E-cadherin、P120ctn在乳腺癌組織中的表達及其意義

鄭 丹，范春妮，雷 影,邢 華

(吉林大學中日聯誼醫院 乳腺外科，吉林 長春130033)

乳腺癌是最常見的女性惡性腫瘤，侵襲和轉移是影響其生存率的主要因素。而細胞間的黏附失調是其關鍵步驟。E-cadherin作為主要的上皮細胞粘附分子，其表達缺失與許多腫瘤細胞的失分化和轉移密切相關。P120ctn是連環蛋白家族成員之一，能與E-Cad結合形成一個復合體，共同介導細胞黏附和信號轉導功能，在腫瘤轉移的過程中扮演了十分重要的角色，其異常表達與許多腫瘤發生發展密切相關。基于以上所述，本文主要對E-cadherin、p120ctn與乳腺癌病情進展的相關性予以綜述。

1 E-cadherin

1.1 E-cadherin的結構與功能

腫瘤的侵襲及轉移是一個級聯反應，細胞間的粘附及細胞與基質間的相互作用失控是其中一個至關重要的步驟，而細胞粘附分子則是介導這一過程的重要參與者。目前已發現50多種細胞粘附分子，分為5類：鈣黏素、整合素、CD44、選擇素、免疫球蛋白超家族。鈣黏素則是正常細胞中鈣依賴性細胞黏附的主要調控者。

E-鈣黏蛋白(E-cadherin， E-cad)屬于鈣黏素家族(cadherins)，1977年Takeichi[1]首次提出E-cadherin及其Ca2+粘附依賴性的報道。目前研究已證實,E-cad是一類Ca2+依賴性跨膜糖蛋白，它是建立和維持上皮極性和細胞-細胞間緊密連接的關鍵分子。E-cad 基因(CDH1)位于人類染色體 16q22.1上，它由細胞外區、跨膜區和細胞內區三部分構成。細胞膜外存在氨基酸末端，具有結合鈣離子的作用；細胞漿內存在羥基末端，部分與細胞質連環蛋白家族(catenin)結合建立鈣黏蛋白-連環蛋白的復合體[2]。此復合體可抑制上皮細胞個體運動，并在穩定組織架構中發揮重要作用。

1.2 E-cadherin與乳腺癌

乳腺主要由產生乳汁的頂部管腔上皮細胞和與乳腺基質相連的基底肌上皮細胞組成。乳腺細胞在分化過程中Cadherin的表達明確，且特異性高，管腔上皮細胞由E-cadherin 表達，而肌上皮細胞由P-cadherin表達。Derksen 等人[3]通過特異性敲除小鼠乳腺E-cad，結果顯示：E-cad缺失導致管腔上皮細胞凋亡和清除，雌鼠腺體功能受損。表明E-cad對乳腺的形成具有一定的重要性。

在上個世紀末，人們認為E-cad在上皮細胞中所起到的關鍵作用可能成為其抑癌功能的基礎。Behrens小組的研究指出，抑制E-cad功能足以誘導癌細胞分裂和侵襲[4]。包俊杰等人[5]采用免疫組織化學法檢測分析了乳腺癌癌旁組織及癌組織中E-cad的表達，結果顯示E-cad在癌組織中的表達低于其在癌旁組織中的表達。證明E-cad的低表達對乳腺癌的發生有重要作用。Berx等人[6]發現浸潤性小葉癌(ILC)組織中E-cad缺失，而大多數其他乳腺癌亞型則是E-cad表達。通過分析所有的ILC樣本，發現其中約有50%的體細胞的CDH1突變處于失活狀態。另外，其他類型的癌癥如前列腺癌、子宮內膜癌和浸潤性導管癌(IDC)顯示E-cad表達缺失，其野生型基因組成不變，但存在E-cad啟動子的甲基化[7]。此外，Petridis[8]通過回顧分析證明，在沒有遺傳性彌漫性胃癌(HDGC)家族史的女性中，雙側小葉原位癌(LCIS)早期發病與CDH1突變有關。由此可見CDH1突變可作為小葉原位癌的早期發病指征，所以提示臨床醫生對于沒有HDGC家族史的雙側LCIS/ILC早期發病的婦女應考慮進行CDH1突變篩查。目前一些研究顯示，大多數原發性乳腺癌及其轉移時其E-cad的表達下調，但在癌細胞轉移到遠處器官時E-cad會出現短暫的丟失。與之相反地是，在炎性乳腺癌的腫瘤微栓子中E-cad表達水平正常或升高[9]。那么E-cad表達水平是否與淋巴結轉移有關呢？Yu Z等人[10]回顧性分析得出結論：E-cad的低表達與乳腺癌患者淋巴結轉移及預后不良相關。另外，Zhan Li 等人[11]對乳腺癌中E-cad的表達與其預后之間的關系進行了薈萃分析，結果顯示：E-cadherin表達減少與其淋巴結轉移有顯著相關性，這一結果與Yu Z等人[12]的結論具有一致性。

2 P120ctn

2.1 P120ctn的結構及功能

連環蛋白(catenin)是具有相似結構的胞內蛋白家族,是一類黏附分子和細胞內信號分子，早期把其分為α-catenin、 β-catenin和γ-catenin三類，隨后p120-catenin(p120ctn，p120)作為細胞轉化中酪氨酸激酶Src癌蛋白的一種重要底物而被發現[13]。隨后證實，p120是位于細胞間連接處和細胞核的連環蛋白，其基因 CTNND1 位于 11q11，編碼分子量約為 120 kda，其多肽鏈中含有 11 個 由42個氨基酸殘基組成的Armadillo重復結構。正常情況下p120可與鈣粘蛋白的胞漿近膜端( (Juxta membrance domain JBD)結合構成鈣黏蛋白-連環蛋白復合體(cadherin-catenin comPlex，CCC)，介導細胞正常的信號轉導及黏附功能[14]，但細胞間的黏附功能是一個動態調節平衡的過程，受到眾多的細胞內外信號轉導的影響[15]。

Kourtidis 等[16]的實驗結果顯示，磷酸化后p120在細胞內的分布發生了變化，膜表達減弱，細胞質表達增強，細胞黏附能力下降。p120磷酸化位點是p120與E-cad結合的關鍵位點,磷酸化將影響 CCC 的穩定性。去除 p120 N-端結構可以使大部分磷酸化位點缺失的黏附作用得到恢復。

Kaiso轉錄抑制因子是屬于POZ/ZF轉錄因子超家族，該家族中的一些蛋白與胚胎發育、細胞分化和腫瘤相關的現象有關 。Kaiso作為新興的轉錄抑制因子,有研究表明它可以抑制Wnt信號通路的靶基因，而p120可以通過多種不同的機制定位到細胞核中，導致Kaiso轉錄抑制得到約束及解除，間接調節規范Wnt信號[17]。

Rho GTP 酶是Ras超家族的一員，目前約有20余種被發現,其中研究較多的有：RhoA、Rac1和Cdc42。它們在細胞運動中各自發揮不同的作用。 Rac1 和Cdc42的激活可增加細胞間的黏附并降低上皮細胞的能動性。Rho-A的活化則可引起彈性纖維和粘著斑的形成增強細胞間粘附。p120通過抑制RhoA ,活化 Rac1和Cdc42來調控Rho GT酶的活性。研究[18]表明,胞質中的p120可以通過促進生長因子誘導RhoA活化，誘導應力纖維形成，增加遷移。

2．2 P120與乳腺癌

近年來，通過研究發現，p120不僅介導腫瘤的黏附及信號傳導，還與乳腺發育密切相關，Kurley 等人[19]在小鼠乳腺發育的過程中敲除p120，結果顯示小鼠乳腺發育延遲甚至喪失，揭示了p120在乳腺發育過程中的重要作用。并且p120的表達及分布異常導致了腫瘤的發生、進展。Dabbs 等人[20]提出，p120的表達和定位可用于乳腺癌的鑒別診斷。例如E-cadherin缺失和隨后p120異位于胞質是浸潤性小葉癌(ILC) 的典型特征，而浸潤性導管癌(IDC)主要定位于胞膜。Sarrio等人[21]分析 326 例小葉乳腺癌患者,發現有88%的小葉癌p120是定位于胞質,相比之下，在導管癌中，胞質p120染色很少見。再次證明，通過p120的定位可區分乳腺癌的病理分型。除此之外，還有研究[22]表明P120的異常表達與多種惡性腫瘤的侵襲和轉移有關。黃榮等人[23]研究示：p120的表達與淋巴結轉移、臨床分期均有明顯相關性，p120表達與腫瘤組織學分級及ER、PR表達未見明顯統計學意義。進而猜想p120的異常表達可能反映了乳腺浸潤性導管癌的侵襲性生物學行為。而李明雷等人[24]的研究表明p120的異常表達與淋巴結轉移、ER、PR和核分裂指數相關,與黃榮等人[23]的研究不相符，所以p120與ER、PR表達的相關性有待進一步研究。

3 E-cad/P120ctn復合體與乳腺癌

目前已有許多研究發現惡性腫瘤中的E-cad/p120ctn復合體結構的不完整性，并且其表達的下降與病理分型、疾病進展，甚至在信號傳導作用有關。有作者認為， p120可作為可變性電阻器或調定點來影響所有cadherin 的細胞水平[25]。近期有學者通過研究分析得到：糖蛋白(90K)的上調可促進E-cad/p120ctn復合物的解離，導致E-cad蛋白酶降解，從而使融合度低的腫瘤細胞中的粘附連接不穩定。從而猜想，這可能是血清中90K高表達的癌癥患者預后不良的潛在機制[26]。Pham等人[27]通過transwell遷移和侵襲實驗評估PKCα和FOXC2對遷移和侵襲的影響得出：p120的缺失導致粘附連接處E-cad的去穩定化。而抑制PKCα或FOXC2足以挽救p120表達并引發p120和E-cad重新定位于細胞膜，導致腫瘤細胞遷移和侵襲減少。這一結論表明乳腺癌轉移可能部分通過PKCα/ FOXC2依賴性抑制p120來控制。還有研究人員提出了：E-cad的失活導致p120在多種腫瘤中的胞質易位，并與惡性腫瘤的發生有關的觀點[28]。目前E-cad的異常表達對 p120的作用及兩者時序性調控的研究尚欠缺，有待進一步研究。