心肌梗死后心力衰竭患者血清microRNA-155 表達水平及其臨床意義

朱江

（紹興市中醫院 重癥醫學，浙江 紹興 312499）

心力衰竭發病機制較復雜，其臨床癥狀、體征等缺乏特異性，發病率、住院率及死亡率較高，臨床常用檢查方法不能很好的評估患者病情[1]。MicroRNA（miRNA）可介導多種病理生理過程，其在冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ㄒ韵潞喎Q冠心病）、心力衰竭等心血管疾病的發生、發展中具有重要意義[2]。miR-155在冠心病患者血清中水平升高[3-4]。但miR-155在心肌梗死后心力衰竭患者中的水平及意義尚不清楚。本文對心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平進行研究，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2017年12月紹興市中醫院收治的陳舊性心肌梗死后心力衰竭患者作為心力衰竭組，陳舊性心肌梗死無心力衰竭患者作為心肌梗死組，健康體檢者作為對照組，每組80例。心力衰竭組：男性48例，女性32例；年齡（63.31±7.29）歲。心肌梗死組：男性46例，女性34例；年齡（62.79±7.42）歲。對照組：男性45例，女性35例，年齡（63.41±7.13）歲。Framingham心力衰竭診斷標準：患者有基礎心血管疾病病史，休息或運動時出現乏力、呼吸困難及下肢浮腫等癥狀；有呼吸急促、心動過速、胸腔積液、頸靜脈壓力增高、肺部啰音、外周水腫及肝腫大等體征；有心臟雜音、第三心音、心腔擴大、超聲心動圖異常及利鈉肽水平升高等心臟功能、結構異常證據；收縮性或舒張性心力衰竭特征，則可做出心力衰竭診斷。納入標準：心力衰竭組和心肌梗死組均有陳舊性心肌梗死，心力衰竭組符合Framingham心力衰竭診斷標準[5]，心肌梗死組不符合心力衰竭診斷標準；對照組身體健康。排除標準：妊娠期及哺乳期女性；嚴重肝腎功能障礙；患先天性心臟病、肥厚性心肌病及主動脈夾層等其他心臟疾??；心源性休克、嚴重心律失常及心源性暈厥史；惡性腫瘤、嚴重感染性疾病及拒絕參與。3組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者年齡、性別、實驗室檢查指標及心功能等臨床資料。

1.2.1 血清miR-155水平測定抽取3組外周靜脈血4 ml，與乙二胺四乙酸抗凝管中放置15 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液置于環氧樹脂管中，提取血清總RNA（試劑盒購自美國Sigma公司），采用逆轉錄聚合酶鏈反應（reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）（試 劑 盒 購 自 美國Sigma公司）測定血清miR-155（引物由廣州復基因有限公司設計合成）水平。miR-155引物，正向引物：5，-TGCCTCGAACTGCACTCGTAG-3；反向引物：5，-GCGAGCAGAGAATAATAGGAC-3。以U6為內參照，反應條件：95℃預變性5 s，60℃變性20 s，62℃退火1 s，72℃延伸1 s，共40個循環，血清miR-155以2-ΔΔCt法表示。

1.2.2 心功能測定采用超聲心動圖（德國西門子-18彩色多普勒超聲顯像儀）測定左心室射血分數（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness,LVPW）及左室舒 張 末 期 內 徑（left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）。所有患者由2名經驗豐富的超聲科醫生進行超聲心動圖檢查，采用常規超聲心動圖的檢查方法于胸骨旁左心長軸切面，用M型超聲在左室腱索水平測量LVPW和LVEDD，用雙平面改良Simpson法于心尖四腔心切面測量LVEF。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS20.0統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗或方差分析，進一步兩兩比較用LSD-t檢驗；計數資料以構成比或率（%）表示，比較用χ2檢驗，繪制ROC曲線，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組血清miR-155水平比較

對照組、心肌梗死組、心力衰竭組血清miR-155水 平 分 別 為（1.00±0.11）、（1.42±0.17）和（1.87±0.16），經方差分析，差異有統計學意義（F=682.162，P=0.000）；心力衰竭組患者血清miR-155水平高于對照組和心肌梗死組（P＜0.05），心肌梗死組患者血清miR-155水平高于對照組（P＜0.05）。

2.2 血清miR-155對心肌梗死后心力衰竭的診斷價值

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積為0.921（95% CI：0.842，0.963），臨界值為1.670，敏感性為88.73%（95% CI：0.375，0.964），特異性為92.14%（95% CI：0.792，0.976）。以血清miR-155≥1.67（臨界值）為高表達，＜1.67為低表達，則miR-155高表達51例，低表達29例。見圖1。

2.3 血清miR-155與心肌梗死后心力衰竭患者一般情況和生物化學指標的關系

miR-155高表達組和miR-155低表達組患者年齡、性別、空腹血糖（fasting blood sugar,FPG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低 密 度 脂 蛋 白 膽 固 醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肌酐（Creatinine，Cr） 及甘油三酯（Triglyceride,TG）比較，經t或χ2檢驗，差異無統計學意義（P＞0.05）。miR-155高表達組和miR-155低表達組患者氨基N末端B型腦鈉肽前體（N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP）水平比較，經t檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05）；miR-155高表達組高于miR-155低表達組。見表1。

圖1 血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線

表1 兩組患者一般情況和生物化學指標比較

2.4 兩組患者超聲心動圖檢查結果比較

miR-155高表達組和miR-155低表達組LVEF和LVEDD水平比較，經t檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05）；miR-155高表達組LVEF低于miR-155低表達組，miR-155高表達組LVEDD高于miR-155低表達組。兩組LVPW比較，經t檢驗，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.5 兩組患者心功能分級構成比比較

miR-155高表達組與miR-155低表達組心功能分級構成比比較，經χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=23.854，P=0.000）；miR-155高表達組Ⅲ、Ⅳ級患者比例高于miR-155低表達組。見表3。

表2 兩組患者超聲心動圖檢查結果比較（±s）

表2 兩組患者超聲心動圖檢查結果比較（±s）

組別 n LVEF/% LVPW/mm LVEDD/mm miR-155高表達組 51 28.78±1.87 11.53±1.67 71.24±8.57 miR-155低表達組 29 32.12±1.94 10.94±1.82 54.35±8.46 t值 7.577 1.470 8.513 P值 0.000 0.146 0.000

表3 兩組患者心功能分級構成比比較 例（%）

3 討論

冠心病是中老年人死亡的主要原因之一，其中急性心肌梗死病情危重，因此受到重視。心肌梗死指因冠狀動脈痙攣或冠狀動脈斑塊破裂引起的冠狀動脈血管急性持續閉塞而造成的心肌組織缺血缺氧，從而導致心肌壞死的疾病。隨著血管成形術和新型藥物的廣泛應用，多數心肌梗死患者得到有效救治，但有部分患者經歷心室的不良重構，增加心肌梗死后心力衰竭的發生[6]。因心肌梗死后心力衰竭住院率和病死率比較高，早期進行診斷和治療具有重要意義。目前臨床常用的評估心力衰竭嚴重程度的方法有超聲、心電圖、心室射血分數、步行實驗及心臟耐力實驗等，但由于心力衰竭的臨床癥狀和體征不典型，常規方法不能很好的評估患者病情。

miRNA為內源性非編碼小分子單鏈RNA，其機制為通過降解目標mRNA或抑制目標mRNA的翻譯而發揮生物學作用[7]。miRNA可參與細胞的增殖、分化、凋亡及組織發育等多種病理生理過程的調節，在心血管疾病的發病過程中發揮重要作用[8]。miR-155是miRNA家族成員之一，其在B細胞、T細胞、單核細胞及內皮細胞等多種細胞中表達，參與細胞的增殖、分化、凋亡及組織發育等過程的調節[9]。miR-155為抑癌基因，在多種惡性腫瘤中表達異常[10-11]。miR-155在造血和免疫調節中也具有重要作用[12-13]，其還參與肺纖維化過程，對肺纖維化具有促進作用[14]。miR-155在冠心病的發病過程中也具有重要作用[15]，miR-155可調節巨噬細胞凋亡，通過巨噬細胞調節對冠心病的發生產生影響；miR-155與免疫炎癥反應關系也比較密切，可參與天然免疫應答反應和獲得性免疫應答反應，通過促進炎癥反應促進冠心病的發展[16-17]。

血清miR-155診斷心肌梗死后心力衰竭的ROC曲線下面積結果表明，血清miR-155在心肌梗死后心力衰竭的診斷中具有重要價值，可作為心肌梗死后心力衰竭的潛在診斷指標。NT-proBNP在體外可穩定存在24 h，半衰期為60～120 min，具有較高的敏感性，是評估心力衰竭病情嚴重程度的生物標志物。NTproBNP水平越高表示心力衰竭的進展越快[18]。LVEF是診斷心力衰竭的重要指標，可敏感的反應患者的心室功能，為心臟收縮期和舒張期的比值。當LVEF＞50%時表示患者心功能較差[19]；LVEDD也是評估心臟功能的重要指標，LVEDD水平升高提示心臟功能減退[20]； 心功能分級也反映患者的心臟功能狀態，心功能分級越高，表明心功能越差[21]。本研究結果表明，血清miR-155可作用心肌梗死后心力衰竭病情嚴重程度的標志物。miR-155低表達組和miR-155高表達組LVPW比較無差異，考慮可能與本文樣本量有限有關，需后續增加樣本量進一步研究。

綜上所述，心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平升高，在心肌梗死后心力衰竭的診斷和病情評估中具有重要作用，有望成為心肌梗死后心力衰竭診斷和病情嚴重程度評估的標志物。