，出現敗血癥的患者其認知功能障礙會明顯升高。

綜上所述，隨著肝硬化患者病情的加重，其相應的菌群豐度會有明顯的增多，從基因豐富進行分析，基因呈現的多樣性和病情的情況存在一定聯系。