基于環介導等溫擴增技術檢測社區獲得性肺炎病原體的應用研究

馮遠軍 黃靜

563000貴州航天醫院，貴州遵義

在臨床中，社區獲得性肺炎為常見疾病，具有傳染性。重癥社區獲得性肺炎患者具有較高的死亡率，病情發展迅速，容易出現因溶血功能障礙、呼吸衰竭等引發的彌漫性血管內凝血情況，以及引發膿毒性休克、膿毒血癥，危及患者生命健康。社區獲得性肺炎具有高發率，對人們的健康造成嚴重影響[1-2]。本研究對社區獲得性肺炎患者進行環介導等溫擴增技術檢測，探究病原體檢查靈敏度、特異度、陽性預測值與陰性預測值，為診斷與治療提供參考。現報告如下。

資料與方法

2017年1月-2018年12月收治社區獲得性肺炎患者86例，男48例，女38例；年齡31～69 歲，平均(42.1±3.9)歲。所有患者均簽署知情同意書。

納入標準：①確診為社區獲得性肺炎；②無非感染性疾病；③無肺結核；④無HIV感染；⑤無其他嚴重疾病。

方法：①采集患者支氣管肺泡：對不同癥狀患者采取不同灌洗方法，肺部感染局限性病變灌洗支氣管肺段，彌漫性間質性病變灌洗右肺中葉與左肺舌葉。進行局部麻醉，植入纖維支氣管鏡，推注生理鹽水25～50 mL/次，總推注量為100～250 mL，推注后負壓吸引，回收液體，保存于-80℃冰箱中，送往實驗室檢查。②痰液標本：切開患者氣管，將無菌導管插入人工氣道，收集呼吸道分泌物作為實驗室研究標本。在獲取痰液時需要注意吸痰操作，不采取負壓操作，避免采集到非呼吸道標本。同時每次吸痰時間在15 s 以下，反復開放與關閉壓力孔，慢慢吸取呼吸道分泌物，避免對患者造成嚴重影響，避免出現心跳驟停與缺氧情況。痰液采集后將其裝入EP管中，其中含有0.5 mL細菌保存液，而后將其分成3 份送至實驗室培養檢測，標注好信息，保存于-80℃冰箱中。③環介導等溫擴增技術檢測：將600 mL 灌洗液與痰液放入滅菌離心管中做好標記，并加入600 mL 等體積NaOH溶液，混勻后放置核酸提取儀中搖動液化。再將其放至離心機中離心，10 000轉/min，離心5 min。留沉淀物，并加入生理鹽水洗滌，再次離心，10 000 轉/min，離心5 min。棄上清液，100 mL Tris EDTA 懸浮，核酸提取儀震蕩裂解15 min，震蕩液離心1 mL 得核酸。選取社區獲得性肺炎常見12 種病原體進行序列設計，將患者標本核酸與其對比。

觀察指標：觀察病原體檢測結果，對比12 種社區獲得性肺炎常見病原體，確定病原體；而后將檢測結果與實驗室培養檢測結果進行對比，分析環介導等溫擴增技術檢測的特異度與靈敏度、陽性預測值與陰性預測值[3-4]。

統計學方法：數據應用SPSS 21.0 軟件處理；計數資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

86例患者經實驗室培養檢測均確診為社區獲得性肺炎，其中陰性31例(36.0%)，陽性55例(64.0%)。經過環介導等溫擴增技術檢測檢出概率較高的為：銅綠假單胞菌20例(23.3%)，肺炎克雷伯菌19例(22.1%)，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌15例(17.4%)，嗜麥芽窄食單胞菌13例(15.1%)和鮑曼不動桿菌12例(14.0%)。而環介導等溫擴增技術檢測結果與痰液實驗室培養檢測結果相比，其靈敏度為95.8%，特異度為67.2%，陽性預測值為81.5%，陰性預測值為97.0%。

討 論

社區獲得性肺炎具有傳染性，對患者及家屬的健康與生活有著嚴重影響，而盡早確定病情，并檢測出病原體，可以采取針對性的措施進行治療，效果顯著。但近年來隨著抗感染藥物的不斷應用，臨床中出現了很多有耐藥性的病原體，影響治療效果以及病情恢復，因此社區獲得性肺炎病原體檢測成為治療的關鍵環節。對社區獲得性肺炎進行早期診斷，并及時采取措施進行治療，可提高治療效果，降低死亡率，但為降低抗生素耐藥性，需要了解病原體，制定合理有效的治療方案，提高治療效果。環介導等溫擴增技術檢測對病原體有著較高的靈敏度，且該檢測方法操作簡單，方便快捷，實驗室操作人員技術要求較低，上手較快。同時環介導等溫擴增技術的檢測準確度相對較高，對社區獲得性肺炎病原體檢測有重要價值[5-6]。

實驗結果表明，環介導等溫擴增技術檢測社區獲得性肺炎患者病原體準確率較高，靈敏度與特異度也相對較高，銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等常見病原體檢出率也相對較高。表明環介導等溫擴增技術檢測對社區獲得性肺炎病原體的檢測價值較高，準確性較高，值得作為常用檢測方式，對治療有重要意義，有望代替社區獲得性肺炎病原體的傳統檢測方式。