非器質性失眠癥患者氧化應激水平研究

王新源，陳 強*，潘 燕，李 玲，佘 琴

非器質性失眠癥（失眠癥）是以頻繁而又持續的入睡困難和/或睡眠維持困難并導致睡眠感不滿意為特征的睡眠障礙［1］。近年來，氧化應激與失眠的相互關系正逐漸成為人們研究的一個方向。氧化應激是指機體在遭受各種有害刺激時，體內高活性分子如活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species，RNS）產生過多，超出機體氧化物的清除能力，使得氧化與抗氧化系統失衡，細胞進入氧化應激狀態，從而繼發細胞損傷［2］。研究表明，大腦的自由基在日間醒覺狀態時進行積累，在睡眠期間進行清除［3］。睡眠期間過多自由基的清除是通過減少自由基的生成及增加內源性抗氧化機制完成的，但氧化應激與失眠癥之間的關系目前仍未闡明。本研究旨在分析失眠癥患者氧化應激水平的變化，從而探討其是否與失眠癥的發病存在一定的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2015年1月—2017年3月在新疆精神衛生中心睡眠醫學科就診的失眠癥患者78例作為失眠癥組。納入標準：（1）符合國際疾病分類標準編碼（ICD-10）有關失眠癥的診斷標準［4］；（2）匹茲堡睡眠質量指數（Pittsburgh Sleep Quality Index，PSQI）總分≥7分［5］；（3）年齡18～60歲；（4）認可并簽署知情同意書，且能夠理解和遵守研究的要求。排除標準：（1）腦器質性精神障礙者；（2）精神活性物質或非成癮物質所致精神障礙者；（3）嚴重的軀體疾病或神經系統疾病者；（4）近期有創傷或近1周內有感染或發熱者；（5）其他睡眠疾病及特殊的短睡者。

選擇同期新疆精神衛生中心健康職工76例作為對照組。納入標準：（1）年齡 18～60歲；（2）PSQI總分＜7分；（3）認可并簽署知情同意書。排除標準：（1）患有嚴重軀體疾病者；（2）患有符合ICD-10診斷標準的精神障礙或既往有精神障礙病史者；（3）現在或既往有物質依賴或物質濫用者；（4）三代直系親屬中有精神障礙者。本研究方案通過新疆精神衛生中心倫理委員會批準。

1.2 研究方法

1.2.1 入組診斷及量表評定 所有入組人員均經2名睡眠?？频母吣曩Y醫師檢查，按ICD-10中失眠癥的診斷標準［4］同時診斷，PSQI評分按規范操作同時評定。PSQI由23個條目構成，分為7個成分，包括睡眠質量、入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物及日間功能障礙，每個成分按0～3分計分，各成分評分相加為PSQI總分，總分0～21分，總分越高提示睡眠質量越差，臨床以PSQI總分≥7分為睡眠障礙［5］。采用自制一般資料調查問卷收集兩組的一般資料，包括性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況。

1.2.2 實驗室檢查

1.2.2.1 血清樣本 所有受試者在晨起空腹安靜狀態下，用高壓蒸汽滅菌后的10 ml試管抽血樣品至少5 ml，室溫靜置，3 h內離心，離心半徑15 cm，2 000 r/min離心20 min，分離血清2～3 ml，置-80 ℃醫用冰箱備用。

1.2.2.2 試劑及檢測方法 過氧化氫酶（hydrogen pemxidase，CAT），型號A007-1試劑盒；谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX），型號A005試劑盒；丙二醛（malondiadehycle，MDA），型號A003-1試劑盒；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD），型號A001-3試劑盒；均購自南京建成科技有限公司。所有樣本由同一人測定，測定過程嚴格按照試劑盒提供的實驗方法進行操作，每個樣本測定3次，取平均值。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件對數據進行統計分析。呈正態分布的計量資料以s）表示，方差齊時組間比較采用t檢驗，方差不齊時組間比較采用t'檢驗。計數資料以相對數表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 失眠癥組與對照組一般資料比較 兩組性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況比較，差異無統計學意義（P＞0.05，見表1）。

2.2 失眠癥組與對照組PSQI評分比較 失眠癥組PSQI總分及各成分評分均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.001，見表 2）。

2.3 失眠癥組與對照組氧化應激指標比較 失眠癥組CAT、GSH-PX、SOD的活性水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.001）；失眠癥組MDA的活性水平與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05，見表3）。

表3 失眠癥組與對照組氧化應激指標比較s）Table3 Comparison of oxidative stress indices between nonorganic insomnia group and control group

表3 失眠癥組與對照組氧化應激指標比較s）Table3 Comparison of oxidative stress indices between nonorganic insomnia group and control group

注：CAT=過氧化氫酶，GSH-PX=谷胱甘肽過氧化物酶，MDA=丙二醛，SOD=超氧化物歧化酶；a為t'值

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3 討論

目前認為慢性失眠是過度警覺性障礙，與下丘腦-垂體-腎上腺素軸過度活動有關［6］。在生理狀態下，氧化應激與抗氧化酶防御系統處于平衡狀態。研究表明，氧化應激是抑郁癥神經元的凋亡、神經退行性改變、神經元可塑性改變的重要原因［7］；氧化應激可導致細胞發生線粒體等多方面的變化，修飾堿基，誘導其氧化損傷，造成復制及自我修復時發生錯配［8］。脂質過氧化產物對細胞具有毒性作用，可誘發中樞神經系統疾?。?］。抗氧化酶防御系統包括CAT、GSH-PX及SOD，這些酶通過清除自由基保護機體免遭過氧化損傷，有清除氧化物、保護機體的作用。

既往研究顯示氧化應激反應的影響因素很多，如感染、過敏、應激等軀體情況［9］。自由基及抗氧化酶水平的變化與年齡、生活習慣（如吸煙、飲酒）等因素有關［10］。本研究兩組性別、年齡、吸煙情況、飲酒情況無差異，可排除這些因素的干擾。動物睡眠剝奪實驗表明，睡眠剝奪與氧化應激關系密切，睡眠剝奪可引起大腦的氧化損傷。由于細胞膜存在高容量的不飽和脂肪酸和較低的抗氧化能力，大腦對氧化損傷極為敏感［11］。短期（1～2周）的睡眠剝奪與任何腦組織的蛋白氧化及脂質過氧化均沒有關系［12-13］。大腦能對應激做出有效的反應，從而可以避免氧化損傷［14］。大腦細胞抗氧化成分水平的降低，可能引起外周血液抗氧化成分水平的降低［15］。本研究失眠癥組患者失眠時間均在4周以上，結果表明除MDA外，CAT、GSH-PX及SOD的活性水平均降低，提示大腦存在氧化損傷。而失眠癥組PSQI總分及各成分評分均高于對照組，提示失眠可能是大腦氧化損傷的危險因素，充分的睡眠有益于大腦功能恢復。

本研究存在一些不足：（1）缺乏多導睡眠（PSG）的篩查，此方法可對失眠癥患者的臨床診斷提供客觀依據。（2）本研究結果未排除可能導致失眠癥患者氧化應激水平升高的其他潛在影響因素，如大腦氧化損傷與失眠是否存在雙向關系，是否可通過降低顱內氧化水平改善睡眠。

表1 失眠癥組與對照組一般資料比較Table1 Comparison of general personal data between nonorganic insomnia group and control group

表2 失眠癥組與對照組PSQI評分比較s，分）Table2 Comparison of PSQI score between nonorganic insomnia group and control group

表2 失眠癥組與對照組PSQI評分比較s，分）Table2 Comparison of PSQI score between nonorganic insomnia group and control group

注：PSQI=匹茲堡睡眠質量指數；a為t值

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作者貢獻：陳強負責文章的構思與設計、研究的實施與可行性分析、文章的質量控制及審校、論文撰寫及修訂；王新源、潘燕負責數據整理、統計學處理、結果的分析與解釋；李玲、佘琴負責數據收集。

本文無利益沖突。