扶正解毒顆粒對雞禽流感疫苗免疫效果影響的研究

◆作者：高志敏劉小艷袁照紅梁祺琦黃顯會郭世寧

◆單位：1.廣東省農產品質量安全中心 2.廣東溫氏大華農生物科技有限公司3.華南農業大學獸醫學院

禽流感是由正黏病毒科流感病毒屬的A型流感病毒引起，發生于各種家禽和野鳥的一種急性傳染病。禽流感病毒具有人畜共患的流行病學特性，因此，防疫顯得尤為重要。疫苗的免疫是有效控制禽流感的有效手段，目前主要使用基因重組滅活疫苗對家禽進行禽流感防疫。由于禽流感基因重組苗的抗原漂移，使禽流感疫苗僅能提供70%的保護力。然而，許多中藥具有抗病毒和增強免疫的作用，且應用安全，與疫苗聯合使用可增加疫苗免疫效果。扶正解毒顆粒是由黃芪、淫羊藿、板藍根等中藥組成，目前國內外對于扶正解毒顆粒的研究不多，本研究是以廣東溫氏大華農動物生物技術有限公司動物保健品廠生產的扶正解毒顆粒為研究材料，比較了不同劑量的扶正解毒顆粒對雞禽流感疫苗免疫效果的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

扶正解毒顆粒，規格：100g(相當于原生藥 100g)，包裝：100g/瓶，批號：20130801，廣東溫氏大華農動生物科技有限公司動物保健品廠提供。

對照藥物：臨床試驗選用黃芪多糖粉，規格：每1g黃芪多糖應不得少于 450mg，批號：1501231，愛迪森（北京）生物科技有限公司生產。

重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型，Re-6株），規格：500 羽份 /瓶，批號：0501047，廣東溫氏大華農生物科技有限公司提供。

1日齡AA白羽肉仔雞

血凝抗原，批號：2014007，哈爾濱獸醫研究所

1.2 試驗方法

試驗在華南農業大學獸醫學院藥理研究室進行，選用1日齡AA白羽肉仔雞300只，平均體重50g。按照體重隨機分為5組，每組60只。第一組為空白對照組（不免疫不給藥）；第二組為空白免疫對照組（免疫不給藥）；第三組黃芪多糖粉對照藥物（按推薦劑量添加飲水中給藥）處理組；第四組為扶正解毒顆粒低劑量（每升飲水添加0.5g）處理組；第五組為扶正解毒顆粒推薦劑量（每升飲水添加1.5g）處理組。

雞只6日齡開始給藥，連續給藥5d。試驗組和對照組均進行常規飼養管理，統一使用肉雞全價飼料。全部雞群在8日齡首免，23日齡進行第二次免疫，30日齡進行第三次免疫，見表2。于免疫前一天和首次免疫后14、21、28和40d，對實驗組和對照組分別翅下靜脈采血1mL，每組每次隨機抽取采10只，4℃保存，供AI抗體檢測使用。

試驗期為7周。第1周雞舍溫度為 32～35℃，第 2周為30～32℃，以后每周下降2℃；4周后自然條件下飼養。

在 15、22、29 和 36 日齡每組隨機抽取8只雞處死，稱量免疫器官的重量。計算免疫指數。

1.3 檢測項目及方法

1.3.1 免疫器官指數的測定

在飼養試驗的各階段稱重后，每組挑選8只接近平均體重的試驗雞宰殺，分別摘取胸腺、脾臟和法氏囊并稱鮮重。

1.3.2 禽流感抗體效價

檢查各種對照。陰性血清血凝抑制滴度應≤1∶4(22)，陽性血清血凝抑制滴度與已知滴度不應相差一個滴度以上。紅細胞對照無血凝現象。

禽流感病毒的血清血凝抑制效價≥1∶16(24)判為陽性。

2 結果與分析

2.1 扶正解毒顆粒對健康肉雞免疫器官生長發育的影響

2.1.1 扶正解毒顆粒對健康肉雞胸腺指數的影響

由表1統計結果可以看出，15、22日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組具有差異顯著（P＜0.05），推薦劑量組差異極顯著（P＜0.01）；黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組與扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）。29日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05）；黃芪多糖組與扶正解毒顆粒推薦劑量組亦無差異顯著（P＞0.05）。36日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組、扶正解毒顆粒低劑量組和推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05)，給藥組之間無差異顯著（P＞0.05）。

2.1.2 扶正解毒顆粒對健康肉雞脾臟指數的影響

由表1統計結果可以看出，15日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒高劑量組具有差異顯著（P＜0.05）。22日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組、扶正解毒顆粒低劑量及推薦劑量組均有差異顯著（P＜0.05），給藥組之間無差異顯著（P＞0.05）。29日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組有差異顯著（P＜0.05）；黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組與扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05），黃芪多糖組和扶正解毒低劑量組無差異顯著（P＞0.05）。36日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒低劑量組和扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）；黃芪多糖組與扶正解毒顆粒低劑量組和推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒低劑量組和推薦劑量組相比無顯著差異（P＞0.05）。

表1 扶正解毒顆粒對健康肉雞免疫器官生長發育的影響

2.1.3 扶正解毒顆粒對健康肉雞法氏囊指數的影響

由表1統計結果可以看出，15日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）；黃芪多糖組與扶正解毒顆粒低劑量組之間無差異顯著（P＞0.05）。22日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒低劑量及推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）；扶正解毒顆粒低劑量組與推薦劑量組之間無差異顯著（P＞0.05）。29日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）；黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組之間無差異顯著（P＞0.05）。36日齡時，與空白對照組及免疫不給藥組相比，黃芪多糖組和扶正解毒顆粒低劑量組無差異顯著（P＞0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組具有差異顯著（P＜0.05）；黃芪多糖組與扶正解毒顆粒低劑量組之間無差異顯著（P＞0.05）。

表2 禽流感抗體水平（log2）

2.2 扶正解毒顆粒對雞禽流感抗體效價的影響

表2統計結果可以看出，免疫前，各試驗組之間的抗體水平無差異顯著（P＞0.05）。試驗開始后，空白對照組抗體水平持續下降，其他組免疫后持續升高。三免之后抗體效價達到最高值。在整個試驗過程中，免疫不給藥組與空白對照組相比，抗體水平無差異顯著（P＞0.05）。扶正解毒顆粒與空白對照組相比不同時間抗體水平均存在差異顯著（P＜0.05）。黃芪多糖對照組自免疫后21d起，于空白對照組存在差異顯著（P＜0.05），表明，扶正解毒顆粒較黃芪多糖粉起效更快。

免疫后14天，與免疫不給藥組相比較，扶正解毒顆粒低劑量組的抗體水平存在差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組差異極顯著（P＜0.01）。免疫后21天，與免疫不給藥組相比，黃芪多糖組與扶正解毒顆粒低劑量組抗體水平存在差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組差異極顯著（P＜0.01）。免疫后28天，與免疫不給藥組相比，黃芪多糖組與扶正解毒顆粒低劑量組差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒推薦劑量組差異極顯著（P＜0.01）。免疫后 40天，與免疫不給藥組相比，黃芪多糖組抗體水平差異顯著（P＜0.05），扶正解毒顆粒低劑量組和推薦劑量組差異極顯著（P＜0.01）。

3 結果與討論

試驗表明，扶正解毒顆粒可促進免疫器官的良好生長發育，直接增強了機體的細胞免疫功能和體液免疫功能。扶正解毒顆粒是一種良好的免疫調節劑，在免疫的同時，服用扶正解毒顆粒，能夠提高機體的免疫應答，增加抗體效價，從而提高雞群的整體抵抗力。但由于中草藥具有雙向調節作用，用量太小達不到效果、而用量過大可能起到抑制作用。通過本次試驗，按臨床推薦劑量使用扶正解毒顆粒：混飲，每1L水，0.5～1.5g，每日2次，連用3-5天，可用于禽流感疫苗免疫增強劑，提高機體的抗體水平。因此，扶正解毒顆粒在禽流感免疫預防中可以作為免疫增強劑，通過改善雞體狀況、增強免疫器官的機能來實現。在養雞生產中合理應用，既可以提高免疫效果，提高疫苗的保護率，延長免疫期，又具有毒副作用小、無殘留等優點，符合綠色環保的要求，對人類健康不會產生不良影響，符合市場的需求，有著廣闊的應用前景。

參考文獻：（略）