無創基因檢測和血清學篩查在唐氏綜合征篩查中的應用分析

盛 娟

（新疆喀什地區第一人民醫院，新疆 喀什 844000）

新生兒染色體異常是臨床上常見的一種出生缺陷類型，不僅會導致新生兒身體及智力發育異常，還會給家庭及社會但來沉重的負擔[1]。近年來，隨著廣大群眾優生優育意識的提高，越來越多的育齡期婦女及孕產婦選擇產前篩查來避免出生缺陷，以提高新生兒出生質量。唐氏綜合征（DS）又稱為21-三體綜合征，屬于染色體異常范疇，盡管約有60%以上的唐氏綜合征在孕早中期胎死宮內或流產，但仍有部分患兒存活至出生[2]。絨毛活檢、羊水穿刺、取臍帶血等方法均為DS診斷的金標準，但因其具有一定的創傷性，常不易被患者所接受[3]。因此臨床上常采用血清學篩查來診斷DS，但誤診率較高，為此本研究選取2017年1月至2018年3月120孕婦為研究對象，探討無創基因檢測和血清學篩查在唐氏綜合征篩查中的應用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2017年1月至2018年3月120孕婦為研究對象，所有孕婦均單胎妊娠，知情同意，自愿參與本次研究，且排除傳染性疾病、腫瘤、心血管疾病、免疫系統疾病以及血液系統疾病等。根據硬幣投擲法將受試者分為對照組和研究組，每組60例，對照組孕婦最小年齡22歲，最大年齡36歲，平均（30.25±2.54）歲，孕周22～36，平均（31.24±2.26）周，孕次1～3次，平均（1.85±0.43）次；研究組孕婦最小年齡23歲，最大年齡37歲，平均（30.53±2.46）歲，孕周20～35，平均（31.38±2.17）周，孕次1～3次，平均（1.83±0.39）次。所有患者的年齡、孕周等基本資料比較，無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法：核酸提取或純化試劑和胎兒染色體非整倍體檢測試劑盒購自廣州市達瑞生物技術股份有限公司，DA8600半導體測序儀購自中山大學達安基因股份有限公司，Qubit定量儀購自美國LifeTechnologies公司。對照組患者行血清學篩查（AFP＋β-HCG），取孕婦外周靜脈血10 mL，離心分離出血清后于-20 ℃保存待檢，采用時間分辨免疫熒光分析法及酶聯免疫法檢測AFP和F-βhCG濃度，結合孕婦的年齡、孕周、體質量、孕次等，應用配套軟件計算唐氏綜合征風險，唐氏綜合征高風險的截斷值為1∶250；18-三體綜合征高風險截斷值為1∶350[4]。研究組患者則取外周血中的游離 DNA 片段進行無創基因檢測，取孕婦外周靜脈血10 mL，離心后取上層血漿，通過柱分離的方法獲取血漿中游離DNA，嚴格按照非整倍體檢測試劑盒的要求行基因組測序技術，結合孕婦的年齡、孕周、體質量、孕次等及生物信息，計算胎兒唐氏綜合征風險，唐氏綜合征高風險：chr21的T值≥3；18-三體綜合征高風險：chr18的T值≥3[5]。最后對唐篩陽性者行羊水穿刺或取胎兒臍帶血進行確診，比較兩組方法在唐氏綜合征篩查中的診斷準確率。

1.3 統計學方法：采用SPSS19.0軟件包，建立Excel表格統計數據，計數資料采用百分比（%）表示，行χ2檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結 果

在對照組的60例患者中，血清學篩查出高風險孕婦8例，篩查陽性率13.33%。其中，唐氏綜合征高風險孕婦6例，唐篩陽性率10.00%，所有陽性孕婦均行羊水穿刺或無創 DNA 檢測進行確診，經跟蹤隨訪僅有1例被證實為21-三體綜合征，唐篩假陽性率為8.33%。在研究組的60例患者中，無創基因檢測出高風險孕婦4例，篩查陽性率6.67%。其中，唐氏綜合征高風險孕婦3例，唐篩陽性率5.00%，所有陽性孕婦均行羊水穿刺進行確診，其中21-三體綜合征3例，18-三體綜合征1例，唐篩假陽性率為0，研究組唐氏綜合征診斷準確率顯著高于對照組，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組方法在唐氏綜合征篩查中的診斷準確率[n（%）]

3 討 論

唐氏綜合征是由于配子形成過程中染色體不分離所致，以生長發育遲緩、智力障礙、畸形為主要臨床表現，嚴重影響出生人口質量[6]。目前臨床上主要通過檢測甲胎蛋白（AFP）、人絨毛膜促性腺激素（hCG）等血清生物學指標來篩查唐氏綜合征，但臨床數據顯示，其準確性僅為60%～70%，特異性差，仍有假陽性率較高的缺陷，從而影響出生質量[7]。有研究表明，母血中攜帶了胎兒基因組 DNA 的全部遺傳信息，且因此在孕中期可通過DNA測序技術檢測胎兒游離DNA片段，利用生物信息學進行序列比對，從而推算唐氏綜合征的發生風險，且該方法敏感性及特異性較高，有效避免了絨毛活檢、羊水穿刺、取臍帶血等方法的創傷性，操作簡便，快速，具有較高的應用價值[8]。本研究結果表明，對照組篩查陽性率13.33%，唐篩陽性率10.00%，唐篩假陽性率為8.33%；研究組篩查陽性率6.67%，唐篩陽性率5.00%，唐篩假陽性率為0，研究組唐氏綜合征診斷準確率顯著高于對照組，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，無創基因檢測可降低侵入性產前診斷的風險，在唐氏綜合征篩查中具有適應范圍廣、準確性及特異性高的特點，具有較高的應用價值，值得臨床推廣使用。