2種藥劑對銀杏炭疽病病菌的室內毒力測定

劉 露

（重慶三峽職業學院，重慶 404100）

銀杏葉枯病是銀杏栽培地區常見的一種病害，早在20世紀60年代初期，該病在江蘇省泰州市苗圃出現時，已受到生產單位重視。

銀杏葉部病害的主要病原菌為鏈格孢病菌、炭疽菌、擬盤多毛孢菌，分別引起銀杏黑斑病、炭疽病和輪紋病。在病害發生的不同時期采集病葉進行組織分離的結果，發現3種病原菌常常同時存在，形成混合侵染，在葉子上形成面積較病斑，致使葉片干枯、提早脫落，影響銀杏的產量和質量。該文主要針對炭疽病菌開展以下試驗，試圖找到防治銀杏炭疽病菌的最佳藥劑及最適濃度。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試藥劑 60%苯醚甲環唑（海利爾藥業集團股份有限公司）、4%四氟醚唑（意大利意賽格公司）。

1.1.2 培養基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，以下簡稱PDA。

1.2 試驗方法

1.2.1 病菌分離 切取銀杏炭疽病葉病健交界處葉組織。將其放于0.1%升汞及75%酒精中消毒后，用無菌紙吸干表面水分，放于PDA平板，置于25 ℃條件下恒溫培養。

1.2.2 含毒介質制作 將4%四氟醚唑配制成質量濃度分別為125、250、500、1 000 mg/L 和 2 000 mg/L 的含毒培養基，將60%苯醚甲環唑配制成質量濃度分別為250、500、1000、2 000 mg/L 和 4 000 mg/L 的含毒培養基。以無藥劑加入的PDA平板作為對照組。每皿培養皿中倒入20 mL，每個濃度5個重復。

1.2.3 接入菌餅 用直徑為5 mm的打孔器在菌落邊緣打下菌餅[1]。將菌餅移入上述平板中央，用封口膜封住培養皿邊緣縫隙，做對應標記，置于25 ℃條件下恒溫培養7 d后觀察[2]。

1.2.4 十字交叉法測量菌落直徑 7 d后，采用十字交叉法測量菌落生長直徑，并記錄好數據。

1.2.5 試驗數據處理 按照以下公式，計算每個藥液對應的生長抑制率。

利用Excel處理數據，計算毒力回歸方程、相關系數及EC50。

2 結果與分析

針對供試殺菌劑對銀杏炭疽菌菌絲生長的影響，經計算得到：60%苯醚甲環唑回歸直線方程為Y=0.284X+5.223 6， 相 關 系 數 R2=0.976，EC50=26.582 8 mg/L。4% 四 氟醚唑回歸直線方程為Y=1.026 3X+3.537 9，相關系數R2=0.997 4。EC50=6.128 1 mg/L。

由結果可知：4%四氟醚唑的抑制作用較強，其EC50值為6.128 1 mg/L，60%苯醚甲環唑抑制作用次之，EC50值為 26.582 8 mg/L。

3 結果與討論

結果表明：4%四氟醚唑對銀杏炭疽病菌的抑菌效果較好，60%苯醚甲環唑的抑菌效果次之。

2種殺菌劑在較高質量濃度時對銀杏炭疽病菌的抑制效果較好，4%四氟醚唑和60%苯醚甲環唑的建議用藥濃度分別為2 000 mg/L 和 4 000 mg/L。質量濃度較低時抑制效果不佳[3]。

殺菌劑防治是植物病害防治的關鍵，而在殺菌劑的選擇中，最重要的是要考慮殺菌劑對病原菌的殺滅能力。試驗所使用的2種殺菌劑中4%四氟醚唑的EC50值最小，證明其對銀杏炭疽病菌的殺滅效果最好；而60%苯醚甲環唑的效果則較差一點。由此可看出4%四氟醚唑在理論上應用潛力更好[4]。

在進一步對銀杏炭疽病的校內試驗時，還需要對這2種殺菌劑進行綜合比較，如比價其對銀杏生長作用的影響、對環境的影響、成本等，力求找到經濟合理、施用高效的低毒殺菌劑。

研究表明，長期使用單一殺菌劑會使病原菌產生抗藥性。為了延緩病原菌對藥劑抗藥性的產生和發展，有專家提出將此類殺菌劑與機制不同的其他類型殺菌劑混合或交替使用。葉滔等研究也表明，合理復配是降低抗藥性發生的主要策略。因此，為了防止銀杏炭疽病菌對本試驗篩選出的抑制效果較好的4%四氟醚唑和60%苯醚甲環唑產生抗藥性，建議人們在植保工作中交替使用2種殺菌劑對銀杏炭疽病進行防治。

本試驗結果僅基于室內毒力測定得出，若要準確選擇銀杏炭疽病的防治藥劑，還應結合銀杏生長情況、環境、用藥成本等相關因素進行分析，因此人們需要再進一步進行相關試驗。