白細胞介素-8基因啟動子-251T＞A多態性與急性胰腺炎發病風險的Meta分析

劉建平 栗粟 孫雅軒

[摘要] 目的 統計分析白細胞介素-8（IL-8）基因啟動子-251T>A多態性與急性胰腺炎（AP）發病風險的關系。 方法 對PubMed、Embase、Web of Science databases和萬方數據庫進行系統檢索，檢索IL-8啟動子-251T>A多態性和急性胰腺炎發病風險相關的文獻，文獻查找日期為1990年1月～2015年12月。 結果 最終有7篇文獻共計2282例病例納入本研究。其中AP組病例1013例，對照組病例1269例。在納入的總體中，IL-8啟動子-251T>A多態性和AP發病風險相關（OR = 1.56，95%CI：1.14～2.13，P = 0.02）;在顯性模型中，A基因攜帶者會增加AP發病風險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01）;在隱性模型中，純合子AA基因型也會增加AP發病風險（OR = 1.65， 95%CI：1.13～2.41，P = 0.02）。亞組分析提示，IL-8啟動子-251A多態性MAP隱性基因模型（OR = 2.01，95%CI：1.25～3.24，P = 0.025）和SAP所有基因模型（OR = 1.80，95%CI：1.43～2.26，P = 0.022;顯性模型OR = 2.17，95%CI：1.54～3.06，P = 0.014;隱性模型OR = 2.39，95%CI：1.49～3.81，P = 0.005）會增加與AP發病風險。 結論 IL-8基因啟動子-251T>A多態性可能會增加AP的發病風險。但是考慮到本研究的局限性，需要有設計更完善、樣本量更大的研究來證實該結論。

[關鍵詞] 白細胞介素-8;急性胰腺炎;多態性;Meta分析

[中圖分類號] R576? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）01（a）-0068-06

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是由于胰腺腺泡細胞內的胰酶被超前激活引發的一組急性炎癥性病變[1]。據初步估計，世界范圍內AP的年發病率在（10～30）/10 000，盡管部分AP屬于輕癥AP（mild acute pancreatitis，MAP），但仍有25%～30%的AP會發展為重癥胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP），其往往伴發多器官功能障礙（mutiple organ disfunction，MODS）和高死亡率[2-6]。遺憾的是，目前AP發病的分子生物學機制仍不十分清楚。目前的研究已經證實炎性反應在AP的病理生理過程中發揮極重要的作用，這個過程包含大量的炎癥細胞特別是中性粒細胞和單核細胞的募集、定植和全身激活過程[7-8]。白細胞介素-8（IL-8）就是一種重要的炎性介質，對中性粒細胞和嗜堿性粒細胞具有趨化作用，進而對炎性反應和免疫過程有調節作用[9]，并且在AP患者中IL-8水平也是顯著升高的[10]。IL-8基因啟動子-251T>A多態性（rs4073）可以通過轉錄影響IL-8的表達水平[11]。近年來關于IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險關系的病例對照研究逐漸增多，但是這些研究的結果并不一致[12-18]。因此，本研究擬對IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險關系進行Meta分析。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

兩名研究人員對PubMed、Embase、Web of Science databases和萬方數據庫進行系統檢索。檢索起止時間為1990年1月～2015年12月。所用英文關鍵詞（“interleukin-8”OR“IL-8”OR“cytokine”）AND（“polymorphism”OR“polymorphisms”OR“mutation”OR“variant”OR“variation”），中文關鍵詞（“白細胞介素-8”或“白介素-8”或“IL-8”）和（“多態性”或“突變”）和（“AP”或“胰腺炎”）。另外通過瀏覽相關參考文獻進行補充檢索。

1.2 納入與排除標準

文獻納入標準：①關于IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險關系;②研究類型是病例對照研究;③病例組和對照組均有詳細的各基因型分布情況或通過文中數據可以推算出各基因型分布情況。排除標準：①綜述、評述類文獻;②數據不全或通過聯系作者仍不能得到有效數據;③重復文獻或前后文獻研究樣本有重疊的，納入樣本量較大、數據較全的文獻。

1.3 數據提取

兩名研究人員獨立提取納入文獻的如下信息：第一作者姓名、發表年份、所在國家、對照組來源、各型胰腺炎的基因型分布情況、對照組的Handy-Weinberg平衡檢驗結果及資料（Handy-Weinberg equilibrium，HWE;P < 0.05認為不滿足HWE平衡）。AP嚴重程度分級標準參照Ranson標準[12]，<3分為輕癥，≥3分為重癥。

1.4 質量評價

對納入文獻采用NOS量表（Newcastle-Ottawa scale）進行質量評價，質量評價結果在0～4分為低質量研究，5～8分為高質量研究。

1.5 統計學方法

采用Stata 12.0軟件進行統計分析。IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險關系關聯強度的效應值由比值比（odds ratio，OR）與相應的95%可信區間（95%CI）表示。合并前，對納入文獻的異質性進行檢驗，當Cochrane Q統計值P < 0.10和I2 > 50%被認為納入文獻間存在明顯異質性，此時統計模型采用隨機效應模型，否則采用固定效應模型。亞組分析是按照AP的類型（MAP和SAP）分別按三種基因模型進行統計分析。此外Begg′s漏斗圖和Egger′s回歸分析被用來檢驗發表偏倚。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 納入文獻特征

按照檢索策略，共檢索出314篇文獻，經查重除重，瀏覽題目、摘要和全文等環節后，最終有7篇文獻納入本Meta分析[12-18]（圖1）。這7篇納入文獻共包含AP病例1013例，對照病例1269例，其中1篇的研究人群是匈牙利人群[12]，剩余6篇均是在中國的研究[13-18]。對照組來源于社區的5篇[12-16]，來源于醫院的2篇[17-18]。對照組IL-8基因啟動子-251T>A多態性不滿足Handy-Weinberg平衡的有3篇[14，17-18]。所納入的7篇文獻，經NOS量表評分，最低分為5分，所有納入本研究的文獻均是高質量文獻。見表1。

2.2 數據合成

在等位基因模型中，納入的7篇文獻間存在明顯異質性（I2 = 82.6%，P = 0.00），所以采用隨機效應模型進行統計風險。對7篇文獻按等位基因模型進行隨機效應統計分析發現IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險具有相關性（OR = 1.56，95%CI：1.14～2.13，P = 0.02）。見圖2。

在顯性模型中，納入文獻間無統計學意義上的異質性（I2 = 4.50%，P = 0.392）。按固定效應模型進行統計分析發現顯性模型中（AA+AT vs. TT）中A基因攜帶者會增加AP發病風險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01）。見圖3。

在隱性模型中，納入文獻間存在統計學意義上的異質性（I2 = 52.9%，P = 0.047）。按隨機效應模型進行統計分析發現純合子AA基因型也會增加AP發病風險（OR = 1.65，95%CI：1.13～2.41，P = 0.02）。見圖4。

亞組分析中，僅有5篇納入文獻[12-16]按AP嚴重程度分為MAP和SAP，并對各種亞組胰腺炎基因型分布作了詳盡描述（表1）。本研究分別對MAP和SAP按三種基因模型進行統計分析發現，所有的亞組分析中文獻間均無明顯異質性（I2 < 50%），都能按固定效應模型進行統計分析。分析結果：只有MAP的等位基因模型和顯性模型提示IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP發病風險無明顯相關性（P > 0.05）。MAP隱性基因模型和SAP所有基因模型均提示IL-8啟動子-251T>A多態性與AP發病風險具有統計學意義上的相關性（均P < 0.05）。

2.3 發表偏倚

在總體分析過程中僅有顯性模型（AA+AT vs. TT）無明顯發表偏倚（Egger′s回歸分析P = 0.058），而等位基因模型和隱性模型中都可見明顯發表偏倚（等位基因模型：P = 0.034;隱性模型P = 0.006）。見圖5。所有亞組分析中都未發現明顯發表偏倚。見表2。

3 討論

近年來，關于炎癥介質與AP發病風險的研究表明，AP所觸發的全身嚴重炎性反應并不是單一媒介所介導的，而是有著錯綜復雜的病理生理途徑，在這些途徑中，氧化應激和細胞因子顯得尤為重要[19]。IL-8屬于COX2C亞家族中的炎癥介質，參與炎癥急性期反應的調節，研究表明IL-8基因啟動子-251A等位基因可以通過轉錄調節上調IL-8的表達水平。故而對AP的發病和病情進展有重要作用[20-21]。

2013年Yin等[22]對IL-8基因啟動子-251T>A多態性與AP風險的關系進行了系統評價，在總體分析中等位基因模型和顯性模型提示IL-8啟動子-251T>A會增加AP發病風險，然而在隱性模型中沒有發現這種相關性。由于Yin等[22]當時只納入了5篇文獻[12-16]，樣本量相對較少，故對該結論采信應該持謹慎態度。

但本研究在Yin等[22]研究的基礎上又納入2篇新近發表的文獻[17-18]，相對擴大了統計分析的樣本量。本研究得到了和Yin等[22]相似的結論，但是在本研究中的總體隱性模型IL-8啟動子-251T>A多態性仍會增加AP風險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01），這進一步提示IL-8啟動子-251A等位基因是增加AP發病風險的重要危險因素。

本研究的亞組分析是基于AP病情嚴重程度分組。但是基因多態性的分布及表達與人種和地域有著十分緊密的聯系。一般關于基因多態性的Meta分析都會按人種進行區組分析。本研究之所以沒有按人種或地域區組進行分析是因為納入7篇文獻中6篇都是在中國人群中開展的，僅1篇[12]在匈牙利人群開展，并且該研究中的對照組人群的IL-8基因型的分布與西歐人群的基因型分布相差甚大，反而和日本人群中的基因型分布相似[23]。所以在本研究中采用人種或地域進行亞組分析意義不大。

本研究發現，在總體分析過程中無論等位基因是顯性模型還是隱性模型，納入文獻間的異質性都非常顯著。但是在進行亞組分析過程中，無論何種基因模型，納入文獻間都不存在明顯的異質性。這是因為在進行亞組分析中排除了2篇文獻[17-18]，而這2篇文獻中的對照組的IL-8基因型的分布均不滿足Handy-Weinberg平衡。并且，該兩篇文獻的病例來源都是醫院，而其他文獻中對照組來源都是社區。所以在本研究中原始文獻的選擇偏倚等因素可能是造成了納入文獻間的異質性的重要因素。

同Hofner等[12]發現相似，在亞組分析中本研究發現攜帶A等位基因型的個體發生SAP的風險更高，可是在SAP組中AA基因型的個體數量僅有34例（17.0%），由此可推測，IL-8啟動子-251T>A也具有較高的IL-8表達能力。

在參考本研究的結果時需注意幾個局限之處：①相對較少的納入文獻和較小的樣本量，這可能影響統計效能;②在總體分析時，納入文獻間存在顯著異質性，雖然使用隨機效應模型進行統計，但仍可能影響結果的準確性;③AP屬于復雜性疾病，其發病因素包含了遺傳和環境等多個因素，本研究的結果未對其他混雜因素進行調整，故對結果的解釋需謹慎。

綜上，基于目前Meta分析提示，IL-8基因啟動子-251T>A多態性可能會增加AP的發病風險。但是考慮到本研究的局限性，需要設計更完善、樣本量更大的研究來證實該結論。

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（收稿日期：2018-04-13? 本文編輯：金? ?虹）