持續(xù)性高耗氧量運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠全血粘度和生化指標(biāo)的影響

袁 茵，鄧思瑤，黃雅晨，肖洪彬，牛雯穎

高脂血癥是一種脂代謝紊亂疾病，可以誘發(fā)高血壓、糖尿病和血栓疾病等并發(fā)癥。高脂血癥的年輕化、常態(tài)化已經(jīng)嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。合理的運(yùn)動(dòng)配合適當(dāng)?shù)乃幬餆o(wú)疑成為最佳的治療方式。隨著人們運(yùn)動(dòng)意識(shí)的提高，伴隨著運(yùn)動(dòng)形式也多種多樣。其中，跑步運(yùn)動(dòng)是日常常見的運(yùn)動(dòng)形式之一。因此，為探究跑步運(yùn)動(dòng)對(duì)機(jī)體的影響，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)量大鼠血液粘度和生化指標(biāo)展開研究，具體情況如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物

清潔級(jí)雄性SD大鼠12只，體重200-220g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào) SCXK(黑) 2013004。

1.2 主要儀器

ZH-PT動(dòng)物實(shí)驗(yàn)跑臺(tái)，安徽正華生物儀器設(shè)備有限公；LBY-N7500B型全自動(dòng)血液流變儀，北京普利生儀器有限公司；Glamour2000 全自動(dòng)生化儀，美國(guó) MD 儀器公司；C2000-A全自動(dòng)血凝儀，北京普利生儀器有限公司；LBY-NG4A型全自動(dòng)血小板聚集儀，北京普利生儀器有限公司;BECKMAN 超速離心機(jī)，美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

TG 試劑盒 ( 批號(hào): 167571) ， CHO 試劑盒( 批號(hào): 161951) ， HDL-C 試劑盒 ( 批號(hào):160631) ， LDL-C 試劑盒( 批號(hào): 160681) ，均購(gòu)于中生北控生物科技股份有限公司; FIB試劑盒(批號(hào)：1321071)，上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組與訓(xùn)練方法

12只大鼠隨機(jī)分為兩組，即正常組和跑步實(shí)驗(yàn)組。正常組大鼠自由進(jìn)食進(jìn)水，正常飼養(yǎng)。跑步實(shí)驗(yàn)組適應(yīng)性訓(xùn)練一周，令跑步實(shí)驗(yàn)組大鼠的跑步速度可以達(dá)到30m/min。正式實(shí)驗(yàn)每天以坡度0， 適應(yīng)性逐漸加速至30m/min跑步180min，同時(shí)開啟電刺激并伴有機(jī)械刺激，中間休息5min[3][4][5][6][7]。給予正常食量的1/3,自由飲水。于第20天訓(xùn)練后禁食不禁水12h，次日以烏拉坦 1 g·kg- 1麻醉，固定，取血進(jìn)行血液流變學(xué)和生化等相關(guān)指標(biāo)測(cè)定。

2.2 測(cè)定指標(biāo)及方法

大鼠的體重測(cè)定 訓(xùn)練前、適應(yīng)性訓(xùn)練結(jié)束及最后1天分別測(cè)定體重一次。

全血粘度測(cè)定 取肝素鈉抗凝血1ml，用全自動(dòng)血液流變儀測(cè)定全血粘度。

生化指標(biāo)測(cè)定 取檸檬酸鈉抗凝血1ml，3000r/min離心10min，吸取上層血漿400ul，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。

纖維蛋白原測(cè)定 取檸檬酸鈉抗凝血1.5ml,3000r/min離心10min,吸取上層血漿,用全自動(dòng)血凝儀測(cè)定。

血小板最大聚集率測(cè)定 取檸檬酸鈉抗凝血1.5ml, 1000r/min離心10min,制備富含血小板血漿(PRP),剩余部分3000r/min離心15min,制備乏血小板血漿(PPP),以ADP為誘導(dǎo)劑,測(cè)定1min最大聚集率。

2.3 統(tǒng)計(jì)處理

3 結(jié)果

3.1 訓(xùn)練前后大鼠體重的變化

與正常組比較，訓(xùn)練前兩組大鼠體重?zé)o明顯的差異性，訓(xùn)練后，跑步組大鼠體重明顯降低(p<0.01)，見表1。

表1 跑步組和正常大鼠的體重比較

注：與正常組比較*p<0.05，**p<0.01(下同)

3.2 全血粘度

與正常組比較，跑步組全血粘度無(wú)顯著性差異(p<0.05)。但是由表2可見，跑步組低切變率明顯低于正常組，中切變率和高切變率高于正常組，但是差別不大，見表2。

表2 跑步對(duì)正常大鼠全血粘度(mPa.s)的影響

3.3 生化指標(biāo)

與正常組比較，跑步組總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均顯著降低(p<0.05)，見表3。

表3 跑步對(duì)正常大鼠CHO、TG、HDL-C、LDL-C的影響

表4 跑步對(duì)正常大鼠Fib、PAg的影響

3.4 纖維蛋白原和血小板聚集

由表4可見，跑步組和正常組比較，纖維蛋白原(FIB)含量顯著降低(p<0.05)，血小板最大聚集率(PAGm)明顯下降。

4 討論

全血粘度是宏觀上反應(yīng)血液流變學(xué)的重要參數(shù)，通過(guò)不同的切變率表示血液流動(dòng)的阻力大小[8]。全血粘度增高在臨床上客觀引起中風(fēng)，心絞痛，急性心肌梗塞，高脂血癥，血栓閉塞性脈管炎等疾病。CHO、TG、HDL-C和LDL-C是檢測(cè)血脂的重要指標(biāo)。其中，HDL-C、LDL-C是一種載脂蛋白，血漿中的膽固醇、甘油三酯具有疏水性，通過(guò)與載脂蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)。HDL-C被稱為“血管清道夫”，是冠心病的保護(hù)因子。LDL-C是血漿中膽固醇含量最高的脂蛋白，載有血漿70%的膽固醇，所以，LDL-C的多少直接影響血液中膽固醇的含量[1]。血栓的形成與血小板活化和纖溶系統(tǒng)異常密切相關(guān)。正常情況下血小板不表達(dá)，受到外界刺激時(shí)被活化，從而發(fā)生粘附、聚集、釋放、吸附。ADP是引起血小板聚集最重要的物質(zhì)，所以可以通過(guò)測(cè)定ADP 誘導(dǎo)血小板最大聚集率來(lái)宏觀判斷血小板的凝血作用。纖維蛋白參與血栓形成的最后一步。Fib是纖維蛋白的前體物質(zhì)，在肝臟中合成游離于血漿的蛋白質(zhì)。所以 Fib在血栓和動(dòng)脈粥樣硬化形成中起到重要作用[2]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示持續(xù)性高耗氧量運(yùn)動(dòng)可以顯著降低正常大鼠體重，對(duì)全血粘度和血小板聚集率的影響不大，但是低切率和血小板聚集率有降低的趨勢(shì)。說(shuō)明持續(xù)性高耗氧量運(yùn)動(dòng)可能改變的是在紅細(xì)胞聚集的情況下的紅細(xì)胞變形能力和改變血小板聚集程度從而影響血液粘度。 CHO、TG、LDL-C和Fib顯著性降低，HDL-C顯著性升高。CHO、TG和LDL-C顯著性降低而HDL-C增高，提示持續(xù)性高耗氧量運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠血脂有明顯的改善作用，同時(shí)降低心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。有臨床研究顯示，fib與總膽固醇濃度呈正相關(guān)。Fib的顯著性降低，提示此方法可以作為高脂血癥患者的輔助治療，且效果顯著。此方法對(duì)于血細(xì)胞和血小板的作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究，從而為高脂血癥患者及亞健康人群提供運(yùn)動(dòng)依據(jù)。