甲醛藥物對金魚的急性毒性試驗研究

祝嘉瑩 趙 欣 盧曉地 楊子航

（河北農業大學渤海校區，河北滄州 061100）

甲醛具有廣譜殺菌和殺蟲作用。該文研究了甲醛對金魚的急性毒性作用。觀察毒性反應過程中毒性的表現，分別求出半數致死濃度和安全濃度，根據LC50的大小，對漁藥的安全濃度進行評價，為人們進行金魚的疾病防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料 燒杯、玻璃棒、移液管、洗耳球、7個相同的盆、尺子、稱量天平、甲醛溶液以及120條大小活力均一的金魚。

1.2 方法

1.2.1 預試驗 7個盆中每個盆放入4 L水，每盆放入10條金魚并依次貼上1～7號標簽。計算濃度為200、260、300、800、850 mg/L和900 mg/L需加入的甲醛溶液量。1號為對照組，在2～7號中依次加入0.8、1.04、1.2、3.2、3.4 mL和3.6 mL甲醛，并記錄每組加入的時間。觀察并記錄加藥后金魚的游動狀態、行為異常情況、死亡情況，并記錄死亡時間[1]。

1.2.2 正試驗 換掉預試驗2～7號的魚和水并洗刷干凈，對照組不變，然后在2～6號盆中分別加入4 L水，并在每個盆中放入10條魚。根據預試驗設置400～200 mg/L等比梯度。由等比數列計算得出等比系數，計算得2～6號盆的濃度分別為400、528、696.96、919.99 mg/L和1 200 mg/L。在 2～ 6號盆中分別放入 1.6、2.1、2.8、3.7 m 和 4.8 mL甲醛溶液，并記錄每組所加入的時間。觀察并記錄加藥后金魚的游動狀態、行為異常情況、死亡情況及死亡時間[2]。

2 結果與分析

2.1.1 預試驗 2～7號加入時間分別是08：14、08：17、08：18、08：20、08：21和08：21。5號死亡2條，6號死亡6條，7號死亡4條。對照組一切正常；6號最先出現側翻，且金魚最先出現躍出水面并且次數最多，游動較為激烈；最為激烈的是5號，但隨著時間增加游動緩慢；7號最先出現伏底不動。最先出現死亡的是5號，6號死亡率最大，為60%。

2.1.2 正試驗 2～6號加入時間分別是10：48、10：49、10：50、10：51和10：52。2號死亡1條，3號死亡1條，4號死亡4條，5號死亡5條，6號死亡8條。對照組一切正常。4號最先出現側翻情況；6號最先出現躍出水面情況且為所有組中次數最多，游動最激烈的一組；5號出現躍出水面次數次之。4號最先出現死亡情況，6號死亡數最多。

2.1.3 計算 正試驗結果顯示：2～6盆死亡條數分別為1、1、4、5條和8條，死亡率分別為0.1%、0.1%、0.4%、0.5%和0.8%。LC50=lg-1[Xm-i（Σp-0.5）]，計算得 LC50=945.55 mg/L。其中，Xm是最大劑量的對數，Xm=lg1 400=3.146；i是相鄰兩劑量比值的對數，i=lg1.32=0.121；p是各組的死亡率，以小數表示。2.2 分析 安全濃度=LC50×0.1=94.555 mg/L；誤差估計SLC= ∨ [2.3LC50×（Σp-Σp2）/n]=8.15。 其 中，n為 每 一 組內的動物數。算得的SLC50乘以2.0或2.6，即得P=0.95或P=0.99的可信限為16.3和21.19。

2.3 試驗思考與優化 急性毒性試驗一般需要在7 d內完成，而本試驗只進行2 h，主要是為了驗證一些結論，但偶然性很大，如若時間允許其他研究人員可連續觀察7 d[3]；甲醛溶液置于燒杯后久置可導致濃度出現一些偏差，所以在試驗過程中，用完之后要在燒杯上蓋一個蓋子；本試驗受試驗條件影響，例如溫度低、試驗動物活力差、試驗用水不適宜等，人為因素如操作時用力過度、大聲喧嘩、觸碰都會對試驗動物產生一些影響[4]；本試驗可重復性等都比較高，人們也可以用此方法研究其他漁藥和動物[5]；LC50適用范圍為最低死亡率小于20%但不為0，且20%最好[6]，最高死亡率要超過80%，且100%最好，本試驗最低死亡率為10%，最高死亡率80%，死亡率偏低[7]，可能是因為甲醛濃度有所偏差，所以其他人員在試驗過程中一定要注意維持甲醛濃度。