中藥飲片對多重抗生素耐藥細菌的抑菌作用

程 程

（遼陽市中心醫院中藥局，遼寧 遼陽 111000）

全球范圍內抗生素濫用的情況越來越嚴重，我國屬于抗生素應用率最高的國家。濫用抗菌藥物導致的必然結果為細菌耐藥，最近幾年，多重耐藥或泛耐藥菌感染十分常見，檢出率也呈上升的發展趨勢[1]。對于普通細菌感染來說，多重耐藥菌感染的死亡風險顯著提高，占普通感染的2～3倍。中醫藥對感染性疾病的診斷與治療經驗比較豐富，多數中藥被證實存在抑菌藥理學效果[2]。中醫學注重整體性，重視人和自然之間的相互關系，中藥有多種成分、多種途徑以及多個環節等特點，能夠在總體上使機體免疫能力顯著增強，可使多重耐藥菌的發病風險有效降低。中藥屬于抗感染新藥篩選與研發的重要來源[3-4]。本研究探究了中藥飲片對多重抗生素耐藥細菌的抑菌作用，報道如下。

1 資料與方法

1.1 藥材與藥品：左氧氟沙星、阿奇霉素、頭孢噻肟鈉、硫酸慶大霉素生產廠家分別為山東魯抗制藥、西安利君制藥、齊魯制藥、山東魯抗制藥，全部重要都由本院藥劑科提供。

1.2 試驗菌種：①大腸桿菌ATCC25922屬于標準敏感菌種，在實驗室保存；②大腸桿菌S屬于臨床分離的敏感菌種；③大腸桿菌R屬于臨床分離的耐藥菌種，對頭孢吡肟、丁胺卡那以及慶大霉素等多種抗生素存在耐藥性。

1.3 培養基：MH培養基或營養瓊脂，來自南京一基生化科技有限公司。

1.4 中藥飲片水煎液制備方法：利用傳統方法煎煮中藥飲片，把適量的飲片在砂鍋中放置，添加水倒入高處藥材40 mm左右，浸泡半小時后，用中火煎煮半小時，倒出藥液，過濾處理，選取濾液，在4 ℃的冰箱內保存，用于備用。

1.5 中藥平板制作方法：制作含中藥的MH培養基，分為為400、200、100、50、25、12、5、6.25、3.125 mg/mL，于高溫下濕熱滅菌處理30 min左右，傾入平板，制備成含有中藥梯度的平板。

1.6 最低抑菌濃度的測定方法：吸收10 μL新鮮的菌懸液點種在不同中藥平板上，在37 ℃下培養1 d，對不同菌種的生長趨勢密切觀察，對最低抑菌濃度予以計算。抗生素最低抑菌濃度根據《微生物學試驗指導》中的稀釋法予以計算。

2 結 果

2.1 菌種對抗生素敏感度分析：一方面，臨床分離菌種對抗生素的敏感度。借助藥敏紙片法測定抗生素的耐受性，結果說明臨床分離耐藥性大腸桿菌屬于多種耐藥菌種；另一方面，大腸桿菌的標準敏感菌種與臨床分離大腸桿菌敏感菌種對抗生素敏感度的對比分析，結果顯示：大腸桿菌ATCC25922對慶大霉素、頭孢噻肟鈉、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌濃度分別為0.1、0.20、1.2、0.2 μg/mL；大腸桿菌S對慶大霉素、頭孢噻肟鈉、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌濃度分別為0.1、0.12、1.2、0.12 μg/mL；大腸桿菌R對慶大霉素、頭孢噻肟鈉、阿奇霉素、左氧氟沙星的最低抑菌濃度分別為超過6.3 μg/mL、超過16.5 μg/mL、超過19.5 μg/mL、超過15.5 μg/mL。臨床分離的敏感菌種與標準的敏感菌種對抗生素的敏感度一致，沒有顯著性差異。說明臨床分離的耐藥菌與敏感菌在后續的中藥試驗中都可適用。

2.2 中藥對耐藥菌與敏感菌的最低抑菌濃度：分析常見的8種中藥材對臨床分離的耐藥菌與敏感菌的最低抑菌濃度，如下：①魚腥草對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；②桑白皮對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為225、225 mg/mL；③枇杷葉對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；④柴胡對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為450、450 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為225、225 mg/mL；⑤決明子對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為225、120 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為32、32 mg/mL；⑥連翹對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為225、225 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為155、155 mg/mL；⑦黃芩對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為15、32 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為15、32 mg/mL；⑧甘草對大腸桿菌S的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為250、250 mg/mL；大腸桿菌R的Exp.1與Exp.2最低抑菌濃度分別為60、60 mg/mL。

3 討 論

按照相關文獻顯示：中藥對臨床分離的敏感菌與標準敏感菌的最低抑菌濃度有一定程度不同[5]。所以，本研究對分離的敏感菌與耐藥菌一同進行試驗，說明力更強。并且此次研究在試驗前與試驗后檢測了實驗菌種的敏感度以及耐藥性情況，結果說明試驗菌種都滿足要求，說明所用菌種可在中藥抑菌試驗中應用，所得結果具有較高的可信度[6-7]。

研究顯示：臨床分離的敏感菌種與標準的敏感菌種對抗生素的敏感度一致，差異性不顯著；臨床分離的耐藥菌與敏感菌在后續的中藥試驗中都可適用；大部分中藥對敏感菌與耐藥菌的抑菌作用沒有顯著差異，其中，僅有決明子、甘草以及連翹的抑菌差異顯著，且與敏感菌相比，耐藥菌對重要的敏感度更強。

總而言之，僅有部分中藥對敏感菌與耐藥菌的抑菌效果存在差異，且耐藥菌比敏感菌對中藥的敏感度更高，說明中藥對細菌感染疾病的治療更具優勢，尤其是抗生素治療不成功時，中藥治療的臨床價值更顯著。