重組禽流感病毒H5+H7二價滅活疫苗免疫效果評估

李劍鋒 龍鳳 黃麗非

摘要：對崇左市2017年10月至2018年9月家禽實施免疫重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1亞型 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的免疫效果進行了評估，旨在為崇左市家禽禽流感防控決策提供參考。結果表明，H5亞型禽流感免疫抗體合格率為90.35%，H7亞型禽流感免疫抗體合格率為84.94%，禽流感病毒核酸均為陰性。H5+H7免疫抗體水平較高，抗體合格的血清中，H5平均效價為8.33log2，H7平均效價為7.41log2，疫苗安全穩定，可有效抵抗當前禽流感流行毒株的侵襲。

關鍵詞：重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗；免疫；抗體效價；效果評估

中圖分類號：S851.35 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2019）02-0010-02

禽流感（Avian influenza，AI）是由A型禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）引起禽類的一種從呼吸系統到嚴重全身敗血癥等多種癥狀的傳染性疾病。禽流感病毒屬于RNA病毒的正黏病毒科流感病毒屬，其最顯著的生物學特性是亞型眾多，變異頻繁[1]。2017年2月起，全國多地有發生人感染H7N9流感的病例，嚴重危害了公共衛生安全和養禽業的健康發展。為進一步做好高致病性禽流感防控工作，保障養殖業生產安全和公共衛生安全，農業部決定從2017年秋季開始，在家禽免疫H5亞型禽流感的基礎上，對全國家禽全面開展H7N9免疫[2]。本試驗對崇左市2017年10月至2018年9月家禽實施免疫重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1亞型 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的免疫效果進行了評估，旨在為崇左市家禽禽流感防控決策提供參考。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

禽流感病毒H5、H7亞型抗原和陽性血清為哈爾濱維科生物技術開發公司產品，所用試劑嚴格按照規定保存，試劑均在有效期內；0.01 mol/L pH7.2的PBS液；1% SPF雞紅血球懸液；微量移液器；梯度PCR儀；電泳儀；凝膠成像系統。

1.2 方法

參照GB/T 18936-2003高致病性禽流感診斷技術-血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗；NY/T 772-2013禽流感病毒RT-PCR檢測技術。

1.3 樣品采集

樣品均采集自重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗免疫后21 d以上的家禽養殖場（戶），從2017年10月至2018年9月，在崇左市7個縣（市、區）的家家禽養殖場（戶）隨機采集雞血清共計1 202份，用于檢測禽流感H5、H7亞型抗體，另外采集相對應的家禽咽喉/泄殖腔棉拭子，用于檢測禽流感病毒。

1.4 判定標準

按照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2003），實施重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗免疫的家禽，HI抗體效價≥4 log2為免疫合格。按照NY/T 772-2013禽流感病毒RT-PCR檢測技術，電泳結果出現相應擴展條帶判為亞型禽流感病毒核酸陽性，否則判為亞型禽流感病毒核酸陰性。

2 結果與分析

2.1 家禽血清、病原檢測結果

共調查采集38個商品化規模場和52戶散養戶，家禽存欄共464 540羽，其中：商品化規模場存欄460 294羽，散養戶存欄4 246羽；樣品涵蓋崇左市7個縣（市、區）重點家禽養殖區域及邊境區域。共采集家禽血清及相對應的咽喉/泄殖腔棉拭子各1 202份，結果見表1。由表1可見，禽流感病原學共檢測1 202份咽喉/泄殖腔棉拭子樣品，檢測結果全為禽流感病毒核酸陰性；檢測家禽血清共1 202份，H5亞型抗體合格數1 086份，免疫抗體合格率為90.35%；H7亞型抗體合格數1 021份，免疫抗體合格率為84.94%。

2.2 不同群體家禽H5+H7免疫抗體檢測結果

本次調查共采集38個商品化規模禽場和52戶散養戶，家禽血清分別為817份、385份。H5免疫抗體檢測結果：商品化規模場合格血清696份，合格率為85.19%，群體合格率為89.47%（34/38）；散養戶合格血清384份，合格率為99.74%，群體合格率為98.08%（51/52）。H7免疫抗體檢測結果：商品場合格血清640份，合格率為78.34%，群體合格率為84.21%（32/38）；散養戶合格血清381份，合格率為98.96%，群體合格率為98.08%（51/52）（表2）。結果表明，抽檢家禽血清抗體合格率均達農業農村部要求（70%），其中H5亞型免疫效果較H7亞型要好。

2.3 血清抗體效價情況

分別統計商品化規模場和散養戶的家禽血清HI效價 ，計算HI效價≥4 log2的血清樣品效價平均值，結果顯示，商品場H5抗體平均效價為8.24 log2，H7抗體平均效價為7.25 log2，H5抗體平均效價比H7抗體平均效價高近1 log2。散養戶H5抗體平均效價為8.64 log2，H7抗體平均效價為7.68 log2，H5抗體平均效價比H7抗體平均效價高0.96 log2（表3）。結果表明，重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗產生的免疫應答較好，商品化規模場和散養戶家禽血清抗體平均滴度均高于7 log2，具有較好防御當前流行禽流感H5、H7亞型毒株的能力。

3 小結與建議

崇左市2017年10月至2018年9月實施免疫重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗（H5N1亞型 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的免疫效果抽查結果表明，所檢家禽沒有受到高致病性禽流感野毒感染，重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫苗使用安全穩定，抗體水平較高，免疫應答效果較好，家禽的抗體平均效價高，說明崇左市內家禽具有很好的抵御當前禽流感流行毒株感染的能力。建議防疫部門繼續抓好禽流感疫苗免疫工作，同時做好抗體和禽流感病原監測工作，及時了解家禽抗體基本情況和病原流行情況。

抽查發現有個別規模養殖場家禽血清抗體抽檢不合格，有個別養殖場抗體合格數為0，說明商品化規模場家禽禽流感免疫工作存在不規范的問題，工作存在漏打、假打現象，免疫責任落實不到位等。建議各地動物疫病防控機構定期開展動物防疫人員學習培訓，提高技能，樹立責任意識，認真做好動物免疫工作，尤其是每年的春、秋兩季重大動物疫病免疫工作，同時要不定期開展免疫抗體監測以及病原學監測工作，查漏補缺，確切地使動物防疫工作不留死角。

參考文獻：

[1] SAIF Y M.禽病學（第十二版）[M].蘇敬良，高 福，索 勛譯.北京：中國農業出版社，2012.

[2] 農業部.農業部關于切實做好全國高致病性禽流感秋季免疫工作的通知（農醫發[2017]24號）[EB/OL].http：//www.moa.gov.cn/govpublic/SYJ/201707/t20170711_5744436.htm，2017-07-07.