豬偽狂犬病的分析診斷和防治方案

馬向紅，張新建

（河南省上蔡縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 上蔡 463800）

偽狂犬病又稱阿氏病，是由病毒引起的家畜和野生動物的一種惡性傳染病。豬是本病的自然宿主和貯存者，感染本病的豬，由于年齡不同，其臨床癥狀也有所差異。哺乳仔豬出現(xiàn)發(fā)熱、神經(jīng)癥狀，病死率甚高，常可高達(dá)100%；成年豬呈隱性感染；妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)。文章部分分析和闡釋了豬偽狂犬病的病原、癥狀、診斷和防治措施。

1 病原特性

偽狂犬病病毒呈圓形，直徑為100～150 nm，具有脂蛋白囊膜與纖突，常存在于腦脊髓組織中。感染豬在發(fā)熱期，其鼻液、唾液、奶、陰道分泌物、血液、實(shí)質(zhì)器官中都含有病毒。偽狂犬病病毒只有一個血清型，但各毒株之間存在差異。

2 典型癥狀

病豬的主要表現(xiàn)為體溫升高，可達(dá)41℃，精神沉郁，呼吸困難，食欲不振，嘔吐，流涎，下痢等常見癥狀。與其他動物不同，豬感染本病大多無明顯的局部瘙癢現(xiàn)象，但有的仔豬則出現(xiàn)。＜2周齡的乳豬發(fā)病后多以神經(jīng)癥狀為主癥，病豬肌肉震顫，步態(tài)不穩(wěn)，四肢運(yùn)動不協(xié)調(diào)，眼球震顫，間歇性痙攣，后軀麻痹，有前進(jìn)或后退或轉(zhuǎn)圈等運(yùn)動，常伴有癲癇樣發(fā)作，呈現(xiàn)游泳狀姿勢及昏睡等現(xiàn)象，神經(jīng)癥狀出現(xiàn)后1～2 d內(nèi)死亡，病死率可達(dá)100%。3～4周齡乳豬感染后神經(jīng)癥狀較輕，死亡率降低。病豬的眼結(jié)膜潮紅，角膜混濁，眼瞼水腫，甚至兩眼呈閉合狀；鼻盤、口腔和顎部常見大小不一的水皰、潰瘍和結(jié)痂。剖開口腔常見扁桃體腫大并有不同程度的壞死。妊娠母豬感染時常發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎和木乃伊胎等。流產(chǎn)、死產(chǎn)的胎兒大小相差不顯著，無畸形胎，有時娩出的胎兒全部木乃伊化。臨床上具有明顯神經(jīng)癥狀的仔豬，剖檢大腦常見軟腦膜血管充血，水腫，出現(xiàn)非化膿性腦炎變化的特點(diǎn)。

3 診斷要點(diǎn)

一般根據(jù)病豬的流行特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化，特別是廣泛性非化膿性腦炎及嗜酸性包含體的檢出而初步診斷，必要時可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查予以確診。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

偽狂犬病的實(shí)驗(yàn)診斷，常用的方法有核內(nèi)包涵體檢查、動物接種、雞胚接種、組織細(xì)胞培養(yǎng)中和試驗(yàn)、免疫熒光染色、免疫酶染色、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、Dot-ELISA及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。

病料采集。核內(nèi)包涵體檢查：可采集脾、淋巴結(jié)、咽喉部黏膜作觸印片或石蠟切片，以H.E染色后，進(jìn)行顯微檢查。在淋巴細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)有核包涵體，即作為診斷依據(jù)。抗原檢查：可采集病死豬或病豬發(fā)熱期腦組織（中腦、腦橋和延腦）、扁桃體、頸段脊髓。血清學(xué)檢查：可采集發(fā)病后期的血液，使其自然凝固，收取血清供檢查之用。

試驗(yàn)方法：易感動物接種試驗(yàn)：從病死仔豬或發(fā)熱期病豬，以無菌手術(shù)取腦（或脊髓、心、肝、脾、腎、肺、扁桃體等）剪碎，稱重后以組織勻漿機(jī)充分研磨，以生理鹽水或pH 7.2的PBS做成10%懸浮液，同時每mL懸液中加青、鏈霉素1 000 U，置4℃冰箱中，12～14 h。以3 000 r·min-1，離心30 min，上清液即為待檢病毒液。然后以上清液接種家兔2只，每只皮下注射2.0 mL。如豬死于偽狂犬病，則在接種后48～72 h，注射部位的皮膚發(fā)癢，家兔啃咬該部皮膚，直至毛被啃光，皮被咬破，并很快死亡。中和試驗(yàn)：豬感染偽狂犬病毒后，7 d開始出現(xiàn)中和抗體，14 d時中和抗體效價(jià)可達(dá)1∶128，3周后血清中和抗體達(dá)最高水平，并持續(xù)約18個月之久。試驗(yàn)常在豬腎細(xì)胞培養(yǎng)物上進(jìn)行。選一株標(biāo)準(zhǔn)偽狂犬病細(xì)胞適應(yīng)毒，以每0.1 mL病毒液中含有100 TCLD50的稀釋病毒與連續(xù)作2倍稀釋的被檢血清0.1 mL混合，37℃處理（感作）1.5 h，再接種于細(xì)胞培養(yǎng)物上。每個血清稀釋度至少要接種4個細(xì)胞培養(yǎng)物，每個培養(yǎng)物接種0.2 mL。康復(fù)豬的血清常有1∶8～1∶64的中和能力。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：用PRV抗原包被酶標(biāo)反應(yīng)板，以間接ELISA法檢測血清中的PRV抗體。該法簡單、快速、可靠、重復(fù)性好，比病毒中和試驗(yàn)敏感。該方法，市場已有診斷試劑盒供應(yīng)，按診斷試劑盒的說明使用即可。雞胚接種：病料經(jīng)絨毛尿囊膜接種9～10日齡雞，3～4 d出現(xiàn)中等大小的白色痘皰，強(qiáng)毒株可嚴(yán)重侵襲雞胎神經(jīng)系統(tǒng)，致死雞胚。死胚呈彌散性出血和水腫，頭蓋骨突出。感染細(xì)胞中可檢出核內(nèi)包涵體。經(jīng)尿囊腔和卵黃囊接種，該病毒也能增殖和傳代。免疫熒光染色：取病死豬的腦或扁桃體做印片或冰凍切片，用直接免疫熒光染色檢查，常可于神經(jīng)元的胞體（細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核）內(nèi)看到熒光，幾小時內(nèi)即可獲得確切診斷。

5 防治措施

目前尚無有效的治療藥物，在緊急情況下，在病豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀之前，注射高免血清或病愈豬血液，有一定療效。但是得過病的豬，可長期攜帶病毒，應(yīng)注意隔離飼養(yǎng)。現(xiàn)在，豬被公認(rèn)為是偽狂犬病病毒的重要貯存宿主之一，因此，經(jīng)常性防控本病是非常必要的。常規(guī)預(yù)防主要包括嚴(yán)格檢疫、凈化豬群，建立無病毒豬群、消除隱性感染和定期消毒等。緊急預(yù)防時，應(yīng)及時撲殺病豬和預(yù)防接種，并采取有效措施進(jìn)行豬群凈化等工作。目前，用于預(yù)防本病的疫苗有弱毒苗、滅活苗和基因缺失苗3種。考慮到用戶的經(jīng)濟(jì)承受能力等因素，育肥用的仔豬可以使用弱毒疫苗，但在種豬群中要盡量只用滅活苗。基因缺失苗的免疫效果也很好，但因其價(jià)格較高，所以使用較少。