黃緣閉殼龜產卵孵化的對比試驗

黃勇 ，郭良鑫 ，畢冠蘭 ，歐陽鑫 ，賀勝利

（1.信陽市水產技術推廣站，河南 信陽 464031;2.信陽市水產科學研究所，河南 信陽 464031）

黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata），別名黃緣盒龜，俗稱夾板龜、斷板龜、金頭龜、黃板龜等，屬爬行綱，龜鱉亞綱，龜鱉目，曲頸龜亞目，地龜科，閉殼龜屬，其主要食性為雜食性，以動物性餌料為主，在野外條件下主要喜食蚯蚓、蛞蝓、蜈蚣、金龜子、蝸牛等，在動物性餌料缺乏時，也食些植物性餌料，如青菜葉、瓜果等；人工養殖可喂些動物肉、內臟、人工配合飼料以及西紅柿香蕉等水果。黃緣閉殼龜為水陸兩棲龜類，以陸棲為主，不能長時間生活在干燥的環境里，喜歡經常洗浴和飲水，多生活于山區丘陵地帶，多見于陰暗潮濕有水的樹根石縫等處。高溫季節晝伏夜出，春秋兩季在有陽光時，白天喜出來曬太陽，在氣溫低于10℃左右時，即進入冬眠狀態。黃緣閉殼龜在野外生長條件下7—8齡后達到性成熟，在人工培育條件下可提前1～2年達到。其發情交配期在每年5—10月，集中產卵期信陽地區為5月中旬至7月中旬。雌龜正常每年可產卵1～2次，每次產卵1～4枚。近年來隨著自然生態環境的不斷惡化以及人類的濫捕濫捉等原因，致使黃緣閉殼龜野生種群數量急劇減少，因此開展黃緣閉殼龜救護繁殖等方面的研究具有十分重要的意義。作者在2018年對黃緣閉殼龜野生個體與人工培育子一代個體的產卵孵化做了對比試驗，結果如下。

1 材料與方法

1.1 黃緣閉殼龜野生個體

親龜是2006年來自信陽大別山區的野生個體，個體當時全部達到性成熟，人工飼養至今。龜齡為20—30齡，產卵12年以上，其中雌龜68只，平均體質量為925 g/只；雄龜26只，平均體質量為650 g/只。雄龜與雌龜在每年的4月下旬至7月中旬分開飼養，待雌龜結束產卵后合并在一起飼養，雌雄親龜均自然交配，自然產卵。

1.2 黃緣閉殼龜人工培育子一代

親龜是2009年野生個體繁育的子一代，人工飼養至今。親龜體質健壯，體型飽滿，外觀漂亮，無傷無病，活潑好動，反應靈活，已全部達到性成熟，龜齡為9齡，產卵2～3年，其中雌龜68只，平均體質量為784 g/只；雄龜19只，平均體質量為532 g/只。雄龜與雌龜在每年的4月下旬至7月中旬分開飼養，待雌龜結束產卵后合并在一起飼養。雌雄親龜均自然交配，自然產卵。

1.3 親龜池的建造

野生個體與人工培育的子一代親龜在自然條件相同的兩個龜池內分開飼養。龜池均建在環境安靜、背風向陽的地方，池長12 m，池寬5 m，池高0.6 m，池壁光滑，由水泥和磚塊建成，并附有防逃檐。池底平整，由泥土建成，呈緩坡狀，坡度10°左右。池內植有喬木和灌木，有常青落葉植被，占池內總面積的三分之二，有遮蔭降溫作用。龜池內建有龜休息區、產卵場、飲水洗澡區、活動區等不同的功能區，整個養殖區域模擬仿生態的自然環境建設。

1.4 親龜的日常飼養及管理

待驚蟄后，氣溫穩定且平均值達到16℃以上時，于2018年4月28日的晴天上午將親龜從越冬池內移到消過毒的飼養池內，雌雄親龜分開飼養。投喂嚴格按照“四定”的要求，用浙江產的某牌金龜料、鮮蝦、西紅柿、胡蘿卜、南瓜和珠海某牌龜鱉多蛋素等原料按照一定比例配比而成的餌料，按照體質量 1%～3%的日給餌率，于每日 15：00—17：00放入投飼盤內投喂，1 h左右吃完為宜。每天對飲水洗澡區進行清理，并及時注入新水，保證水質符合漁業養殖用水標準。每日早、中、晚對龜池巡視，觀察龜的攝食、交配、產卵等活動，保持良好的生態環境，防止敵害生物的入侵、龜的逃逸，檢查龜體有無病傷，及時發現疾病并準確診斷對癥下藥，認真做好生產日志記錄。親龜從2018年4月28日移出室外飼養至2018年11月15日進入越冬房冬眠，全年室外生產管理共計185 d。

1.5 龜卵的收集

黃緣閉殼龜的最適產卵氣溫是25～35℃。信陽地區為5月中旬至7月中旬，其中6月為產卵高峰期。在產卵期開始前，先將產卵場中25 cm厚的細沙徹底翻動一遍，然后噴灑適量的水，使沙層的含水量保持在7%左右。黃緣閉殼龜通常在傍晚產卵，管理人員每天傍晚時觀察雌龜的產卵情況，確定產卵位置。次日清晨，在產卵場找到產卵窩后，用手輕輕扒開卵窩上的沙土，將龜卵小心取出輕放在盛卵器中，放置龜卵時避免龜卵的滾動、撞擊、擠壓、陽光直射等。采卵結束后，整理好產卵場，做好產卵記錄。黃緣閉殼龜野生個體從5月14日產卵開始至7月19日結束，共產卵89窩，收集龜卵232枚；黃緣閉殼龜人工培育子一代從5月14日產卵開始至6月28日結束，共產卵49窩，收集龜卵133枚。

1.6 龜卵的孵化

1.6.1 孵化設施的前期準備 孵化房間面積為28 m2，具有良好的保濕保溫效果，內裝有排氣扇、自動檢測溫濕度的設備。孵化箱為規格50 cm×50 cm×40 cm、底部及箱壁有通氣孔的泡沫箱。孵化基質為直徑0.4～0.6 cm的膨化蛭石。房間內另配有溫度計、濕度計、淋水器、水桶等生產工具。

在產卵期開始前半月，將孵化房間徹底清掃并采取全室噴灑二氧化氯的方式進行殺菌消毒，將孵化箱用高錳酸鉀進行浸泡后曝曬，將孵化基質進行曝曬消毒，最大限度營造無菌環境。

1.6.2 龜卵的人工孵化 孵化前，在每個泡沫箱內裝入4 kg蛭石，并按照每1 kg蛭石淋入0.7 kg純凈水的比例調配好，放入龜卵后在箱體上用記號筆標注產卵日期、產卵池號、窩數、卵編號等。為了便于觀察龜卵的發育情況，2018年采用了半裸露孵化法進行孵化。將受精卵的動物極向上、沒有顯現受精的卵可隨意平放，輕輕覆上基質，使龜卵面的中央部分約1/6裸露在空氣中，然后蓋上箱蓋。在整個孵化過程中，孵化箱不采取任何加溫加濕措施，使龜卵在房間中正常孵化直至破殼出苗。

在孵化過程中，不隨意翻動受精卵，以免造成胚胎死亡。室內空氣干燥時，及時向空氣中噴灑水霧，使室內的濕度在孵化期內始終保持在75%～99%。每日早、晚各巡視1次，檢查濕度、溫度、空氣流通性、受精卵發育、破殼出苗等情況，及時清除霉變、壞死及未受精的卵，防止蛇、鼠等敵害生物的危害，并做好孵化記錄。

1.7 稚龜的收集

受精卵發育到第6胚胎期時，胎體各器官基本發育成形，對于外界刺激開始有反應，即將破殼時，稚龜用喙輕啄蛋殼，啄出小洞再逐漸擴大，經過1～2 d可破殼而出。破殼后，稚龜會迅速鉆入蛭石中。第2天取出稚龜，放入20 g/m3的高錳酸鉀溶液中浸泡10 min，隨后將清洗過的稚龜，按照每平方米50只的密度放入消過毒的稚龜飼養箱中進行飼養管理。對于少量卵黃囊吸收不徹底的稚龜，放入無菌器具中，1～3 d后卵黃囊可自行吸收干凈。

2 結果

2.1 黃緣閉殼龜野生個體

野生個體雌龜68只，雄龜26只，產卵時間為2018年5月14日至2018年7月18日。在整個孵化期，孵化室內空氣平均濕度為83.6%，空氣平均溫度為29.1℃，野生個體所產龜卵孵化的有效積溫為2 062～2 308度日。產卵及受精孵化情況見表1。

表1 野生個體的產卵及受精孵化情況統計表

2.2 黃緣閉殼龜人工培育子一代個體

人工培育子一代個體雌龜68只，雄龜19只，產卵期為2018年5月14日至2018年6月27日。在整個孵化期，孵化室內空氣平均濕度為83.6%，空氣平均溫度為29.1℃，人工培育子一代個體所產龜卵孵化的有效積溫為2 016～2 336度日。黃緣閉殼龜人工培育子一代個體產卵及受精孵化情況見表2。

表2 人工培育子一代個體的產卵及受精孵化情況統計表

3 討論

由表1可知，野生黃緣閉殼龜雌龜共計產卵232枚，平均每只雌龜產卵3.41枚，平均每枚龜卵體質量16.87 g。由表2可知，人工培育子一代雌龜共計產卵133枚，平均每只雌龜產卵1.96枚，平均每枚龜卵體質量11.32 g。對比發現，無論在雌龜平均產卵數量還是在產卵平均體質量方面，野生個體雌龜都要優于人工培育子一代個體雌龜，說明野生個體雌龜的生育能力遠優于人工培育子一代個體雌龜。造成這一現象的原因可能有以下3個方面：一是野生個體被捕獲時已達性成熟，體質健壯，生命力頑強，人工培育子一代個體由野生個體交配所產，經人工培育而達性成熟，故在物種基因遺傳繁育性方面有一定差別；二是野生個體的平均體質量為828 g/只，人工培育子一代個體的平均體質量為729 g/只，野生個體的平均體質量大于人工培育子一代個體；三是野生個體龜齡為20—30齡，都產卵10年以上，可能正處于產卵較理想的龜齡；人工培育子一代個體龜齡為9齡，才產卵2年左右，可能正處于初產期，野生個體的生殖系統比人工培育子一代個體的生殖系統更加成熟穩定。

野生黃緣閉殼龜所產卵的受精率為73.71%。人工培育子一代黃緣閉殼龜所產卵的受精率為48.12%。對比發現，野生個體所產卵的受精率要遠遠高于與子一代個體所產卵的受精率。這種現象可能由以下3種原因造成：一是野生個體雄龜與雌龜的配比為1.0：2.6，人工培育子一代個體雄龜與雌龜的配比為1.0：3.6，野生個體的雌雄配比更為合理；二是野生個體的雄龜和雌龜在一起飼養10年以上，群體結構相對穩定不變，雄龜和雌龜間的信息交流更為順暢；三是野生個體雄龜的生殖系統發育成熟穩定，個體平均體質量更大，其精子的結和力更強更有旺盛。

野生黃緣閉殼龜所產卵的孵化率為88.30%，人工培育子一代黃緣閉殼龜所產卵的孵化率為89.06%。二者所產卵的孵化率基本接近，但孵化率仍然不高。可能由以下3個原因造成：①雄龜的體質不夠強壯，精子質量欠佳，致使卵子出現弱精或不受精的現象；②受精卵在室內自然孵化，較易受外界溫度、濕度等因子的變化影響；③工作人員的生產管理操作不規范，造成受精卵的受傷、滾動、破損、細菌感染等情況的發生。

綜上，可以從以下5個方面來提高黃緣閉殼龜的產卵量、受精率及孵化率：①科學引進種龜。選擇種龜時盡量選擇個體大，活力強，基因純正的個體，不要選擇雜種和近親繁育個體；②加強親龜的培育。營造良好的仿生態環境，合理投喂全價配合飼料，及時做好疾病的診治和預防，保證親龜的健壯體質；③合理搭配雌雄配比。盡量使雄龜和雌龜的配比保持在1：2左右，最大限度保證雌龜和雄龜的交配效率；④確保雄龜和雌龜搭配的穩定性。保證龜池內群體結構相對穩定，不要隨意引進和替換新龜；⑤掌握孵化關鍵技術。在人工孵化過程中，準確把握好所需溫度、濕度，保證孵化室的通氣性，做到精細管理，減少生態因子的變化對胚胎發育所造成的刺激。