大飛揚草的三維熒光光譜研究

白 燕，林玉婷，孫宏元，黎 明，左文健

（1.海南熱帶海洋學院食品科學與工程學院，海南三亞 572022；2.海南熱帶海洋學院理學院，海南三亞 572022；3.海南熱帶海洋學院水產與生命學院，海南三亞 572022；4.東海中學，福建泉州 362000）

中藥品質控制一直是中藥研究的一個熱點，指紋圖譜基于中藥物質群整體作用的認識[1]，從而實現中藥的鑒別和評價，進而實現品質控制。三維熒光光譜可以全面反映復雜中藥體系的熒光特征[2]，便于區分中藥成分的熒光峰和各種散射峰，近年來也得到人們的關注。

大飛揚草是典型的南藥資源，具有清熱解毒、利濕止癢、通乳的作用[3]，已收錄到《中國藥典》中。飛揚草的成分[4]主要有黃酮類、丹寧類、三萜類、二萜類、糖苷類及其他。武毅等人[5]對大飛揚草地上部分的化學成分進行研究，發現其化學成分有東莨菪亭、濱蒿內酯、異東莨菪亭、槲皮素、異鼠李素、喬松素、山奈酚、木犀草素和沒食子酸。王莉等人[6]研究了飛揚草地上部分70%丙酮提取物的化學成分。黃勇紅等人[7]研究了廣東12批飛揚草的HPLC色譜指紋圖譜，確定有9個共有色譜峰。

利用熒光分光光度計測定了不同采集時間的大飛揚草的整株、葉、莖、根的三維熒光光譜，并結合文獻對各熒光峰的歸屬進行了分析。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

RF-5301PC型熒光分光光度計，1 cm石英比色皿。大飛揚草在海南熱帶海洋學院校園內采集（時間為11月26日到12月17日，每隔1周采集1次）。試驗中所有用水均為超純水。

1.2 試驗方法

準確稱取0.100 0 g大飛揚草置于燒杯中，加水煮沸10 min，冷卻至室溫，過濾2次，轉移到100 mL容量瓶中定容。將其稀釋到10 mg/dm3備用。熒光光譜發射波長（EM）掃描范圍為220～650 nm，激發波長（EX） 掃描范圍為220～580 nm，間隔5 nm。

2 結果與分析

2.1 大飛揚草三維熒光光譜圖

第2周采集的大飛揚草三維熒光光譜見圖1。

圖1 大飛揚草的三維熒光圖譜

所有圖中都有明顯的瑞利散射峰，見圖1（a）中e箭頭所示粗黑線，部分圖中可以看到二級瑞利散射峰，見圖1（a） 中f箭頭所示。瑞利散射和拉曼散射與溶劑分子有關，由于不是研究的重點，后面將不再贅述。圖中類似指紋的等高線圖是大飛揚草的熒光成分的熒光圖譜[2]。

2.2 峰位置分析

大飛揚草熒光峰位置分布見圖2。

圖2 大飛揚草熒光峰位置分布

采集時間對大飛揚草的三維熒光光譜有影響，采集時間不同，出現的熒光峰的數目和位置不同。共有峰體現了研究體系的特點，可以用于鑒別。整株有2個共有峰，分別位于λEX/λEM=382 nm/476 nm附近和λEX/λEM=310 nm/433 nm附近；葉有2個共有峰，分別位于λEX/λEM=391 nm/469 nm附近和λEX/λEM=305 nm/435 nm附近；莖無共有峰；根有3個共有峰，分別位于 λEX/λEM=309 nm/380 nm附近，λEX/λEM=250 nm/449 nm附近和λEX/λEM=229 nm/317 nm附近。莖沒有共有峰可能是因為莖連接葉和根，既能表現出葉的特征，也能表現出根的特征，因此本身的熒光峰峰位置較分散。

圖2中a位置峰位于λEX/λEM=385 nm/466 nm附近。Wang L[8]和王麗等人[9]測得獨活和綿頭雪蓮的主要成分東莨菪亭的熒光光譜，與其對比，可以得出a位置峰應該是東莨菪亭的熒光峰。從圖2中看到，整株、葉和莖在a位置有熒光峰，說明大飛揚草整株中的東莨菪亭來源于葉子和莖，在根中沒有出現此熒光峰，可能在根中沒有東莨菪亭。

圖2中b位置的熒光峰位于λEX/λEM=309nm/429nm，c位置莖的熒光峰位于λEX/λEM=239 nm/435 nm附近，與文獻[10]中報道的濱蒿內酯的熒光峰較為接近，可能在莖、葉、根中都存在濱蒿內酯。

圖2中g位置峰位于λEX/λEM=229 nm/311 nm附近，f位置峰位于λEX/λEM=280 nm/319 nm，可能是酚酸類化合物，與文獻中[11]報道的丁香酚的峰位置λEX/λEM=235 nm/315 nm和 λEX/λEM=280 nm/315 nm較為接近，推測在大飛揚草的莖和根中可能含有丁香酚。

根據文獻報道，槲皮素[12]、山奈酚[13]和沒食子酸[13]本身沒有熒光。未找到異鼠李素、喬松素、木犀草素本身的熒光光譜的報道，但是這幾種都有作為熒光猝滅劑的報道[14-15]。圖2中葉、莖、根在c位置的熒光峰還未找到歸屬，莖、根在d位置的熒光峰，莖在e位置的熒光峰也未找到歸屬，還需要進一步的研究。

從圖2可以很方便地判斷各個熒光組分存在的部位，是在葉中、在莖中，還是在根中，一目了然。因此推薦建設中藥的三維熒光光譜數據庫時，不但應該給出三維熒光光譜圖，同時給出各個藥品的熒光峰位置分布圖，從而可以更好地利用數據。另外，大部分中藥并不是整株入藥，因此在研究中就忽視了未入藥的部分，而未入藥的部分也可能包含重要的信息，各個部位信息的相互印證，可能會使結果更加準確。

3 結論

大飛揚草的整株、葉、根的三維熒光譜圖共有峰明顯，可用于鑒別，莖的三維熒光譜圖無共有峰。大飛揚草的三維熒光峰位置分布圖可以直觀地給出各個熒光物質存在的部位。未能給出歸屬的熒光峰有可能是還未被發現的新物質，從而指導化學成分的分析研究。